用于筛查克林霉素所致皮肤药物不良反应的人类白细胞抗原基因检测试剂盒制造技术

本发明专利技术属生物医药技术领域，涉及一种人类白细胞抗原基因--HLA-B*51:01基因的检测试剂盒，该HLA-B*51:01基因可作为预测克林霉素所致药疹标记基因本发明专利技术提供了上述检测试剂盒对样本的HLA-B*51:01基因进行分型的应用，包括从获得的患者的外周血中抽取DNA后，用现行的方法检测HLA-B*51:01基因，如序列特异性寡核苷酸探针(PCR-SSO)方法。利用本发明专利技术提供的HLA-B*51:01基因检测试剂盒可用于克林霉素使用前筛查及筛选治疗克林霉素所致药疹的靶向药物；前者可指导临床用药，从而减少克林霉素所致药疹的发生；后者主要靶向作用于HLA-B*51:01分子，从而阻断其在发病中与克林霉素或其代谢产物之间的相互作用。

【技术实现步骤摘要】
用于筛查克林霉素所致皮肤药物不良反应的人类白细胞抗原基因检测试剂盒
本专利技术属于生物医药和试剂检测领域，涉及一种人类白细胞抗原基因检测试剂盒。具体涉及人类白细胞抗原基因——HLA-B*51:01基因，它与克林霉素所致发疹型药疹、荨麻疹、固定性红斑型药疹、多形性红斑等皮肤药物不良反应发病相关。
技术介绍
克林霉素属二十种最重要的抗生素之一(J.etal.,Lincomycin,clindamycinandtheirapplications.ApplMicrobiolBiotechnol,2004.64:p.455–64.)，是临床上常用药物，在革兰氏阳性菌、厌氧型革兰氏阴性菌、某些原生动物以及真菌感染的治疗方案中有重要地位(GuayD.Updateonclindamycininthemanagementofbacterial,fungalandprotozoalinfections.ExpertOpinPharmacother,2007.8(14):p.2401-44.FrankelRI.Clindamycin--efficacyandtoxicity.WestJMed,1975.122(6):p.526-30.)。但是有研究显示部分患者服用该药后发生不良反应，其中最常发生的不良反应是药疹(http://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/2009/050162s085lbl.pdf)。皮肤药物不良反应即药疹，指药物通过各种途径进入人体后引起的皮肤黏膜炎症反应。轻型药疹中包括发疹型药疹、荨麻疹、固定性红斑型药疹、多形性红斑。目前克林霉素所致药疹的报道中以出疹型药疹居多，发病率从约10％到<1％不等(GeddesAM,etal.,OonJ,GrimshawGJ:Clinicalandbacteriologicalstudieswithclindamycin.BrMedJ,1970.2:p.703-4.FassRJ,etal.,Clindamycininthetreatmentofseriousanaerobicinfections.AnnInternMed,1973.78:p.853-9.MazurN,etal.,Clindamycinhypersensitivityappearstoberare.AnnAllergyAsthmaImmunol,1999.82:p.443-5.)。也有克林霉素引起的固定性红斑型药疹、荨麻疹、多形性红斑的报道(MahboobA,etal.,Drugscausingfixederuptions:astudyof450cases.IntJDermatol,1998.37(11):p.833-8.LammintaustaK,etal.,Cutaneousadversereactionstoclindamycin:resultsofskintestsandoralexposure.BrJDermatol,2002.146:p.643-648.)。因此，如果能找到克林霉素所致药疹发病的基因标志，将对临床用药起到指导作用。人类白细胞抗原(Humanleukocyteantigen，HLA)基因的表达产物为人类白细胞抗原，后者在免疫反应中担任至关重要的角色。已有研究发现包括卡马西平、阿巴卡韦、别嘌呤醇等在内的数种药物引起的药疹与HLA等位基因相关(Bharadwaj,M.,etal.,Drughypersensitivityandhumanleukocyteantigensofthemajorhistocompatibilitycomplex.AnnuRevPharmacolToxicol,2012.52:p.401-31.Cao,Z.H.,etal.,HLA-B*58:01alleleisassociatedwithaugmentedriskforbothmildandseverecutaneousadversereactionsinducedbyallopurinolinHanChinese.Pharmacogenomics,2012.13(10):p.1193-201.Roujeau,J.C.,etal.,Geneticsusceptibilitytotoxicepidermalnecrolysis.ArchDermatol,1987.123(9):p.1171-3.)