胡黄连环烯醚萜总甙提取物制备方法技术

本发明专利技术涉及胡黄连环烯醚萜总甙提取物的制备方法，该制备方法主要使用有机溶媒萃取及苯乙烯型大孔吸附树脂层析等基本纯化手段，成本低廉，操作简便，极有利于工业大生产应用。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及胡黄连环烯醚萜总甙提取物的制备方法，该制备方法主要使用有机溶媒萃取及苯乙烯型大孔吸附树脂层析等基本纯化手段，使用该制备方法制备的提取物中胡黄连环烯醚萜总甙的含量约为35％以上(以胡黄连苦甙I和II计)。文献报道胡黄连含有糖甙类(包括环烯醚萜类，三萜类，酚甙类)、有机酸类及其他诸如胡黄连醇、胡黄连甾醇，香荚兰乙酮、D-甘露醇等成分以及钙、镁、钾等14种无机元素。胡黄连环烯醚萜总甙系包括胡黄连苦甙I、胡黄连苦甙II在内的多种环烯醚萜甙混合物。大量研究表明胡黄连环烯醚萜总甙具有多种生物活性，具体如下①抗CCl4肝损伤作用；②抗半乳糖胺肝中毒作用；③抗扑热息痛肝中毒作用；④抗硫代乙酰胺肝损伤作用；⑤抗利福平肝中毒作用；⑥抗乙醇肝中毒作用；⑦抗乙型肝炎病毒作用；⑧抗炎、降血脂作用。文献报道的胡黄连环烯醚萜总甙及其单体化合物均系将胡黄连粗提液(药材经溶媒回流提取或渗滤或冷浸而得)通过实验室常见的硅胶柱或氧化铝柱或聚酰胺柱层析纯化法制得，该法操作复杂繁琐，分离材料不易再生，难以在工业上大规模推广使用，因此胡黄连环烯醚萜总甙的工业制备方法研究具有较高的商业价值和社会价值。本专利技术的目的在于提供一种成本低廉，操作简单，且极有利于工业化大生产使用的，制备的胡黄连环烯醚萜总甙提取物含量一般均在30％以上(以胡黄连苦甙I和II计算)。胡黄连环烯醚萜总甙提取物中胡黄连苦甙I和II的HPLC测定1、HPLC条件流动相水-乙腈-冰醋酸(77∶23∶0.5)检测波长266nm流速0.8ml/min柱温30℃2、标准曲线胡黄连苦甙IA＝2×107CR＝0.9998(0.2mg/ml～0.01mg/ml)胡黄连苦甙IIA＝1×107CR＝0.9997(0.2mg/ml～0.01mg/ml)3、含量测定照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录VI D)进行测定。色谱条件及系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水-乙腈-冰醋酸(77∶23∶0.5)溶液为流动相；检测波长为266nm，理论板数以胡黄连苦甙II计算应不低于5000。对照品溶液的制备 另分别取胡黄连苦甙I，胡黄连苦甙II对照品适量，精密称定，分别用流动相稀释成每ml含样品0.1mg的溶液为对照品溶液。供试品溶液的制备 取样品适量，精密称定，用流动相稀释成每ml含样品0.2mg的溶液为供试品溶液。测定法精密量取供试品溶液和对照品溶液各10ul注入液相色谱仪，记录谱图，按外标法以峰面积计算，即得以下通过实施例详细说明本专利技术技术方案的实施，但不应以此限定本专利技术的实施范围。实施例1取干燥的胡黄连原药材粉碎，装入烧瓶，加入80％EtOH回流提取2次。第一次8倍量，提取1小时；第二次8倍量，提取1小时，合并提取液，减压浓缩至一定体积制得胡黄连粗提液。以3倍量醋酸乙酯和乙醇混合液(8∶2)萃取。萃取液减压浓缩至干即得胡黄连环烯醚萜总甙提取物。