晋美拉肽的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种用于治疗性功能障碍的晋美拉肽（ｐｔ１４１）采用Ｆｍｏｃ（芴甲氧羰基）保护的固相合成法的制备方法，包含：１．固相合成带保护基的晋美拉肽；２．树脂上环化晋美拉肽；３．从树脂上切割晋美拉肽；４．ＨＰＬＣ纯化晋美拉肽；５．转为醋酸晋美拉肽。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种治疗性功能障碍的晋美拉肽(PT141)的制备方法。些旦始士 疼尔汉不性功能障碍，包括男性性功能障碍和女性性功能障碍，是影响面很广的医 学病症。性功能障碍的病因有精神型、器质型以及混合型。紧张、抑郁、器质 性疾病如循环系统疾病、神经系统损伤、动脉硬化、糖尿病、高血压和高胆固 醇等均会导致会导致性功能障碍。在临床治疗上，根据不同的病因主要采取药物治疗和辅助器械治疗。现在 常用的药物有西地那非、瓦地那非等，这些药物均是PDE5抑制剂，它致使环腺 苷酸(cAMP)在体内维持及升高致勃起所需浓度。这些药物是通过扩张动脉血管 和降低静脉排出量作用的。肽的合成一般采用液相合成法或固相合成法，本专利技术釆用固相合成法，即 把目的肽的C-末端第一个氨基酸偶联在载体树脂上，然后以活化剂活化肽序列 C-末端第二个氨基酸残基的羧基，并偶联于前一个氨基酸的氨基上形成肽键。 未反应的氨基酸衍生物原料可以用溶剂DMF彻底洗掉，依此类推，直到合成整 个目的肽。工艺釆用Fmoc固相肽合成路线，该路线的基本步骤以Fmoc基团保 护每一个氨基酸衍生物的oc-氨基，以20%的哌嚏脱除Fmoc基团，其侧链保护 基团是釆用TFA可脱除的基团，如Boc(叔丁氧羰基)，tBu (叔丁基)，Trt(三 苯甲基)等。本相研究采用Fmoc-Lys(Boc)-Wang Resin,树脂与肽的连接TFA 都可以切割下来。此工艺收率为17%左右，收率稳定，且原料易得，国内巿场 都有销售。美国专利US6579968公开了晋美拉肽(PT141)及药物制剂的专利技术创造。中国专利申请公开说明书CN1563076A，公开了合成上述多肽的方法，含有上述多 肽的用于治疗性功能障碍的药物组合物及其制备方法，以及该药物组合物在治 疗性功能障碍疾病，包括男性性功能障碍如勃起功能障碍和女性性功能障碍的 用途。
技术实现思路
本专利技术的申请人通过长期研究专利技术了一种晋美拉肽的新的固相合成制备方法。晋美拉肽的化学结构式如下I I AcNleAsp-His-DPheArgTrp-Lys-OH.CH3COOH专利技术人采用Fmoc(荀甲氧羰基)保护的固相合成法，整个工艺共分成五大步 骤1、固相合成带保护基的晋美拉肽；2、树脂上环化晋美拉肽；3、从树脂上 切割晋美拉肽；4、 HPLC纯化晋美拉肽；5、转为醋酸晋美拉肽。合成路线如下晋美拉肽固相合成- 树脂上环化晋美拉肽- 从树脂上切割晋美拉肽- HPLC纯化-> 转盐- 冻干得成品实验方法及理论依据肽的合成一般采用液相合成法或固相合成法，本发 明采用固相合成法，即把目的肽的C-末端第一个氨基酸偶联在载体树脂上，然 后以活化剂活化肽序列C-末端第二个氨基酸残基的羧基，并偶联于前一个氨基 酸的氨基上形成肽键。未反应的氨基酸衍生物原料可以用溶剂DMF彻底洗掉， 依此类推，直到合成整个目的肽。本项工艺采用Fmoc固相肽合成路线，该路线 的基本步骤完全按照标准的Fmoc固相肽合成法进行，即以Fmoc基团保护每一 个氨基酸衍生物的a-氨基，以20y。的哌啶脱除Fmoc基团，其侧链保护基团是 采用TFA可脱除的基团，如Boc(叔丁氧羰基)，tBu (叔丁基)，Trt(三苯甲基) 等。本相研究釆用Fmoc-Lys(Boc)-Wang Resin，树脂与肽的连接TFA都可以切 割下来。