牛血清白蛋白热乙醇法提取工艺制造技术

一种牛血清白蛋白热乙醇法提取工艺，其特征在于：它由以下步骤组成：　　　　Ａ、　　分离血浆，取新鲜牛血放入带制冷功能的离心机中，加入血量的１０％的浓度为３．８％的枸橼酸钠，离心，温度在２℃以下，分离血浆、血球，收集血浆，血球另用；　　　　Ｂ、　　提取，将血浆放入夹层反应罐内，夹层内加热水，边加热边加入牛血清容积的０．２－０．３％的辛酸钠，缓慢搅拌，温度在５５℃～６５℃，溶解后调ＰＨ值，加入浓度为１摩尔的盐酸，将ＰＨ调至４．０～６．５，然后加入血清总量的５．５％的浓度为９５％的乙醇，过滤，滤渣弃之；　　　　Ｃ、　　脱盐和浓缩，将滤液用２００００分子量以下的超滤器洗脱盐类及其它小分子杂质，同时进行浓缩；　　　　Ｄ、　　冻干，将浓缩液按冻干曲线冻干，即将浓缩液迅速冷却至－４０℃，持续１小时左右，升到－２５℃，持续１０－２０小时，再缓慢升温到０℃，再持续１－４小时升到保存温度２０℃，为成品。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种从牛血清中提取白蛋白的方法，具体是一种牛血清白蛋白热乙醇法提取工艺。
技术介绍
牛血清白蛋白用于诊断试剂的包膜，它的制备方法较多，但多数尚处于实验阶段，适用于中试和正式生产的有以下方法(1)盐析法，分冷盐析法及热盐析法，冷盐析法的主要工艺流程是将新鲜牛血离心、加纯水、加硫酸铵、过滤、滤液透析脱盐、加聚乙二醇、透析液浓缩、冻干为成品；本方法用料多，加硫酸铵需牛血量的40～50％，加聚乙二醇为牛血量的2～4倍，加透析用的纯水需牛血量的20～40倍；费时，冷盐析法透析需48小时，脱水需24小时，整个工艺流程需5个工作日；收率低，一般为0.8～1.0％；以上三点使冷盐析法的生产效率低，成本较高。(2)有机溶剂沉淀法，以E.J.Cohn氏法最常用，但本方法需0℃～5℃低温进行，费时费力，单程需7日，收率不高，1％左右，其成本也较高。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种牛血清白蛋白热乙醇法提取工艺，它用料少，省时，收率高；用本工艺可较大幅度的降低成本。本专利技术的技术方案如下本专利技术的工艺有以下步骤A、分离血浆，取新鲜牛血放入带制冷功能的离心机中，加入血量的10％的浓度为3.8％的枸橼酸钠，离心，温度在2℃以下，分离血浆、血球，收集血浆，血球另用；B、提取，将血浆放入夹层反应罐内，夹层内加热水，边加热边加入牛血清容积的0.2-0.3％的辛酸钠，缓慢搅拌，温度在55℃～65℃，溶解后调PH值，加入浓度为1摩尔的盐酸，将PH调至4.0～6.5，然后加入血清总量的5.5％的浓度为95％的乙醇，过滤，滤渣弃之；C、脱盐和浓缩，将滤液用20000分子量以下的超滤器洗脱盐类及其它小分子杂质，同时进行浓缩；D、冻干，将浓缩液按冻干曲线冻干，即将浓缩液迅速冷却至-40℃，持续1小时左右，升到-25℃，持续10-20小时，再缓慢升温到0℃，再持续1-4小时升到保存温度20℃，为成品。上述的步骤B中的温度为55℃～60℃。上述的提取的步骤B中的PH为4.5-6.0。本工艺所用的枸橼酸钠为抗凝剂，辛酸钠为白蛋白的保护剂，使之在温度55℃以上不分解。本专利技术的优点在于1、用料少，本方法所用的枸橼酸钠、辛酸钠、盐酸、乙醇均较冷盐析法少，可节约投入。2、工艺流程短，全部提取流程只需24小时，比冷盐析法需5天提高生产效率5倍。3、本工艺的每一步都易于掌握，操作容易，适合大批量生产。4、收率高，一般在1.8-2.0％。5、成本低，比冷盐析法成本低50％，经济效益显著。6、质量好，在生产过程中只加少量抗凝剂和保护剂枸橼酸钠、辛酸钠，不含其它盐类及化学物质，其主要提取剂为乙醇，因而保证了成品质地的纯净，其质量检测结果见表1。