用于治疗自身免疫和炎性病症的方法和组合物技术

本文描述了用于抑制有其需要的受试者的炎性或自身免疫应答以及诱导有其需要的受试者的免疫耐受的组合物和方法，其包括给予受试者治疗有效量的可操作地连接到IL‑10的靶向抗原呈递细胞(APC)的抗体或其片段。本文所述的组合物和方法用于治疗炎性和自身免疫障碍。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗自身免疫和炎性病症的方法和组合物专利技术背景本申请要求2014年5月16日提交的第61/994,239号美国临时专利申请和2014年6月19日提交的第62/014,504号美国临时专利申请的优先权的权益，通过引用将两者以其整体并入本文。本专利技术是在国家过敏和传染病研究所(theNationalInstituteofAllergyandInfectiousDisease)/国立卫生研究院(NationalInstitutesofHealth)授予的批准号为1R56AI105066-01和批准号2为1R01AI105066-01A1的政府支持下完成的。政府对本专利技术享有一定的权利。1.专利
总地来说，本专利技术涉及医药领域。更具体地，其涉及用于增强对抗原的耐受性和用于治疗炎性和自身免疫障碍的药物组合物。2.背景自身免疫和炎性疾病由身体对正常存在于体内的物质和组织的异常免疫应答引起。这可能限于某些器官(例如，在自身免疫性甲状腺炎中)或涉及不同部位的特定组织(例如，古德帕斯彻病(Goodpasture'sdisease)，其可以影响肺和肾的基底膜)。自身免疫和自身炎性疾病仅在美国就影响高达5千万人，并且自身免疫的原因仍然未知。这些疾病的治疗通常采用降低免疫应答的免疫抑制药物。使用免疫抑制剂，如环孢菌素、他克莫司(tacroliums)、氨甲蝶呤或抗TNFa/IL-6的常规免疫疗法非特异性抑制宿主中的T细胞，包括非致病性T细胞的功能。因此，使用这些免疫抑制剂的治疗通常导致严重感染的发展，并且有时导致致命的后果。本领域中存在对治疗自身免疫应答而没有全面免疫抑制的治疗剂的需求。专利技术概述本专利技术通过使用可操作地连接到IL-10的靶向APC的抗体或其片段提供用于将抗炎性细胞因子IL-10递送至抗原呈递细胞(APC)以抑制和改变受试者的APC的病理生理功能的方法和组合物，满足了本领域中的需求。预期将抗炎性细胞因子靶向递送至患者中的APC使得患者的免疫耐受更有效并且延长。因此，本专利技术的内容涉及用于抑制有其需要的受试者的炎性或自身免疫应答的方法，其包括给予受试者治疗有效量的可操作地连接到IL-10的靶向抗原呈递细胞(APC)的抗体或其片段。在一些实施方案中，本专利技术涉及用于预防或治疗有其需要的受试者的移植物抗宿主病的方法，其包括给予受试者治疗有效量的可操作地连接到IL-10的DC-ASGPR或其片段。另外的方面涉及诱导有其需要的受试者的免疫耐受的方法，其包括给予受试者治疗有效量的可操作地连接到IL-10的靶向APC的抗体或其片段。其他方面涉及通过给予受试者治疗有效量的可操作地连接到IL-10的靶向APC的抗体或其片段，抑制具有炎性应答或处于患上炎性应答的风险的受试者的T细胞应答的方法。术语“可操作地连接”是指其中两种组分在靶位点处结合之前组合，以形成活性复合物的情况。例如，缀合于粘连蛋白-锚定蛋白复合物的一半的抗体与复合于粘连蛋白-锚定蛋白复合物的另一半的细胞因子(例如，IL-10)或其他分子(例如，抗原)通过粘连蛋白和锚定蛋白分子的复合可操作地连接。术语“可操作地连接”也旨在意指将两个分子缀合在一起的共价键或化学键。另外的方面涉及用于治疗不希望的和/或异常的免疫应答的方法和组合物，其没有非特异性抑制宿主免疫系统。特别地，抗DC-ASGPR抗体或其抗原结合片段可以用于本文描述的组合物和方法中，用于产生抗致病性抗原特异性T调节细胞和/或用于降低致病性T细胞应答。术语“抗致病性抗原特异性T调节细胞”是指具有有益的治疗特性的T细胞。在一个实施方案中，抗致病性抗原特异性T调节细胞是同种异体抗原特异性T调节细胞。在另一个实施方案中，抗致病性抗原特异性T调节细胞是产生IL-10的细胞。抗致病性抗原特异性T调节细胞也可以是CD4+T细胞。术语“致病性T细胞应答”是指有助于自身免疫疾病的病理或有助于移植物抗宿主病(GVHD)或移植排斥的病理的异常的或不希望的T细胞应答。在一个实施方案中，致病性T细胞应答是同种异体T细胞应答。