提取物中的胡黄连环烯醚萜总甙含量(以胡黄连苦甙I和II含量计)约为41％。实施例2取实施例1制得的提取物，以20倍量Me2CO洗涤抽提，丙酮液减压浓缩至干即得，本实施例所得提取物中的胡黄连环烯醚萜总甙含量(以胡黄连苦甙I和II含量计)约为57％。实施例3取干燥的胡黄连原药材粉碎，装入烧瓶，加入80％EtOH回流提取2次，第一次8倍量，提取1小时；第二次8倍量，提取1小时。合并提取液，减压浓缩除去乙醇，将得到的浓缩液加入预处理后的苯乙烯型大孔吸附树脂柱中，以水、15％及35％的乙醇液洗脱，其中35％EtOH洗脱液减压浓缩至干即得胡黄连环烯醚萜总甙提取物。所得提取物中的胡黄连环烯醚萜总甙含量(以胡黄连苦甙I和II含量计)约为45％。实施例4实施例3所得提取物以20倍量Me2CO洗涤抽提，丙酮液浓缩至干即得，本实施例所得提取物中的胡黄连环烯醚萜总甙含量(以胡黄连苦甙I和II含量计)约为60％。权利要求1.胡黄连粗提液(药材经溶媒回流提取或渗滤或冷浸而得)浓缩至一定比例的浸膏液或固体，以有机溶媒萃取，萃取液浓缩至干即得胡黄连环烯醚萜总甙提取物，提取物中胡黄连环烯醚萜总甙的含量约为35％以上(以胡黄连苦甙I和II计)。2.权利要求1所述的萃取用有机溶媒特指正丁醇或醋酸乙酯或醋酸丁酯或上述三种溶媒相互间可能组成的混合液或上述三种溶媒可能与乙醇、甲醇、丙酮组成的混合液。3.权利要求1所述的工艺制得的胡黄连环烯醚萜总甙固体或稀释液进一步以有机溶媒抽提，抽提液浓缩至干即得纯度更高的胡黄连环烯醚萜总甙，抽提用有机溶媒特指甲醇或乙醇或丙酮或醋酸丁酯或醋酸乙酯或上述溶媒可能的任意比例混合液。4.胡黄连粗提液(药材经溶媒回流提取或渗滤或冷浸而得)浓缩至一定比例的浸膏液，加入大孔吸附树脂柱，以不同浓度的乙醇水溶液梯度洗脱，25-40％乙醇洗脱液浓缩至干即得胡黄连环烯醚萜总甙提取物，提取物中胡黄连环烯醚萜总甙的含量约为40％以上(以胡黄连苦甙I和II计)。5.权利要求4所述的大孔吸附树脂特指苯乙烯型大孔吸附树脂。6.权利要求4所述的工艺制得的胡黄连环烯醚萜总甙固体或稀释液进一步以有机溶媒抽提，抽提液浓缩至干即得纯度更高的胡黄连环烯醚萜总甙，抽提用有机溶媒特指甲醇或乙醇或丙酮或醋酸丁酯或醋酸乙酯或上述溶媒可能的任意比例混合液。全文摘要本专利技术涉及胡黄连环烯醚萜总甙提取物的制备方法，该制备方法主要使用有机溶媒萃取及苯乙烯型大孔吸附树脂层析等基本纯化手段，成本低廉，操作简便，极有利于工业大生产应用。文档编号C07H1/00GK1458159SQ0211373公开日2003年11月26日 申请日期2002年5月15日 优先权日2002年5月15日专利技术者王建忠, 王俊民 申请人:成都博瑞医药科技开发有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
胡黄连粗提液（药材经溶媒回流提取或渗滤或冷浸而得）浓缩至一定比例的浸膏液或固体，以有机溶媒萃取，萃取液浓缩至干即得胡黄连环烯醚萜总甙提取物，提取物中胡黄连环烯醚萜总甙的含量约为３５％以上（以胡黄连苦甙Ⅰ和Ⅱ计）。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王建忠，王俊民，
申请(专利权)人：成都博瑞医药科技开发有限公司，
类型：发明
国别省市：90[中国|成都]