本发明专利技术公开了β－岩藻糖硫代苷区域选择性保护３－ＯＨ的方法，并以此类３－硅烷基保护的岩藻糖硫代苷为供体，以三甲基硅基三氟甲磺酸酯（ＴＭＳＯＴｆ）和Ｎ－磺代琥珀酰亚胺为复合催化剂、或以单质碘为催化剂，在二氯甲烷中合成硫酸酯化的α（１→３）岩藻寡糖的方法。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术属于具有潜在药物功能的活性寡糖的制备和应用领域。
技术介绍
硫酸酯化的岩藻寡糖具有良好的抗凝血活性，其结构特点是含有α(1→2)、α(1→3)或α(1→4)连接的部分羟基硫酸酯化的岩藻糖重复单元。研究表明，在每个岩藻寡糖重复单元中不同位置硫酸酯化的寡糖会有不同的抗凝血活性(TheJournal of Biological Chemistry，1999，274，7656-7667；Carbohydr.Res.，2002，337，2231-2238)。然而，由于区域选择性和立体选择性难以控制等原因，目前该类寡糖大多是从海藻等生物体中提取得到的，只有几篇文献报道了硫酸酯化α(1→2)连接岩藻寡糖的化学合成方法(Synthesis，1998，56-62)。在这几篇有限的报道中，所用合成方法不仅合成步骤繁琐，而且所得产物产率低，选择性不好，有的甚至没有立体选择性。更重要的是，目前尚未见有关硫酸酯化α(1→3)岩藻寡糖合成方法的报道。
技术实现思路
本专利技术以乙基β-L-岩澡糖硫代苷为起始物，在N，N-二甲基甲酰胺(DMF)，咪唑(Im)和叔丁基二甲基氯硅烷(TBSCl)体系中，区域选择性地用TBS保护乙基β-L-岩澡糖硫代苷的3-OH，用苄基或其它酯基保护剩余的2，4位羟基，并以此类3-硅烷基保护的岩藻糖硫代苷为供体，以三甲基硅基三氟甲磺酸酯和N-碘代琥珀酰亚胺为催化剂、或以单质碘为催化剂，在二氯甲烷、乙醚、乙腈、硝基甲烷、或甲苯等溶剂中，-40℃-10℃的条件下合成α(1→3)连接L-岩藻寡糖苷。产物按传统方法脱除苄基或脱除酯基以后，在DMF中与三氧化硫吡啶复合物反应，得到硫酸酯化的β-L-岩澡糖苷，可作为潜在的抗凝血药物。本专利技术不仅大大提高了区域选择性和立体选择性，而且可以简便、高效地合成各种不同位置硫酸酯化α(1→3)L-岩藻寡糖及其衍生物。下面，结合实例对本专利技术进行详细的说明。检测、分离的一般条件旋光度在25℃用自动旋光仪测得。1HNMR和13CNMR用BrukerARX-400在CDCl3中测得。化学位移以Me4Si为内标，以ppm为单位表示。薄层色谱(TLC)由HF254硅胶板上用30％(v/v)的硫酸甲醇溶液或紫外检测器检测。柱色谱采用100-200目的硅胶，以乙酸乙酯-石油醚为淋洗液。 (1)乙基3-氧-叔丁基二甲基硅烷基-1-巯基-β-L-岩藻糖苷(2)的制备乙基1-巯基-β-L-岩藻糖苷1(1.900克，9.13毫摩尔)溶在15毫升干燥的N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，在0℃下，依次加入咪唑(1.595克，23.42毫摩尔)和叔丁基二甲基氯硅烷(1.775克，11.67摩尔)。室温下搅拌两小时后，向反应体系中加50毫升水，用乙酸乙酯(50毫升×3)萃取；萃取液用无水硫酸镁干燥，减压蒸除溶剂，用硅胶柱色谱纯化分离，淋洗液为7/1的石油醚/乙酸乙酯，得到浆状物2(2.709克，85％)。 (2)乙基2，4-二-氧-苯甲基-3-氧-叔丁基二甲基硅烷基-1-巯基-β-L-岩藻糖苷(3)的制备化合物2(1.114克，3.46毫摩尔)溶在15毫升干燥的N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，冰水浴下，依次加入氢化钠(1.040克，21.67毫摩尔)，溴化苄(0.90毫升，7.75毫摩尔)。室温下搅拌90分钟后，向反应体系中加50毫升冷水，用乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，再以盐水反萃有机相；萃取液用无水硫酸镁干燥，减压蒸除溶剂，用硅胶柱色谱纯化分离，淋洗液为1/1的石油醚/乙酸乙酯，得到泡沫状产物3(1.678克，97％)。 (3)辛基2，4-二-氧-苯甲基-3-氧-叔丁基二甲基硅烷基-β-L-岩藻糖苷(4)的制备在氮气氛围，-20℃下，将化合物3(512毫克，1.02毫摩尔)溶于3毫升干燥的二氯甲烷中，然后加入正辛醇(194微升，1.22毫摩尔)和少量分子筛。搅拌20分钟后依次加入N-碘代琥珀酰亚胺(370毫克，1.51毫摩尔)，三甲基硅基三氟甲磺酸酯(19.4微升，0.11毫摩尔)。上述反应条件下，搅拌约20分钟，加入三乙胺中和反应至中性。过滤除去分子筛后，减压蒸除溶剂，用硅胶柱色谱纯化分离，淋洗液为10/1的石油醚/乙酸乙酯，得到浆状物4(569毫克，98％)。 (4)辛基2，4-二-氧-苯甲基-β-L-岩藻糖苷(5)的制备化合物4(821毫克，1.44毫摩尔)溶于15毫升四氢呋喃(THF)，室温下加入TBAF(1.327克，4.21毫摩尔)，搅拌约3小时，反应完全。减压蒸除溶剂，用硅胶柱色谱纯化分离，淋洗液为4/1的石油醚/乙酸乙酯，得到浆状物5(334毫克，68％)。 (5)辛基2，4-二-氧-苯甲基-3-氧-叔丁基二甲基硅烷基-β-L-岩藻糖苷(6)的制备将化合物5(468毫克，1.03毫摩尔)和化合物3(547毫克，1.09毫摩尔)混合，在油泵上减压抽真空约30分钟。在氮气氛围，-20℃下，此混合物溶于3毫升干燥的二氯甲烷中，然后加入少量分子筛。搅拌20分钟后依次加入N-碘代琥珀酰亚胺(270毫克，1.10毫摩尔)，三甲基硅基三氟甲磺酸酯(15微升，0.08毫摩尔)。上述反应条件下，搅拌约40分钟，加入三乙胺中和反应至中性。过滤除去分子筛后，减压蒸除溶剂，用硅胶柱色谱纯化分离，淋洗液为20/1的石油醚/乙酸乙酯，得到得到泡沫状产物6(800毫克，89％)。 (6)辛基2，4-二-氧-苯甲基-α-L-岩藻糖苷(1→3)2，4-二-氧-苯甲基-β-L-岩藻糖苷(7)的制备化合物6(800毫克，0.89毫摩尔)溶于3毫升四氢呋喃(THF)，室温下加入TBAF(890毫克，0.28毫摩尔)，搅拌约4小时，反应完全。将反应液倒入50毫升冷水中，用乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，再以饱和碳酸氢钠洗两次。萃取液用无水硫酸镁干燥，减压蒸除溶剂，用硅胶柱色谱纯化分离，淋洗液为7/1的石油醚/乙酸乙酯，得到泡沫状产物7(533毫克，76％)。 (7)辛基2，4-二-氧-苯甲基-3-氧-叔丁基二甲基硅烷基-α-L-岩藻糖基-(1→3)-2，4-二-氧-苯甲基-α-L-岩藻糖基-(1→3)-2，4-二-氧-苯甲基-β-L-岩藻糖苷(8)的制备将化合物7(393毫克，0.50毫摩尔)和化合物3(288毫克，0.57毫摩尔)混合，在油泵上减压抽真空约30分钟。在氮气氛围，-20℃下，此混合物溶于2毫升干燥的二氯甲烷中，然后加入少量分子筛。搅拌20分钟后依次加入N-碘代琥珀酰亚胺(133毫克，0.54毫摩尔)，三甲基硅基三氟甲磺酸酯(10微升0.06毫摩尔)。上述反应条件下，搅拌约40分钟，加入三乙胺中和反应至中性。过滤除去分子筛后，减压蒸除溶剂，用硅胶柱色谱纯化分离，淋洗液为15/1的石油醚/乙酸乙酯，得到得到泡沫状产物8(488毫克，80％)。 (8)辛基2，4-二-氧-苯甲基-α-L-岩藻糖基-(1→3)-2，4-二-氧-苯甲基-α-L-岩藻糖基-(1→3)-2，4-二-氧-苯甲基-β-L-岩藻糖苷(9)的制备将化合物8(308毫克，0.25毫摩尔)溶于2毫升四氢呋喃(THF)，室温下加入TBAF(335毫克，1.06毫摩尔)，搅拌约4小时，反应完全。将反应液倒入50毫升冷水中，用乙酸乙酯本文档来自技高网...
【技术保护点】
以β－岩澡糖硫代苷为底物，在Ｎ，Ｎ－二甲基甲酰胺，咪唑和叔丁基二甲基氯硅烷体系中反应，合成３位单硅烷化的β－岩澡糖硫代苷。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
【专利技术属性】
技术研发人员：杜宇国，华玉夏，
申请(专利权)人：中国科学院生态环境研究中心，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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