在另一个实施方案中，致病性T细胞应答包括同种异体CD4+和CD8+T细胞。在一个实施方案中，致病性T细胞应答是包括组织移植物的免疫细胞的应答。本专利技术的另一个方面涉及用于预防或治疗有其需要的受试者的GVHD的方法，其包括给予受试者抗DC-ASGPR抗体或其抗原结合片段。移植物抗宿主病(GVHD)是在同种异体的组织移植之后常见的并发症。其通常与干细胞或骨髓移植相关，但该术语也适用于其他形式的组织移植。组织(移植物)中的免疫细胞(白血细胞)将受者(宿主)识别为“外来的”。然后，移植的免疫细胞攻击宿主的体细胞。如果使用的血液制品未经辐照，则在输血后也会发生GVHD。在另一个情况下，本专利技术描述了用于预防或治疗有其需要的受试者的移植排斥的方法，其包括给予受试者抗DC-ASGPR抗体或其抗原结合片段。当移植的组织被受者的免疫系统排斥时，发生移植排斥，其破坏移植的组织。移植排斥也可以称为移植排异反应(transplantrejection)或宿主抗移植物病。在某些实施方案中，抗体或抗原结合片段特异性结合于DC-ASGPR并激活DC-ASGPR。DC-脱唾液酸糖蛋白受体(DC-ASGPR)是携带免疫受体酪氨酸激活基序样基序(motiflikemotif)的清道夫受体。ASGPR还可以称为ASGR1、ASGPR1、CLEC4H1和HL-1。在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段结合于人DC-ASGPR。在一些实施方案中，靶向APC的抗体靶向朗格汉斯细胞、巨噬细胞、树突细胞、B细胞和外周血单核细胞中的一种或多种APC。在另外的实施方案中，靶向APC的抗体选自特异性结合于以下的抗体：MHCI类、MHCII类、CD1d、CD2、CD3、CD4、CD8、CD11b、CD14、CD15、CD16、CD19、CD20、CD29、CD31、CD40、CD43、CD44、CD45、CD54、CD56、CD57、CD58、CD83、CD86、CMRF-44、CMRF-56、DCIR、DC-ASGPR、CLEC-6、CD40、BDCA-2、MARCO、DEC-205、甘露糖受体、Langerin、DECTIN-1、B7-1、B7-2、IFN-γ受体、IL-2受体、ICAM-1、Fcγ受体、LOX-1和ASPGR。在其他实施方案中，靶向APC的抗体靶向朗格汉斯细胞。靶向朗格汉斯细胞的靶向APC的抗体的一个实例是抗Langerin。在另一个实施方案中，靶向APC的抗体靶向巨噬细胞。例如，靶向APC的抗体可以是抗MARCO。在另外的实施方案中，靶向APC的抗体靶向树突细胞、B细胞和巨噬细胞中的一种或多种APC。在具体的实施方案中，靶向APC的抗体靶向树突细胞。在一些实施方案中，所述靶向APC的抗体包括抗CD40。在另外的实施方案中，抗CD40抗体包括抗CD40克隆12E12或其片段。如实施例1中所示，抗CD40(12E12)-IL-10抑制CD86的表达。在一些实施方案中，抗CD40抗体包括一个或多个具有SEQIDNO:31-33或37-39的序列的CDR。在其他实施方案中，抗CD40抗体包括包含一个或多个SEQIDNO:31-33的CDR的重链。在另外的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种诱导有其需要的受试者的免疫耐受的方法，其包括给予所述受试者治疗有效量的可操作地连接到IL‑10的靶向APC的抗体或其片段。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.05.16 US 61/994239;2014.06.19 US 62/0145041.一种诱导有其需要的受试者的免疫耐受的方法，其包括给予所述受试者治疗有效量的可操作地连接到IL-10的靶向APC的抗体或其片段。2.一种用于预防或治疗有其需要的受试者的移植物抗宿主病的方法，其包括给予所述受试者治疗有效量的连接到IL-10的DC-ASGPR或其片段。3.权利要求2所述的方法，其中所述抗DC-ASGPR抗体是具有三个重链CDR和三个轻链CDR的人源化抗体，所述CDR来自选自以下的抗DC-ASGPR重链和轻链可变区对的可变区：SEQIDNO:3和8、SEQIDNO:58和60、SEQIDNO:62和64或SEQIDNO:66和68；或是具有三个重链CDR和三个轻链CDR的人源化抗体，所述CDR来自选自以下的抗DC-ASGPR重链和轻链对的重链和轻链：SEQIDNO:69和70和SEQIDNO:71和72。