明党参多糖硫酸酯化物和制备方法及其应用技术

本发明专利技术从明党参中提取分离出粗多糖Ａ、Ｂ、Ｃ，经纯化首次得到六个均一多糖Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ，再经硫酸酯化反应得明党参多糖硫酸酯化物Ａ↓［１］、Ｂ↓［１］、Ｃ↓［１］，Ａ↓［１］平均每个单糖上连接两个硫酸基、Ｂ↓［１］和Ｃ↓［１］平均每个单糖上均连接三个硫酸基，多糖硫酸酯化物的分子量超过２００万，它由硫酸基葡萄糖组成，该糖的苷键构型为α构型；明党参多糖硫酸酯化物的制法是，首先从明党参药材中提取粗多糖，然后将多糖硫酸酯化而制成，制备工艺新颖简单，成本低，经药理试验明党参多糖硫酸酯化物对小鼠移植肿瘤（Ｓ－１８０）具有显著的抑制作用，它还能显著降低急性血瘀大鼠的血小板聚集率和全血黏度，凝血时间明显下降。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种天然多糖硫酸酯化物，具体地说是涉及一种从明党参中提取的多糖，经硫酸酯化而制成的明党参多糖硫酸酯化物及其制备方法和应用。
技术介绍
明党参为伞形科单种属植物明党参Changium smyrnioides Wolff的干燥根。入药始于明、清，用于“补肺气通下行”(《本草从新》)；“治头晕泛恶，中风昏仆”(《饮片新参》)；《中国药典》收载，谓″润肺化痰，养阴和胃，平肝，解毒″。明党参为《中国药典》收载常用中药，特产江苏，为地道药材产区，有“独峰明党”的美誉，50～60年代大量出口越南等国，其强壮滋补作用已在东南亚一带享有盛名。天然多糖及其硫酸酯化物的概况随着分子生物学的飞速发展，糖的生物功能已被逐步揭示和认识。多糖的糖链能控制细胞的分裂与分化，调节细胞的生长与衰老，能增强机体的免疫功能等。20世纪70年代，对多糖生物活性的研究领域日趋广泛，相继发现糖类物质具有抗炎、抗病毒、抗辐射、降血脂、抗水肿、抗消化性溃疡、诱导干扰素产生、促进蛋白质、核酸生物合成等功能。80年代后，发现一些天然的或人工合成的多糖硫酸酯对艾滋病病毒有明显的抑制作用，这引起了人们极大的关注与兴趣。目前，全世界对糖类药物的研制与开发空前活跃，有些药物已投放市场，已从天然产物中分离出300种以上糖类化合物，并进行了生物功能的检测。已有数种多糖类药物用于临床。多糖是一类非特异性免疫增强化合物，能提高机体的免疫功能，增强抗病能力，有防老、防衰、防癌、抗癌、抗肝炎等作用，受到人们的普遍重视，得到了相应的研究和开发。含硫多糖，如硫酸软骨素、肝素等还有抗凝血、抗病毒等其它生理功能。通过化学改造能使这些多糖硫酸酯化合物的毒性更低，活性更高。20世纪60年代以来陆续发现，一些半合成硫酸化多糖，如香菇多糖、右旋糖酐、牛膝多糖的硫酸化衍生物，是多种胞膜病毒的强大抑制剂，尤其是具有抗HIV-1的活性，还有葡聚糖经硫酸化也得到与肝素相同的抗凝血活性结果，引起更广泛的重视。近几年，还通过一些天然多糖的硫酸化得到了用途更为广泛的多糖衍生物。在体内、外实验中，硫酸化多糖均表现出良好的抗病毒作用，然而硫酸化多糖的免疫促进活性被认为是整体情况下抗病毒、抗肿瘤作用的重要机制之一，所以，日本学者研究了海藻中的天然硫酸化多糖，发现其在体内具有抗肿瘤作用，而体外无效(田庚元，李寿桐，宋麦丽，等.牛膝多糖硫酸酯的合成及其抗病毒活性.药学学报，1995，30(2)107-111)。天然肝素有抗HIV-1活性，但活性很低，通过化学结构修饰虽能除去其抗凝血活性，但却无助于抗/01活性的提高，这是因为SO42-含量不足，通常认为每个单糖单位需要2~3个SO42-，才能有好的抗HIV-1活性，引起了药物学家和微生物学家的极大兴趣。同样，只要有足够的SO42-，葡聚糖也会具有抑制/01活性的作用。除了从已知的天然含硫多糖中筛选出抗HIV-1活性的药物外，还由某些天然多糖如香菇多糖、右旋糖酐、牛膝多糖、地衣多糖、褐藻淀粉等制备硫酸化多糖，而且也还在不断地寻找和开发新的含硫多糖，如从兰藻中提取得到的含硫酸脂体等等。同时，除了多糖硫酸酯的抗病毒应用外，在治疗心血管病上也得到了相应的开发。因此，采用适当的多糖母体(克服大多数多糖分子量大，难溶于水，难以通过血脑屏障等缺陷)制备高取代度的多糖硫酸酯并对其生物活性进行研究是一项有重要意义的工作。硫酸化多糖的药理活性 现今，多糖经硫酸化后的产物具有更多更好的药理活性，一直受到人们的关注，下列几种硫酸化多糖的药理活性为其代表。香菇多糖硫酸酯具有良好的抗HIV活性。