一种利拉鲁肽的全固相合成方法技术

本发明专利技术公开了一种利拉鲁肽的全固相合成方法，以2-Cl-TrtResin为固相载体，以DIC/HOBt为缩合剂，经过微波反应技术的处理，缩短了反应时间，提高了缩合效率。侧链修饰采用新颖ivDde侧链保护的赖氨酸，进行侧链修饰合成，期间采用20%哌啶脱Fmoc保护，直至直链多肽合成完毕。其次采用水合肼脱ivDde保护后，进行侧链修饰反应。得到的在固相载体上的全保护利拉鲁肽通过三氟醋酸的处理得到利拉鲁肽粗品，并经过C18柱的纯化冻干，得到纯品利拉鲁肽，经过强阴离子转盐并冻干后得到醋酸利拉鲁肽醋酸盐。本发明专利技术操作简单，合成周期短，生产成本低，副产物少，产品收率高，利于大规模生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种多肽的合成方法，特别涉及。
技术介绍
利拉鲁肽(Liraglutide)，是通过基因重组技术，利用酵母生产的人胰高糖素样肽-1 (GLP-1)类似物，具有降低血糖、减轻体重、促进胰岛细胞再生以及心血管系统保护等多种效应，临床应用前景广阔。现有的利拉鲁肽生产方法及缺陷如下:1、基因工程法，由于利拉鲁肽是一个具有支链修饰的非天然活性多肽，所以生产技术难度极大，设备要求高，大规模生产风险大，成本高，不利于工业化生产。2、固液合成法，需经过片段固相合成、全保护切割、全保护片段纯化、片段缩合等几个不同的阶段，生产周期长。同时由于片段是全保护多肽，非常疏水，所以大大的增加了纯化的难度。这就给大规模生产带来了周期长，成本高的问题。3、CN102286092A的专利技术报道的Fmoc-Lys (Alloc)-OH方法，由于所采用的是先液相合成支链化合物(Palmitoyl-Glu-OtBu),同样也需要进行反复纯化的问题。选择Fmoc-Lys (Alloc)-OH作为侧链修饰用保护氨基酸的方法所带来的弊端,在脱Alloc保护时对生产设备和生产环境带来了更高的要求以及更长的生产周期本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利拉鲁肽的全固相合成方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）以2?Cl?Trt树脂为固相载体，与Fmoc?Gly?OH缩合反应获得Fmoc?Gly?2?Cl?Trt树脂；（2）通过固相合成法，按照利拉鲁肽主链肽序依次缩合具有N端Fmoc保护且侧链保护的氨基酸，其中赖氨酸采用Fmoc?Lys（ivDde)?OH，每次缩合反应30?35min后，再在微波条件下反应处理；（3）脱除赖氨酸侧链保护基ivDde；（4）通过固相合成法，在赖氨酸侧链偶联Fmoc?Glu?OtBu，并在谷氨酸上连接棕榈酸；（5）裂解，脱除保护基和树脂得到利拉鲁肽粗肽；（6）纯化，冻干，转盐，冻干，得到利拉鲁肽醋酸盐。

【技术特征摘要】
1.一种利拉鲁肽的全固相合成方法，其特征在于:包括如下步骤: (1)以2-Cl-Trt树脂为固相载体，与Fmoc-Gly-OH缩合反应获得Fmoc-Gly-2-Cl-Trt树脂； (2)通过固相合成法，按照利拉鲁肽主链肽序依次缩合具有N端Fmoc保护且侧链保护的氨基酸，其中赖氨酸采用Fmoc-Lys (ivDde)-0H,每次缩合反应30_35min后,再在微波条件下反应处理； (3)脱除赖氨酸侧链保护基ivDde； (4)通过固相合成法，在赖氨酸侧链偶联Fmoc-Glu-OtBu，并在谷氨酸上连接棕榈酸； (5)裂解，脱除保护基和树脂得到利拉鲁肽粗肽； (6)纯化，冻干，转盐，冻干，得到利拉鲁肽醋酸盐。2.根据权利要求1所述的一种利拉鲁肽的全固相合成方法，其特征在于:步骤(2)中，缩合反应时，具有...

【专利技术属性】
技术研发人员：周耐明，
申请(专利权)人：宁波盛泰生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：