4.一种用于抑制有其需要的受试者的炎性或自身免疫应答的方法，其包括给予所述受试者治疗有效量的可操作地连接到IL-10的靶向抗原呈递细胞(APC)的抗体或其片段。5.一种抑制具有炎性应答或处于患上炎性应答的风险的受试者的T细胞应答的方法，其给予所述受试者治疗有效量的可操作地连接到IL-10的靶向APC的抗体或其片段。6.权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述靶向APC的抗体靶向朗格汉斯细胞、巨噬细胞、树突细胞、B细胞和外周血单核细胞中的一种或多种APC。7.权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述靶向APC的抗体选自特异性结合于以下的抗体：MHCI类、MHCII类、CD1d、CD2、CD3、CD4、CD8、CD11b、CD14、CD15、CD16、CD19、CD20、CD29、CD31、CD40、CD43、CD44、CD45、CD54、CD56、CD57、CD58、CD83、CD86、CMRF-44、CMRF-56、DCIR、DC-ASGPR、CLEC-6、CD40、BDCA-2、MARCO、DEC-205、甘露糖受体、Langerin、DECTIN-1、B7-1、B7-2、IFN-γ受体、IL-2受体、ICAM-1、Fcγ受体、LOX-1和ASPGR。8.权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述靶向APC的抗体靶向朗格汉斯细胞。9.权利要求8所述的方法，其中所述靶向APC的抗体包括抗Langerin。10.权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述靶向APC的抗体靶向巨噬细胞。11.权利要求10所述的方法，其中所述靶向APC的抗体包括抗MARCO。12.权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述靶向APC的抗体靶向靶向树突细胞、B细胞和巨噬细胞中的一种或多种APC。13.权利要求12所述的方法，其中所述靶向APC的抗体靶向树突细胞。14.权利要求12或13所述的方法，其中所述靶向APC的抗体包括抗CD40。15.权利要求14所述的方法，其中所述抗CD40抗体包括抗CD40克隆12E12或其片段。16.权利要求15所述的方法，其中所述抗CD40抗体包括一个或多个具有SEQIDNO:31-33或37-39的序列的CDR。17.权利要求14-16中任一项所述的方法，其中所述抗CD40抗体包括包含一个或多个SEQIDNO:31-33的CDR的重链。18.权利要求14-17中任一项所述的方法，其中所述抗CD40抗体包括包含一个或多个SEQIDNO:37-39的CDR的轻链。19.权利要求14-18中任一项所述的方法，其中所述抗CD40抗体是包含重链的人源化抗体，所述重链包含三个CDR，其中CDR1包含SEQIDNO:31，CDR2包含SEQIDNO:32，以及CDR3包含SEQIDNO:33。20.权利要求14-19中任一项所述的方法，其中所述抗CD40抗体是包含轻链的人源化抗体，所述轻链包含三个CDR，其中CDR1包含SEQIDNO:37，CDR2包含SEQIDNO:38，以及CDR3包含SEQIDNO:39。21.权利要求12或13所述的方法，其中所述靶向APC的抗体包含抗DC-ASGPR。22.权利要求21所述的方法，其中所述抗体包含可变区，所述可变区包含选自SEQIDNO:3、8、62、64、66或68的序列的氨基酸序列。23.权利要求21或22所述的方法，其中所述抗体包括具有选自SEQIDNO:1、7、61、63、65、67或69-72的序列的氨基酸序列的重链或轻链。24.权利要求21所述的方法，其中所述抗体包括一个或多个来自SEQIDNO:1、3、7、8、61、62、63、64、65、66、67或68-72的可变区、重链或轻链的CDR。25.权利要求12或13所述的方法，其中所述靶向APC的抗体包括抗Dectin-1。26.权利要求12或13所述的方法，其中所述靶向APC的抗体包括抗DCIR。27.权利要求26所述的方法，其中所述抗DCIR抗体包括抗DCIR克隆9E8或其片段。