寡糖衍生物及其制造方法技术

与岩藻糖或鼠李糖多糖类相比均匀性高、而且有优异抗溃疡效果的以下通式所示寡糖衍生物：Ｙ－ＯＣＨ（ＣＨ↓［２］ＮＨＲ）↓［２］，式中Ｙ是聚合物２～２０的寡岩藻糖或寡鼠李糖，其一部分羟基也可以是硫酸酯化的；此外，Ｒ是苯基、高级烷基苯基、高级烷基、或－（ＣＨ↓［２］）↓［ｎ］－ＮＨＸ，ｎ是１～１０的整数，Ｘ是高级链烷酰基、或烷胺基。（*该技术在2018年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，尤其涉及能有效预防和治疗胃及十二指肠等消化器官粘膜的炎症或溃疡发生的寡岩藻糖或寡鼠李糖衍生物。
技术介绍
作为先有技术上使用的抗溃疡剂，已知有以抑制胃酸分泌为目的的H2-阻滞剂或质子泵抑制剂。此外，以积极治疗胃炎或胃粘膜细胞为目的，近年来对前列腺素或碱性纤维芽细胞增殖因子等的利用也进行了探讨。这些药剂一方面显示出有效的治疗效果，另一方面也有引起溃疡发病、特别是其涉及幽门螺杆菌(H.pylori)的复发之虞，因而指出，为了消化性溃疡的根本治疗，包括根除该菌在内的治疗是必要的(浅香正博，“Helicobacter pylori と胃粘膜病变”，先端医学社，1995年7月1日)。也已知，某种双岐杆菌或乳酸菌以及从海蕴或青海苔等制备的多糖类或寡糖类，不仅能预防溃疡而且也能有效促进其治愈，可以作为抗溃疡剂使用(特开平6-247861号公报，特开平7-138166号公报)。这些多糖或寡糖以岩藻糖或鼠李糖为主成分。其中，作为岩藻糖聚合物的岩藻依聚糖，不仅对溃疡形成有预防效果或治愈促进效果，而且对幽门螺杆菌(H.pylori)也有粘连抑制作用。然而，这些多糖或寡糖本身就抗溃疡活性而言还不十分令人满意，而且也难以得到分子量等的均一性。本专利技术的主要目的是提供均一性比上述多糖类高、而且有更优异抗溃疡效果的。专利技术公开本专利技术涉及的寡糖衍生物可用以下通式表示Y1-OCH(CH2NHR)2式中，Y1是聚合数2～20的寡岩藻糖，其一部分羟基也可以是硫酸酯化的。此外，R是苯基、高级烷基苯基、高级烷基、或-(CH2)n-NHXn是1～10的整数，X是高级链烷酰基、或烷胺基。在这种情况下，烷胺基也可以有取代基。本专利技术涉及的另一种寡糖衍生物可用以下通式表示Y2-OCH(CH2NHR)2式中，Y2是聚合数2～20的寡鼠李糖，其一部分羟基也可以是硫酸酯化的。此外，R是苯基、高级烷基苯基、高级烷基、或-(CH2)n-NHX，n是1～10的整数，X是高级链烷酰基、或烷胺基。在这种情况下，烷胺基也可以有取代基。这些寡糖衍生物有优异的抗溃疡效果等诸性质。此外，本专利技术涉及的寡糖衍生物的制造方法包含使寡岩藻糖或寡鼠李糖的还原性末端糖残基氧化分解而转化成醛基的步骤，让对应的烷胺、芳胺类中至少一种作用于该醛基而生成席夫碱的步骤，和使该席夫碱还原的步骤。即，岩藻依聚糖(岩藻糖多糖)或鼠李聚糖(鼠李糖多糖)通过酸处理等制成寡糖(大约3～20个岩藻糖或鼠李糖的低聚物)，进而通过过碘酸氧化、与对应胺类反应、及还原处理，来制造寡糖衍生物的方法。按照本专利技术，提供一种幽门螺杆菌用抑制剂，这种药剂含有本专利技术的寡糖衍生物1种或2种以上，即寡岩藻糖衍生物和/或寡鼠李糖衍生物。此外，按照本专利技术，也提供消化器官预防/治疗剂，这种药剂含有本专利技术的寡糖衍生物1种或2种以上，即寡岩藻糖衍生物和/或寡鼠李糖衍生物。本专利技术的寡糖衍生物的制造方法之一的实施形态包含以下步骤1～8步骤1从含有岩藻依聚糖或鼠李聚糖或鼠李聚糖硫酸酯的海藻类(海蕴、黑海布、墨角藻、青海苔等)，用众所周知的萃取方法萃取多糖。步骤2所得到的多糖类溶解在0.075N～0.1N左右的盐酸或三氟乙酸溶液中，在100℃进行10～20分钟加热处理，使多糖转化成寡糖。处理后有氢氧化钠中和，向该溶液中加NaBH4，在室温或4℃进行16小时还原处理。步骤3从步骤2的操作得到的寡糖的糖醇体溶液，用透析(分级分子量500)或电渗析或离子交换树脂脱盐。步骤4向步骤3得到的溶液中加偏高碘酸钠，在冰冷却温度下反应1小时左右。在结构上还原末端和非还原末端以外的糖链不会氧化的寡糖例如1→3结合的寡糖等的情况下，也可以反应更长时间。