本发明专利技术公开了一种治疗脂多糖/D‑氨基半乳糖胺(LPS/GalN)诱导肝损伤的药物，所述治疗脂多糖/D‑氨基半乳糖胺(LPS/GalN)诱导肝损伤的药物为连翘酯苷A。本发明专利技术的连翘酯苷A可以减轻脂多糖/D‑氨基半乳糖胺(LPS/GalN)诱导的肝脏病理损伤、丙二醛(MDA)含量以及血清ALT，AST水平。此外，连翘酯苷A抑制LPS/GalN导致的NF‑κB激活、血清TNF‑α、肝脏TNF‑α水平。此外，连翘酯苷A上调Nrf2和血红素加氧酶1的表达。结果表明，连翘酯苷A对LPS/GalN诱导的肝损伤的保护作用是通过激活Nrf2和抑制NF‑κB激活而实现。
A liver injury induced by lipopolysaccharide treated /D D-galactosamine drugs
The invention discloses a method for treatment of LPS /D D-galactosamine (LPS/GalN) drug induced liver injury, the treatment of LPS /D D-galactosamine (LPS/GalN) drug induced liver injury of forsythiaside A. A forsythiaside of the invention can reduce lipopolysaccharide /D D-galactosamine (LPS/GalN) induced hepatic injury, malondialdehyde (MDA) content of serum ALT and AST levels. In addition, forsythiaside A inhibits LPS/GalN induced NF kappa B activation, serum TNF, liver TNF alpha alpha level. In addition, forsythia glycosides A up-regulated the expression of Nrf2 and heme oxygenase 1. The results show that the protective effect of forsythiaside A on liver injury induced by LPS/GalN is realized through the activation of Nrf2 and inhibition of NF kappa B activation.
【技术实现步骤摘要】
一种治疗脂多糖/D-氨基半乳糖胺诱导肝损伤的药物
本专利技术属于临床医学
，尤其涉及一种治疗脂多糖/D-氨基半乳糖胺(LPS/GalN)诱导肝损伤的药物。
技术介绍
肝功能衰竭时往往发生内毒素血症和脓毒症几率要明显增高，并且常常因有效药物缺乏导致高死亡率。因此，迫切需要对肝损伤开发有靶向性的且明确有效的药物疗法。脂多糖和D-氨基半乳糖胺诱导的急性肝损伤小鼠是一种广泛使用的肝损伤模型。它多年来已被用于潜在治疗药物的初步药理学研究。半乳糖胺是肝毒性试剂，肝毒性主要是通过抑制肝细胞RNA和蛋白合成。脂多糖是可以诱导炎性细胞因子的产生的内毒素。这些促炎介质能够导致肝组织损伤。连翘(作为中国最著名的中药材之一)已被广泛用于治疗各种感染性疾病，如肾炎，溃疡、丹毒。连翘是传统的中成药双黄连的主要成分。连翘酯苷A是从连翘果实风干后提取的一种活性成分，已报告其有多个药理活性，包括抗炎，抗氧化活性。以往的研究表明，连翘酯苷A可以保护防止过氧化氢诱导的细胞凋亡和PC12细胞的氧化应激。此外，连翘酯苷A被发现在抑制LPS诱导的小鼠急性肺损伤和抑制LPS诱导的鸡法氏囊炎症反应。另外，还有研究发现连翘酯苷A对衰老加速小鼠有神经保护作用。LPS/GalN诱导的肝损伤是目前公认的肝损伤模型，本专利技术采用连翘酯苷A治疗LPS/GalN诱导肝损伤，并进一步研究其起效的机制，为肝损伤的治疗探讨新的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种治疗脂多糖/D-氨基半乳糖胺诱导肝损伤的药物，旨在解决连翘酯苷A对脂多糖/氨基半乳糖胺诱导的肝损伤的影响仍不清楚的问题。本专利技术是这样实现的，一种治疗脂多糖/D-氨基半乳糖胺诱导肝损伤的药物，所述治疗脂多糖/D-氨基半乳糖胺诱导肝损伤的药物为连翘酯苷A。本专利技术的另一目的在于提供一种验证所述治疗脂多糖/D-氨基半乳糖胺诱导肝损伤的药物的动物模型，所述动物模型为：D-氨基半乳糖胺(GalN)800毫克/千克和LPS50微克/千克(溶解在PBS中)腹腔注射诱导肝损伤模型。本专利技术的另一目的在于提供一种所述动物模型的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括：步骤一，七十五个小鼠随机分成五组，每组含有15只小鼠；步骤二，I组:正常对照组，小鼠接受等量的PBS；II组:模型对照组，小鼠接受GalN800毫克/千克和LPS50微克/千克；III-V组:连翘酯苷A治疗组，给予小鼠腹腔注射连翘酯苷A，剂量分别为15毫克/千克，30毫克/千克，60毫克/千克，给药时间为LPS/半乳糖胺处理前1小时；步骤三，收集用于后续分析的血液和肝脏组织。进一步，所述连翘酯苷A减轻LPS/GalN诱导的肝脏病理损伤、丙二醛含量以及血清ALT，AST水平；连翘酯苷A抑制LPS/GalN导致的NF-κB激活、血清TNF-α、肝脏TNF-α水平；连翘酯苷A上调Nrf2和血红素加氧酶1的表达；连翘酯苷A对LPS/GalN诱导的肝损伤的保护作用是通过激活Nrf2和抑制NF-κB激活而实现。