28.权利要求27所述的方法，其中所述抗DCIR抗体包括一个或多个具有SEQIDNO:18-20或24-26的序列的CDR。29.权利要求26-28中任一项所述的方法，其中所述抗DCIR抗体包含重链，所述重链包含一个或多个SEQIDNO:18-20的CDR。30.权利要求26-29中任一项所述的方法，其中所述抗DCIR抗体包含轻链，所述轻链包含一个或多个SEQIDNO:24-26的CDR。31.权利要求26-30中任一项所述的方法，其中所述抗DCIR抗体是包含重链的人源化抗体，所述重链包含三个来自抗DCIR9E8重链的可变区(SEQIDNO:17)的CDR。32.权利要求26-31中任一项所述的方法，其中所述抗DCIR抗体是包含轻链的人源化抗体，所述轻链包含三个来自抗DCIR9E8轻链的可变区(SEQIDNO:23)的CDR。33.权利要求1-32中任一项所述的方法，其中所述抗体是人抗体、人源化抗体、重组抗体、双特异性抗体、嵌合抗体、纳米抗体、DARPin、抗体衍生物、镶饰抗体、双价抗体、单克隆抗体或多克隆抗体。34.权利要求33所述的方法，其中所述抗体是人源化抗体。35.权利要求1-34中任一项所述的方法，其中所述受试者是人受试者。36.权利要求3-35中任一项所述的方法，其中所述受试者患自身免疫疾病或炎性障碍。37.权利要求1-36中任一项所述的方法，其中所述受试者患有炎症。38.权利要求37所述的方法，其中所述炎症是急性的。39.权利要求37所述的方法，其中所述炎症是慢性的。40.权利要求36所述的方法，其中所述自身免疫疾病或炎性障碍选自类风湿性关节炎、过敏、哮喘、全身发病型幼年关节炎、炎性肠病、系统性红斑狼疮、多发性硬化症、1型糖尿病、移植排斥、移植物抗宿主病、结肠炎和克罗恩氏病。41.权利要求1-40中任一项所述的方法，其中所述受试者是将接受或已经接受移植的组织的受试者。42.权利要求41所述的方法，其中所述受试者患有源自移植的组织的并发症，其中所述并发症是移植排斥。43.权利要求41所述的方法，其中所述受试者患有源自移植的组织的并发症，其中所述并发症是GVHD。44.权利要求41-43中任一项所述的方法，其中在组织移植之前给予所述可操作地连接到IL-10的靶向APC的抗体或其片段。45.权利要求44所述的方法，其中所述方法还包括预防与移植的组织有关的并发症，其中所述并发症包括GVHD或移植排斥。46.权利要求41-43中任一项所述的方法，其中在组织移植之后给予所述可操作地连接到IL-10的靶向APC的抗体或其片段。47.权利要求46所述的方法，其中所述方法还包括治疗源自移植的组织的并发症，其中所述并发症包括GVHD或移植排斥。48.权利要求1-47中任一项所述的方法，其中以有效维持受试者的病原体特异性免疫的量给予所述可操作地连接到IL-10的靶向APC的抗体或其片段。49.权利要求1-48中任一项所述的方法，其中IL-10共价连接到所述抗体。50.权利要求1-49中任一项所述的方法，其中IL-10通过肽键共价连接到所述抗体。51.权利要求1-48中任一项所述的方法，其中所述抗体通过结合多肽可操作地连接到IL-10。52.权利要求51所述的方法，其中所述结合多肽是锚定蛋白和粘连蛋白。53.权利要求1-52中任一项所述的方法，其中所述方法还包括给予抗原。54.权利要求53所述的方法，其中所述抗原可操作地连接到靶向APC的抗体。55.权利要求53所述的方法，其中所述抗原可操作地连接到IL-10。56.权利要求53-55中任一项所述的方法，其中所述抗原共价连接到所述靶向APC的抗体、其抗原结合片段或IL-10。57.权利要求53-55中任一项所述的方法，其中所述抗原通过结合多肽可操作地连接到所述靶向APC的抗体、其抗原结合片段或IL-10。58.权利要求57所述的方法，其中所述结合多肽是锚定蛋白和粘连蛋白。59.权利要求1-58中任一项所述的方法，其中所述可操作地连接到IL-10的抗体经口、静脉内、皮下、皮内、肌内、鼻内、通过注射、通过吸入、经粘膜和/或通过使用雾化器给予。60.权利要求1-59中任一项所述的方法，其中所述IL-10包括具有SEQIDNO:5的氨基酸序列的肽或其片段。61.权利要求1-60中任一项所述的方法，其中所述抗体还包括修饰。62.权利要求61所述的方法，其中所述修饰是VH和/或VLCDR1、CDR2和/或CDR3区域内的保守的氨基酸突变。63.