相对于反应液中的过碘酸而言，添加过量乙二醇，再反应1小时左右。用与步骤3同样的方法使本溶液脱盐。从这个操作，可以得到末端有醛基的寡糖衍生物(液体)。步骤5向步骤4得到的液体中添加乙酸使之能达到0.5M浓度，在室温下反应20小时。反应液用分级分子量500的透析膜透析，使内液冷冻干燥，得到作为目的的寡糖。此外，寡糖级分除用透析法脱盐外，还可以用活性炭柱色谱法或凝胶过滤等，脱盐兼配制任意分子量尺度的级分。步骤6步骤5得到的寡糖级分溶解在含40～50％丙醇的水溶液中，添加芳胺、烷胺类，在45℃反应2小时，生成席夫碱。在这种情况下，所用溶剂只要是能溶解寡糖和烷胺的物质(二甲基亚砜、二甲基磺酰胺等)即可。在这种情况下，作为可以反应的烷胺类、芳胺类，其选择没有特别限制，但较好的是有取代和无取代的苯胺类、有取代和无取代的高级烷胺类，在这种情况下，作为取代基，可以列举烷基、链烷酰胺基、烷胺基等。步骤7向步骤6得到的液体中加硼烷三甲胺，在45℃使席夫碱还原20小时。作为还原剂，除硼烷三甲胺外，也可以适当利用与本目的一致的还原剂(例如硼烷二甲胺、NaCNBH3、NaBH4等)。步骤8步骤7的还原反应结束后，用蒸发器等蒸出溶剂，然后用氯仿∶甲醇∶水＝2∶1∶1的混合液分配，收集水层。水层用氯仿洗涤后冷冻干燥，得到寡糖烷胺复合物组成的寡糖衍生物。分配萃取中使用的溶剂可根据烷胺的性质适当改变。按照本专利技术的寡糖衍生物可以确认具有对消化器官溃疡病原菌幽门螺杆菌(H.pylori)的粘连抑制效果，以及乙酸诱发溃疡的治疗效果。按照本专利技术得到的消化器官溃疡预防·治疗剂的剂型或给药量可以任意选定。然而，一般来说，较好将本药剂与医药上可接受的液态或固态载体配合，必要时添加溶剂、分散剂、乳化剂、缓冲剂、稳定剂、赋形剂、粘结剂、崩解剂、润滑剂等，制成片剂、颗粒剂、散剂、粉末剂、胶囊剂等剂型再使用。此外，本药剂的成人每日较好给药量是约0.1mg/kg～10mg/kg，更好的是0.3mg/kg～3mg/kg。附图简单说明附图说明图1是寡岩藻糖十二烷基苯胺衍生物(OFDAD)的NMR(13C-NMR)谱图。图2是寡岩藻糖十二烷基苯胺衍生物(OFDAD)的IR谱图。图3显示乙酸诱发溃疡的操作流程图。专利技术实施最佳形态实施例1 寡岩藻糖衍生物的制备(1-1)岩藻依聚糖的萃取和岩藻糖寡糖的制备冲绳海蕴(Cladosiphon okamuranus Tokida)用去离子水进行脱盐后，以每1kg藻体1升去离子水的比例悬浮在去离子水中，本悬浮液用盐水调至pH2。此液在100℃加热萃取10分钟后，用纱布滤出藻体，滤液进一步离心分离(9000rpm，60分钟)以除去不溶物。得到的上清液用NaOH中和后，加偏高碘酸钠使之达到0.2M浓度以使混入的藻酸分解，在避光下反应20小时后，用乙二醇使反应停止。向本溶液中添加硼氢化钠使之达到0.2M浓度，在室温反应16小时。此溶液用超过滤(分级分子量5,000)法浓缩后、透析。透析内液用盐酸调至pH2，在100℃加热处理10分钟。处理液透析后冷冻干燥，得到岩藻依聚糖(4g/lkg湿藻体)。这种岩藻依聚糖以200mg/ml的浓度溶解，加盐酸(或三氟乙酸)使之达到0.075M～0.1M浓度。在100℃加热10分钟后，冷却至室温。此液用NaOH中和后，以200mg/lg岩藻依聚糖的比例添加NaBH4，在4℃反应20小时。反应液用乙酸调至pH6，用电渗析装置(旭化成，MicroaeilyzerTM，使用AC 220膜)脱盐、脱盐后，本文档来自技高网...

【技术保护点】
以下通式所示的寡糖衍生物：Ｙ↓［１］－ＯＣＨ（ＣＨ↓［２］ＮＨＲ）↓［２］式中，Ｙ↓［１］是聚合数２～２０的寡岩藻糖，其一部分羟基也可以是硫酸酯化的；此外，Ｒ是苯基、高级烷基苯基、高级烷基、或－（ＣＨ↓［２］）ｎ－ＮＨＸ，ｎ是１～１ ０的整数，Ｘ是高级链烷酰基、或烷胺基。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：长冈正人，柴田英之，木村逸子，桥本秀介，
申请(专利权)人：株式会社雅库路特本社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]