本专利技术提供的治疗LPS/GalN诱导肝损伤的药物，连翘酯苷A是从连翘果实风干后提取的一种活性成分，已报告其有多个药理活性，包括抗炎，抗氧化活性。本专利技术为了明确连翘酯苷A对LPS/GalN所致的小鼠急性肝损伤的保护作用，LPS(50微克/千克)/GalN(800毫克/千克)诱导构建小鼠急性肝损伤模型。小鼠给药LPS/GalN后1小时再给药连翘酯苷A。结果表明，连翘酯苷A可以减轻LPS/GalN诱导的肝脏病理损伤、丙二醛(MDA)含量以及血清ALT，AST水平。此外，连翘酯苷A抑制LPS/GalN导致的NF-κB激活、血清TNF-α、肝脏TNF-α水平。此外，发现，连翘酯苷A上调Nrf2和血红素加氧酶1的表达。结果表明，连翘酯苷A对LPS/GalN诱导的肝损伤的保护作用是通过激活Nrf2和抑制NF-κB激活而实现。附图说明图1是本专利技术实施例提供的验证治疗LPS/GalN诱导肝损伤的药物的模型构建方法流程图。图2是本专利技术实施例提供的各组小鼠血清ALT、AST水平示意图。图3是本专利技术实施例提供的HE染色(200×)示意图；图中：A:正常对照组；B：LPS/GalN组；C：LPS/GalN+连翘酯苷A(15mg/kg)组；D：LPS/GalN+连翘酯苷A(30mg/kg)组；E组：LPS/GalN+连翘酯苷A(60mg/kg)组。图4是本专利技术实施例提供的各组血清和肝脏组织TNF-α水平示意图。图5是本专利技术实施例提供的各组肝脏组织MDA检测结果示意图。图6是本专利技术实施例提供的连翘酯苷A能够抑制被LPS/GalN诱导的NF-κB激活状态示意图。图7是本专利技术实施例提供的连翘酯苷A对Nrf2和HO-1的表达的影响示意图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。下面结合附图对本专利技术的应用原理作详细的描述。如图1所示，本专利技术实施例提供的验证治疗脂多糖/D-氨基半乳糖诱导肝损伤的药物的模型构建方法包括以下步骤：S101：七十五个小鼠随机分成五组，每组含有15只小鼠；S102：I组，正常对照组，小鼠接受等量的PBS；II组，模型对照组，小鼠接受GalN800毫克/千克和LPS50微克/千克；III-V组，连翘酯苷A治疗组，给予小鼠腹腔注射连翘酯苷A，剂量分别为15毫克/千克，30毫克/千克，60毫克/千克，给药时间为LPS/GalN处理前1小时；S103：收集用于后续分析的血液和肝脏组织。下面结合试验对本专利技术的应用原理作进一步的描述。1.材料与方法1.1.材料连翘酯苷A购自中国药品生物制品检定所(中国北京)。小鼠TNF-αELISA试剂盒购自R&DSystems公司(明尼苏达州明尼阿波利斯)。LPS(大肠杆菌，O55：B5)和D-氨基半乳糖胺均购自Sigma公司(圣路易斯，密苏里州，美国)购买的。抗PNF-kBp65亚基、抗NF-κBp65亚基、抗HO-1、抗Nrf2和抗β肌动蛋白的单克隆抗体均购自SantaCruzBiotechnology公司(SantaCruz公司，加利福尼亚，美国)。丙二醛(MDA)，谷草转氨酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测试剂盒由南京建成生物工程研究所(南京，江苏，中国)提供。其它试剂均为分析纯级。1.2.动物雄性BALB/c小鼠，体重约18～22g，购自郑州大学实验动物中心(中国郑州)购买。将小鼠圈养在环境受控的房间(24±1℃，40％-80％的湿度)。他们被允许自由获得食物和水。动物实验流程按照美国国立卫生研究院公布的《实验动物关怀与使用指南》进行。1.3.实验设计D-半乳糖胺800毫克/千克和LPS50微克/千克(溶解在PBS中)腹腔注射诱导肝损伤模型。探讨连翘酯苷A对LPS/氨基半乳糖诱导的急性肝损伤的保护作用。七十五个小鼠随机分成五组，每组含有15只小鼠：I组，正常对照组，小鼠接受等量的PBS；II组，模型对照组，小鼠接受D-半乳糖胺800毫克/千克和LPS50微克/千克；III-V组，连翘酯苷A治疗组，给予小鼠腹腔注射连翘酯苷A，剂量分别为15毫克/千克，30毫克/千克，60毫克/千克，给药时本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种治疗脂多糖/D‑氨基半乳糖胺诱导肝损伤的药物，其特征在于，所述治疗脂多糖/D‑氨基半乳糖胺诱导肝损伤的药物为连翘酯苷A。
【技术特征摘要】
1.一种治疗脂多糖/D-氨基半乳糖胺诱导肝损伤的药物，其特征在于，所述治疗脂多糖/D-氨基半乳糖胺诱导肝损伤的药物为连翘酯苷A。2.一种验证权利要求1所述治疗脂多糖/D-氨基半乳糖胺诱导肝损伤的药物的动物模型，其特征在于，所述动物模型为：D-氨基半乳糖胺800毫克/千克和LPS50微克/千克腹腔注射诱导肝损伤模型。3.一种如权利要求2所述动物模型的构建方法，其特征在于，所述动物模型的构建方法包括：步骤一，七十五个小鼠随机分成五组，每组含有15只小鼠；步骤二，I组:正常对照组，小鼠接受等量的PBS；II组:模型对照组，小鼠接受GalN800毫克/千克和LPS50微克/千克；I...
【专利技术属性】
技术研发人员：潘陈为，陈未来，周光耀，金玲湘，李杰，郑毅，诸葛璐，方佩佩，
申请(专利权)人：温州医科大学附属第二医院，温州医科大学附属育英儿童医院，
类型：发明
国别省市：浙江,33
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。