浓度为100mg/L、10mg/L时，其对鸟类成髓细胞性白血病病毒的逆录酶的抑制率分别大于90％和70％。牛膝多糖硫酸酯(田庚元，李寿桐，宋麦丽，等.牛膝多糖硫酸酯的合成及其抗病毒活性.药学学报，1995，30(2)107-111)在抗病毒实验中表现出良好的抑制HBsAg、HBeAg病毒作用。当归多糖硫酸酯对脾细胞增殖有较好的促进作用，促进作用与剂量成良好的正相关性(杨铁虹.当归多糖硫酸酯的合成及其对脾细胞增殖的作用.第四军医大学学报，2001，22(5)432-434)。虎奶多糖硫酸酯化修饰后水溶性得到很好的改善，对Fe2+引起的鼠肝线粒体脂质过氧化有较强的抑制作用，对O2-具有高效的清除作用，同时对OH引起的DNA损伤具有一定的保护作用，表明其有较好的抗氧化作用，也就是有可能在抗肿瘤、防衰老、抗炎症、降血脂等方面发挥作用(邓成华，等.硫酸酯化虎奶多糖的制备及其抗氧化作用研究.中国生化药物杂志，2001，22(1)1-3)。鲨鱼软骨多糖硫酸酯化修饰后水溶性得到很好改善，并具有较强抗癌活性。褐藻淀粉硫酸酯能增加小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能；能增加小鼠血清中溶血素含量，具有增加体液免疫的功能；有一定促进淋巴细胞转化的作用；对环磷酰胺引起的白细胞减少有明显的对抗作用；能明显延长凝血时间和凝血酶原时间；能明显缩短优球蛋白溶解时间，表明能增强纤溶酶活性；有明显降低血清胆固醇的作用，总之，其具有机体免疫功能促进作用及机体损伤保护作用，还对防治动脉粥样硬化和血栓形成有着重要的意义(李东霞，等.SCAMP(鲨鱼软骨多糖)硫酸酯化多糖的制备及其光谱鉴定.光谱学与光谱分析，2002，22(1)59-62)。黄芪多糖硫酸酯通过对BHK细胞毒性作用实验以及对HSV-1生物合成抑制作用的研究表明，体外抗HSV-1的作用优于阿昔洛韦且毒性更低，也表明其对病毒感染的临床治疗具有应用前景(冯秀梅，陈邦银，张汉萍.黄芪多糖硫酸酯的合成及其抗病毒活性研究.中国药科大学学报，2002，33(2)146-148)。硫酸酯化多糖临床应用前景 硫酸酯化多糖是一类化学结构复杂、生物活性多样、疗效关系明确的生物活性物质，其中抗凝血、抗血栓、降血脂活性研究较多，相关的药物有的已经或即将进入临床应用，而其抗病毒、抗肿瘤活性的研究相对较少，有的才刚刚开始，相信它将有很好的临床应用前景(魏经建，等.硫酸酯化多糖化学及临床应用研究进展.中国生化药物杂志，1999，20(5)260-262.；董群，方积年.多糖在医药领域中的应用.中国药学杂志，2001，36(10)649-651.)。多糖硫酸酯化的方法 多糖硫酸酯化的方法很多，一般吡喃型多糖采用Wolfrom(Ueno Y，et al.An antitumor activity of the Sclertia of Griforaum bellate(Fr.)PILAT.Carbohydr Res，1982，101106-107.)方法，呋喃型采用Nagasawa(Adachi Y，et al.Physicochemical properties and antitumoractivities of chemical modified derivatives antitumor glucan“GriforaLE”from grifola frondasa.Chem Pharm Bull，1989，371838-1843.)方法。常用方法包括浓硫酸法、三氧化硫-吡啶法、氯磺酸-吡啶法、三氧化硫-二甲基甲酰胺法等。最常用的方法有三种，其中第三种方法产物回收方便，收率较高，故很本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种明党参多糖硫酸酯化物，其特征在于它包括Ａ↓［１］、Ｂ↓［１］、Ｃ↓［１］，其硫酸基含量分别为Ａ↓［１］：５２．６２％，Ｂ↓［１］：６２．３５％，Ｃ↓［１］：４０．１６％，Ａ↓［１］平均每个单糖上连接了两个硫酸基，Ｂ↓［１］平均每个单糖上连接了三个硫酸基，Ｃ↓［１］平均每个单糖上连接了三个硫酸基，多糖硫酸酯化物的分子量超过２００万，由硫酸基葡萄糖组成，该糖的苷键构型为α构型。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李祥，陈建伟，
申请(专利权)人：南京中医药大学，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]