。美国FDA已早在2008年推荐亚洲人群在使用卡马西平前进行HLA-B*15：02基因的筛查(FerrellPBJr,McleodHL.Carbamazepine,HLA-B*15:02andriskofStevens-JohnsonSyndromeandtoxicepidermalnecrolysis:USFDArecommendations[J].Pharmacogenomics,2008,9(10):p.1543-6)，以指导临床用药。经对现有技术文献的检索发现，至今未见关于HLA-B*51:01基因与克林霉素所致药疹的发病相关，以及可作为基因标记用于筛选该型药疹的相关报道。也未见相关试剂盒的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术的缺陷，提供一种人类白细胞抗原基因检测试剂盒，尤其是一种检测检测HLA-B*51:01基因的试剂盒。本专利技术还提供了一种上述试剂盒的应用，也就是通过检测HLA-B*51:01基因的存在来评估患者使用克林霉素后是否具有引起药疹的潜在可能。同时可以据此指导临床用药，从而减少克林霉素所致药疹的发生。一方面，本专利技术提供了一种人类白细胞抗原基因的检测试剂盒。所述的人类白细胞抗原基因是HLA-B*51:01基因；所述的试剂盒中含有检测人类白细胞抗原基因的核酸或者蛋白的试剂。所述的试剂盒中含有人类白细胞抗原基因的扩增引物；或者标记探针。或者，所述的试剂盒中含有人类白细胞抗原基因的特异性抗体。本专利技术所述克林霉素所致药疹的相关HLA等位基因——HLA-B*51:01基因的核酸序列如SEQNO.1所示：(a)序列特征：*长度：3327碱基对*类型：核酸*链型：双链*拓扑结构：线形(b)分子类型：基因组DNA(gDNA文库)(c)假设：否(d)反义：否(e)最初来源：人(f)SEQIDNO.1核酸序列描述如下：gatcaggacgaagtcccaggccccgggcggggctctcagggtctcaggctccgagagccttgtctgcatt70ggggaggcgcagcgttggggattccccactcccacgagtttcacttcttctcccaacctatgtcgggtcc140ttcttccaggatactcgtgacgcgtccccatttcccactcccattgggtgtcggatatctagagaagcca210atcagtgtcgccggggtcccagttctaaagtccccacgcacccacccggactcagaatctcctcagacgc280cgagatgcgggtcacggcgccccgaaccgtcctcctgctgctctggggggcagtggccctgaccgagacc350本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人类白细胞抗原基因的检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中含有检测人类白细胞抗原基因的核酸或者蛋白的试剂；所述的人类白细胞抗原基因是HLA‑B*51:01基因。

【技术特征摘要】
1.一种人类白细胞抗原基因的检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中含有检测人类白细胞抗原基因的核酸或者蛋白的试剂；所述的人类白细胞抗原基因是HLA-B*51:01基因。2.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中含有人类白细胞抗原基因的扩增引物；或者标记探针。3.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中含有人类白细胞抗原基因的特异性抗体。4.权利要求1所述的检测试剂盒的应用，其特征在于，对样本的HLA-B*51:01基因进行分型。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，采用PCR-SSO法进行HLA-B*51:...

【专利技术属性】
技术研发人员：骆肖群，邢清和，杨颖，陈圣安，杨凡萍，
申请(专利权)人：复旦大学附属华山医院，复旦大学，
类型：发明
国别省市：上海,31