权利要求61所述的方法，其中所述修饰为在Fc铰链区中的保守的氨基酸突变。64.权利要求61所述的方法，其中所述修饰是聚乙二醇化。65.权利要求61所述的方法，其中所述修饰是缀合于血清蛋白。66.权利要求61所述的方法，其中所述修饰是缀合于人血清白蛋白。67.权利要求61所述的方法，其中所述修饰是缀合于可检测标记。68.权利要求61所述的方法，其中所述修饰是缀合于诊断试剂。69.权利要求61所述的方法，其中所述修饰是缀合于酶。70.权利要求61所述的方法，其中所述修饰是缀合于荧光、发光或生物发光材料。71.权利要求61所述的方法，其中所述修饰是缀合于放射性材料。72.权利要求61所述的方法，其中所述修饰是缀合于治疗剂。73.一种用于抑制有其需要的受试者的炎性或自身免疫应答的方法，其包括给予所述受试者治疗有效量的可操作地连接到IL-10的抗CD40抗体或其片段，其中所述抗CD40是具有三个重链CDR和三个轻链CDR的人源化抗体，所述三个重链CDR包含SEQIDNO:31(CDR1)、SEQIDNO:32(CDR2)和SEQIDNO:33(CDR3)的氨基酸序列，所述三个轻链CDR包含SEQIDNO:37(CDR1)、SEQIDNO:38(CDR2)和SEQIDNO:39(CDR3)的氨基酸序列。74.一种用于抑制有其需要的受试者的炎性或自身免疫应答的方法，其包括给予所述受试者治疗有效量的可操作地连接到IL-10的抗DCIR抗体或其片段，其中所述抗DCIR是具有三个重链CDR和三个轻链CDR的人源化抗体，所述三个重链CDR来自抗DCIR9E8重链的可变区(SEQIDNO:17)，三个轻链CDR来自抗DCIR9E8轻链的可变区(SEQIDNO:23)。75.一种用于抑制有其需要的受试者的炎性或自身免疫应答的方法，其包括给予所述受试者治疗有效量的可操作地连接到IL-10的抗DC-ASGPR抗体或其片段，其中所述抗DC-ASGPR抗体是具有三个重链CDR和三个轻链CDR的人源化抗体，所述三个重链CDR和三个轻链CDR来自选自以下的抗DC-ASGPR重链和轻链可变区对的可变区：SEQIDNO:3和8、SEQIDNO:58和60、SEQIDNO:62和64或SEQIDNO:66和68；或是具有三个重链CDR和三个轻链CDR的人源化抗体，所述三个重链CDR和三个轻链CDR来自选自以下的抗DC-ASGPR重链和轻链对的重链和轻链：SEQIDNO:69和70和SEQIDNO:71和72。76.一种药物组合物，其包含可操作地连接到IL-10的靶向抗原呈递细胞(APC)的抗体或其片段。77.权利要求76所述的药物组合物，其中所述靶向APC的抗体靶向朗格汉斯细胞、巨噬细胞、树突细胞、B细胞和外周血单核细胞中的一种或多种APC。78.权利要求76或77所述的药物组合物，其中所述靶向APC的抗体选自特异性结合于以下的抗体：MHCI类、MHCII类、CD1d、CD2、CD3、CD4、CD8、CD11b、CD14、CD15、CD16、CD19、CD20、CD29、CD31、CD40、CD43、CD44、CD45、CD54、CD56、CD57、CD58、CD83、CD86、CMRF-44、CMRF-56、DCIR、DC-ASGPR、CLEC-6、CD40、BDCA-2、MARCO、DEC-205、甘露糖受体、Langerin、DECTIN-1、B7-1、B7-2、IFN-γ受体、IL-2受体、ICAM-1、Fcγ受体、LOX-1和ASPGR。79.权利要求76-78中任一项所述的药物组合物，其中所述靶向APC的抗体靶向朗格汉斯细胞。80.权利要求79所述的药物组合物，其中所述靶向APC的抗体包括抗Langerin。81.权利要求76-78中任一项所述的药物组合物，其中所述靶向APC的抗体靶向巨噬细胞。82.权利要求81所述的药物组合物，其中所述靶向APC的抗体包括抗MARCO。83.权利要求76-78中任一项所述的药物组合物，其中所述靶向APC的抗体靶向树突细胞、B细胞和巨噬细胞中的一种或多种APC。84.权利要求83所述的药物组合物，其中所述靶向APC的抗体靶向树突细胞。85.权利要求83或84所述的药物组合物，其中所述靶向APC的抗体包括抗CD40。86.权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴相坤，S·祖拉夫斯基，H·郑，G·祖拉夫斯基，
申请(专利权)人：贝勒研究院，
类型：发明
国别省市：美国,US