此工艺收率为17%左右，收率稳定，且原料易得，国内巿场都有销售工艺步骤如下Fmoc-Lys(Mmt)-Wang Resin- Trp(Boc)-Lys(Mmt)-Wang ResinArg(pbf)-Trp(Boc)-Lys(Mmt)-WangResin - D-Phe-Arg(pbf)-Trp(Boc)-Lys(Mmt)隱WangResin - His(Trt)-D-Phe-Arg(pbO-Trp(Boc)-Lys(Mmt)國WangResin-Asp(0-2-Phipr)國His(Trt)-D國Phe-Arg(pbf)國Trp(Boc)國Lys(Mmt)-WangResinNle-Asp(0國2曙Phipr)-His(Trt)誦D-Phe-Arg(pbf)-Trp(Boc)-Lys(Mmt)-WangResin- Ac- Nle-Asp(0-2陽Phipr)國His(Trt)-D國Phe-Arg(pbf)-Trp(Boc)-Lys(Mmt)-Wang Resin——^环化-^裂解——^HPLC—— 纯化-^转盐一~-冻干得纯品具体实施方式专利技术人更进一步通过实施例详细描述本专利技术。 实施例1 Trp(Boc)-Lys(Mmt)-Wang Resin的合成1、反应式Fmoc-Lys(Mmt)國Wang Resin 20%哌啶/DMF(二甲基甲酰胺) Lys(Mmt)-Wang ReSinFmoc-Trp(Boc)、 NMM(N-甲基吗啡啉) Fmoc-Trp(Boc)-Lys(Mmt)-Wang Resin - DMF(二甲基甲酰胺)、HBTU20。/。哌啶/DMF(二甲基甲酰胺) Trp(Boc)-Lys(Mmt)-Wang Resin2、投料量及配比投料配比 投料量 分子量 摩尔比Fmoc-Lys (Mmt) -Wang 0. 73亳摩尔1 10克 1Resin /克Fmoc-Trp (Boc) 1. 152(克/克)11. 52克 526 3HBTU 0.83(克/克) 8.30克 379 30. 168(毫升/N醒 2.40毫升 101 3克)3. 06 (亳升/DMF 44毫升 73 78.1克)3、操作精确称取10克(O. 73亳摩尔/克)的Fmoc-Lys(Mmt) Wang Resin加入200 亳升的反应瓶中，并加入100毫升副F溶胀树脂30分钟，抽干，再用DMF振荡 洗涤树脂三次，每次50亳升，2分钟一次，抽干。加50亳升脱保护试剂(20% 哌啶/DMF)振荡反应30分钟，抽出脱保护液，用DMF洗涤树脂三次，抽干，取 少许树脂做茚三酮检测，呈阳性。(茚三酮溶液的配置称取500亳克茚三酮溶 于IO毫升乙醇中)依次向反应瓶中加入44亳升DMF、 11. 52克Fmoc-Trp (Boc) 、 8. 30克HBTU、 2.40毫升N薩，振荡反应30分钟，取少许树脂做苗三酮检测，呈阴性。抽出反 应液，再用DMF振荡洗涤树脂三次，每次大约一分钟，抽干。加50亳升脱保护 液于树脂中，振荡反应30分钟，取少许树脂做茚三酮检测，呈阳性。抽出脱保 护液，用DMF振荡洗涤树脂三次，抽干。实施例2 Arg(pbf)-Trp(Boc)-Lys(Mmt)-Wang Resin的合成1、 反应式Trp(Boc)-Lys(Mmt)-Wang Resin Fmoc國Arg(pbf)、画M、 DMF、 HBTU Fmoc- Arg(pbi)-Trp(Boc)-Lys(Mmt)-Wang Resin 20V^底嚏/DMF Arg(pbf)-Trp(Boc)-Lys(Mmt)-Wang Resin2、 投料量及配比投料配比投料量 分子量:尔比Fmoc-Arp(pbf)HBTU謹0. 57(克/克) 0. 164(亳升/ 克)3. 01(毫升/克)14.6本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种晋美拉肽的制备方法，其特征在于包含：１、固相合成带保护基的晋美拉肽；２、树脂上环化晋美拉肽；３、从树脂上切割晋美拉肽；４、ＨＰＬＣ纯化晋美拉肽；５、转为醋酸晋美拉肽。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张晓，王和平，袁辛娅，
申请(专利权)人：扬子江药业集团四川海蓉药业有限公司，
类型：发明
国别省市：90[中国|成都]