【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物检测，更具体的说是涉及一种透散射一体法ceacam6胶乳比浊检测试剂盒。
技术介绍
1、大量研究表明，癌胚抗原相关细胞黏附分子6(carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 6，ceacam6)在肿瘤的发生和发展过程中扮演了多个角色，包括促进肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭，抑制肿瘤细胞凋亡，促进血管生成以及诱导耐药性等方面。在整个癌胚抗原基因家族中，ceacam6是许多侵袭性肿瘤的最具特征性的生物学标志(图1、图2)。
2、2020年复旦大学附属华山医院首先基于单细胞rna测序的研究发现五名luad-lm患者的csf-ctc具有高表达的ceacam6；随后南京医科大学附属第一医院检验医学科联合复旦大学附属华山医院中心实验室的最新研究发现，luad-lm(肺腺癌软脑膜转移)的脑脊液ceacam6水平高于正常人群。在血清中，luad患者的caecam6水平高于健康对照组，其中lm患者的caecam6水平最高。血清ceacam6在区分luad患者lm和非lm方面高于cea(0.95vs 0.64，p<0.001)。血清ceacam6诊断luad-lm的曲线下面积(auc)高于cea、cyfra 21-1和nse，显示ceacam6可作为luad-lm的潜在生物标志物。
3、透散射一体检测法是2020年新兴的、在原有胶乳免疫比浊法基础上升级而来的新方法学，日本hitachi高新公司于2013年开发的透散射一体仪器(如日立3500
4、因此，提供一种透散射一体法ceacam6胶乳比浊检测试剂盒是本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术提供了一种透散射一体法ceacam6胶乳比浊检测试剂盒，用于血清和脑脊液等体液中ceacam6检测。
2、为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
3、一种透散射一体法ceacam6胶乳比浊检测试剂盒，包括第一试剂r1和第二试剂r2；
4、所述第一试剂r1包括如下浓度的组分：25-200mm hepes-naoh缓冲液ph 6.8-7.5，nacl 200-1000mm，聚乙二醇120002g/l，吐温-20 0.05％-2％，鼠单克隆抗体阻断剂20-40ml/l；
5、所述第二试剂r2包括如下浓度的组分：50-200mm缓冲液ph 7.0-7.6，吐温-20 4-16ml/l，300nm羧基胶乳1.6-2.4g/l，450nm羧基胶乳1.0-1.8g/l，保护剂10-90g/l，ceacam6单克隆抗体20-40mg/l。
6、进一步，所述第一试剂r1和所述第二试剂r2还包括防腐剂，所述防腐剂为1g/l叠氮钠或0.5ml/l pc300。
7、进一步，所述第二试剂r2中，所述缓冲液为hepes-naoh缓冲液，磷酸盐缓冲液或甘氨酸-tris缓冲液。
8、进一步，所述第二试剂r2中，所述保护剂为10-30g/l蔗糖、10-30g/l海藻糖、10-30g/l果糖中的至少一种。
9、进一步，所述的一种透散射一体法ceacam6胶乳比浊检测试剂盒，还包括校准品和质控品；
10、所述校准品包括如下浓度的组分：50mm hepes-naoh缓冲液ph 7.4，ceacam6抗原100～2000pg/ml(100pg/ml、300pg/ml、800pg/ml、1500pg/ml、2000pg/ml)，氯化钠900mm，吐温-20 10ml/l，防腐剂；
11、所述质控品包括如下浓度的组分：50mm hepes-naoh缓冲液ph 7.4，ceacam6抗原200～500pg/ml(200pg/ml、500pg/ml)，氯化钠900mm，吐温-20 10ml/l，防腐剂；
12、所述防腐剂为1g/l叠氮钠或0.5ml/l pc300。
13、进一步，所述的一种透散射一体法ceacam6胶乳比浊检测试剂盒在检测ceacam6中的应用。
14、经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本专利技术公开提供了一种透散射一体法ceacam6胶乳比浊检测试剂盒，具有以下有益效果：
15、(1)目前lm的诊断取决于临床表现、脑脊液细胞学检查和影像学检查。诊断性金标准是脑脊液细胞学检查阳性。但是如果靠人为的显微镜检测则效率比较低，精度也不高，还与人员能力水平存在很大关系；而且脑脊液中的癌细胞稀缺，这是诊断的主要局限性。一项回顾性研究纳入了334例晚期肺癌患者，其中22％仅通过脑脊液细胞学检查诊断为lm，35％仅通过磁共振成像(mri)诊断，42％通过两者联合使用。因此，迫切需要用于lm诊断的新型生物标志物和检测方法。
16、本专利技术所述试剂按照配方生成试剂后，在日立3500全自动生化仪上运用透散射一体法进行测试，检测范围能达到50-2000pg/ml；批内变异系数cv≤8.0％(n＝10)。
17、(2)如图4所示，肿瘤标志物的检测水平通常为纳克或者皮克级别，而ceacam6作为浓度为皮克级的待测物，如此高的低端灵敏度需求在除了化学发光法以外的普通生化检测上几乎无法满足，但化学发光法耗费时间长，且耗材昂贵，成本极高。
18、本专利技术采用透散射一体法，通过结果融合，低浓度区域使用散射结果，高浓度区域使用透射结果，能够同时保证低端灵敏度高、线性范围宽以及安全区范围广的检测。透散射一体法硬件检测速度等同于传统生化分析仪，相较于化学发光法，检测速度快、成本低；相较于荧光和胶体金层析以及微流控方法，检测重复性更好；另外，该机器可以配套检验流水线使用，利于实验室自动化。
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1.一种透散射一体法CEACAM6胶乳比浊检测试剂盒，其特征在于，包括第一试剂R1和第二试剂R2；
2.根据权利要求1所述的一种透散射一体法CEACAM6胶乳比浊检测试剂盒，其特征在于，所述第一试剂R1和所述第二试剂R2还包括防腐剂，所述防腐剂为1g/L叠氮钠或0.5ml/LPC300。
3.根据权利要求1或2所述的一种透散射一体法CEACAM6胶乳比浊检测试剂盒，其特征在于，所述第二试剂R2中，所述缓冲液为Hepes-NaOH缓冲液，磷酸盐缓冲液或甘氨酸-Tris缓冲液。
4.根据权利要求3所述的一种透散射一体法CEACAM6胶乳比浊检测试剂盒，其特征在于，所述第二试剂R2中，所述保护剂为10-30g/L蔗糖、10-30g/L海藻糖、10-30g/L果糖中的至少一种。
5.根据权利要求4所述的一种透散射一体法CEACAM6胶乳比浊检测试剂盒，其特征在于，还包括校准品和质控品；
6.权利要求1所述的一种透散射一体法CEACAM6胶乳比浊检测试剂盒在检测CEACAM6中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种透散射一体法ceacam6胶乳比浊检测试剂盒，其特征在于，包括第一试剂r1和第二试剂r2；
2.根据权利要求1所述的一种透散射一体法ceacam6胶乳比浊检测试剂盒，其特征在于，所述第一试剂r1和所述第二试剂r2还包括防腐剂，所述防腐剂为1g/l叠氮钠或0.5ml/lpc300。
3.根据权利要求1或2所述的一种透散射一体法ceacam6胶乳比浊检测试剂盒，其特征在于，所述第二试剂r2中，所述缓冲液为hepes-naoh缓冲液，磷酸盐缓冲...
【专利技术属性】
技术研发人员：蒋浩琴，关明，王迪，王泽鹏，
申请(专利权)人：复旦大学附属华山医院，
类型：发明
国别省市：
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