本专利技术的成品白蛋白经检验，质量完全符合行业质量标准。检测纯度用电泳法测定，溶液的澄明度用分光光度计403nm测定。表1 本专利技术的牛血白蛋白的质检结果与质量标准对照表 由表1可以看到其白蛋白的含量高于质量标准，1％白蛋白溶液403nm吸收值比标准低，其杂质少，澄明度高，其他指标符合标准，说明本工艺提取的牛血白蛋白质量好。附图说明图1是现有技术工艺流程图；图2是本专利技术工艺流程图；图3是本专利技术冻干曲线图。具体实施例方式实施例1本专利技术的工艺有以下步骤A、分离血浆，取天然放牧的牛群新鲜牛血，经严格的检疫，确保无感染疾病，将牛血放入带制冷功能的离心机中，加入血量的10％的3.8％的枸橼酸钠，4000转/分离心，温度在2℃以下，分离血浆、血球，收集血浆，血球另用；B、提取，将血浆放入夹层反应罐内，夹层中加热水，边加热边加入牛血清容积的0.2-0.3％的辛酸钠，缓慢搅拌，温度在55℃～60℃，溶解后调PH值，加入浓度为1摩尔的盐酸，将PH调至6，然后加入血清总量的5.5％的浓度为95％的乙醇，加热时间为25-40分钟；然后用帆布过滤，滤渣弃之；C、脱盐和浓缩，将滤液用20000分子量以下的超滤器洗脱盐类及其它小分子杂质，同时进行浓缩；D、冻干，按冻干曲线进行，即将浓缩液迅速冷却至-40℃，持续1小时左右，升到-25℃，持续10-20小时，再缓慢升温到0℃，再持续1-4小时升温到保存温度。为成品。包装为密封瓶装或塑料袋装。本牛血白蛋白的保存温度为小于等于20℃。本工艺所用的枸橼酸钠为抗凝剂，市售，辛酸钠为白蛋白的保护剂，北京化工厂出品，盐酸及乙醇为市售。权利要求1.一种牛血清白蛋白热乙醇法提取工艺，其特征在于它由以下步骤组成A、分离血浆，取新鲜牛血放入带制冷功能的离心机中，加入血量的10％的浓度为3.8％的枸橼酸钠，离心，温度在2℃以下，分离血浆、血球，收集血浆，血球另用；B、提取，将血浆放入夹层反应罐内，夹层内加热水，边加热边加入牛血清容积的0.2-0.3％的辛酸钠，缓慢搅拌，温度在55℃～65℃，溶解后调PH值，加入浓度为1摩尔的盐酸，将PH调至4.0～6.5，然后加入血清总量的5.5％的浓度为95％的乙醇，过滤，滤渣弃之；C、脱盐和浓缩，将滤液用20000分子量以下的超滤器洗脱盐类及其它小分子杂质，同时进行浓缩；D、冻干，将浓缩液按冻干曲线冻干，即将浓缩液迅速冷却至-40℃，持续1小时左右，升到-25℃，持续10-20小时，再缓慢升温到0℃，再持续1-4小时升到保存温度20℃。，为成品。2.根据权利要求1所述的牛血清白蛋白热乙醇法提取工艺，其特征在于它的步骤B中的温度为55℃～60℃。3.根据权利要求1所述的牛血清白蛋白热乙醇法提取工艺，其特征在于它的步骤B中的PH为4.5-6.0。全文摘要本专利技术公开了一种牛血清白蛋白热乙醇法提取工艺，它由以下步骤组成分离血浆，在牛血中加入枸橼酸钠离心，提取，将收集的血浆放入夹层反应罐内，加热加入辛酸钠，缓慢搅拌，温度在55℃～65℃，加入盐酸调pH值至4.0～6.5，然后加乙醇，过滤，脱盐和浓缩，冻干为成品。本工艺用料少，工艺流程短，比冷盐析法需5天提高生产效率5倍。本工艺的每一步都易于掌握，操作容易，适合大批量生产。收率高，一般在1.8－2.0％。成本低，比冷盐析法成本低50％，质量好，在生产过程中只加少量抗凝剂和保护剂，不含其它盐类及化学物质，其主要提取剂为乙醇，因而保证了成品质地的纯净。文档编号C07K1/00GK1544470SQ20031011660公开日2004年11月10日 申请日期2003年11月17日 优先权日2003年11月17日专利技术者孙福森, 孙志强 申请人:孙福森本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：孙福森，孙志强，
申请(专利权)人：孙福森，
类型：发明
国别省市：