靶向骨桥蛋白的截短变体的疫苗和单克隆抗体及其用途制造技术

本发明专利技术提供了对人骨桥蛋白的一种或多种截短变体特异性的单克隆抗体和包含至少一种分离的骨桥蛋白肽的疫苗，以及用于制造所述抗体和疫苗的方法。此外，提供了利用所述抗体的诊断方法。所述抗体和疫苗用于治疗，特别是用于治疗和/或预防2型糖尿病和心血管疾病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术涉及疫苗和单克隆抗体(mAb)，特别适用于治疗和/或预防慢性炎性疾病，如2型糖尿病(T2D)和心血管疾病(CVD)。本专利技术的另一方面涉及使用mAb的诊断方法。主要肥胖相关疾病的社会学和经济影响。肥胖是从医疗和经济角度看挑战我们的社会的流行病。与心脏代谢风险相关的肥胖的增加的流行导致预期寿命降低(由于T2D和CVD)。例如，在英国，在过去十年中，肥胖率(体重指数≥30kg/m2)在女性中增加了30％，在男性中增加了40％，在儿童中增加了50％，导致在2007年23％的成年人是肥胖的，预测在2050年50％。根据疾病控制中心(CDC)估计全球1.5亿人(仅美国2100万人)受T2D影响，这个数字预计在未来二十年将增长到2.5亿。目前，T2D药物的费用超过欧盟国家年度医疗保健预算的4％。这些成本预计在未来几年将大幅增加。造成肥胖流行病的原因还不完全清楚，但其后果已经很明显，例如T2D的大量增加，现在甚至发生在儿童和青少年中。CVD是世界卫生组织(WHO)欧洲区域(由53个国家组成)的主要死亡原因，每年死亡人数超过430万。虽然量化发病率负担困难得多，但是2006年估计CVD使欧本文档来自技高网...

【技术保护点】
对人骨桥蛋白(Opn)的一种或多种截短变体特异性的单克隆抗体，其中所述抗体对所述一种或多种截短变体比对全长Opn(flOpn；SEQ ID NO:15)更具反应性；且其中所述抗体对以下是特异性的：(A)基质金属蛋白酶截短的Opn(MmpOpn；SEQ ID NO:16)，其中所述抗体对MmpOpn(SEQ ID NO:16)比对flOpn(SEQ ID NO:15)和凝血酶截短的Opn(ThrOpn；SEQ ID NO:17)中的每一种更具反应性；或(B)MmpOpn(SEQ ID NO:16)和ThrOpn(SEQ ID NO:17)两者，其中所述抗体对MmpOpn(SEQ ID NO:16...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.06.30 EP 14175005.91.对人骨桥蛋白(Opn)的一种或多种截短变体特异性的单克隆抗体，其中所述抗体对所述一种或多种截短变体比对全长Opn(flOpn；SEQIDNO:15)更具反应性；且其中所述抗体对以下是特异性的：(A)基质金属蛋白酶截短的Opn(MmpOpn；SEQIDNO:16)，其中所述抗体对MmpOpn(SEQIDNO:16)比对flOpn(SEQIDNO:15)和凝血酶截短的Opn(ThrOpn；SEQIDNO:17)中的每一种更具反应性；或(B)MmpOpn(SEQIDNO:16)和ThrOpn(SEQIDNO:17)两者，其中所述抗体对MmpOpn(SEQIDNO:16)和ThrOpn(SEQIDNO:17)中的每一种比对flOpn(SEQIDNO:15)更具反应性；或(C)ThrOpn(SEQIDNO:17)，其中所述抗体对具有选自VVYGLR，SVVYGLR和DSVVYGLR(SEQIDNO:1-3)的肽序列的ThrOpn表位是特异性的，其中如果所述抗体对具有肽序列SVVYGLR的表位是特异性的，那么所述抗体的重链可变域(VH)和所述抗体的轻链可变域(VL)包含具有以下序列的互补决定区(CDR)：并且其中所述抗体对ThrOpn(SEQIDNO:17)比对flOpn(SEQIDNO:15)和MmpOpn(SEQIDNO:16)中的每一种更具反应性，并且优选地其中VH包含SEQIDNO:24的序列，并且VL包含SEQIDNO:25的序列。2.权利要求1(A)的抗体，其中所述抗体对具有选自GDSVVYG，RGDSVVYG和DGRGDSVVYG(SEQIDNO:7-9)的肽序列的MmpOpn表位是特异性的。3.权利要求1(B)的抗体，其中所述抗体对具有选自TYDGRGDSVVYG(SEQIDNO:10)和PTVDTYDGRGDS(SEQIDNO:14)的肽序列的MmpOpn/ThrOpn表位是特异性的。4.权利要求2的抗体，其中所述抗体对具有肽序列GDSVVYG的表位是特异性的，并且所述抗体的CDR包含以下序列：并且优选地其中VH包含SEQIDNO:32的序列，并且VL包含SEQIDNO:33的序列。5.权利要求3的抗体，其中所述抗体对具有肽序列TYDGRGDSVVYG的表位是特异性的，并且所述抗体的CDR包含以下序列：并且优选地其中VH包含SEQIDNO:40的序列，并且VL包含SEQIDNO:41的序列。6.权利要求1(C)，4或5的抗体，其中所述CDR或VH或VL中的氨基酸中的三个，优选两个，更优选一个是突变成任何其它氨基酸的。7.权利要求1至6中任一项的抗体，其中-在所述抗体对MmpOpn(SEQIDNO:16)特异性的情况下，所述抗体对MmpOpn(SEQIDNO:16)比对flOpn(SEQIDNO:15)和ThrOpn(SEQIDNO:17)中的每一种更具超过N倍的反应性；和-在所述抗体对MmpOpn(SEQIDNO:16)和ThrOpn(SEQIDNO:17)两者都是特异性的情况下，所述抗体对MmpOpn(SEQIDNO:16)和ThrOpn(SEQIDNO:17)中的每一种比对flOpn(SEQIDNO:15)更具超过N倍的反应性；以及-在所述抗体对ThrOpn(SEQIDNO:17)特异性的情况下，所述抗体对ThrOpn(SEQIDNO:17)比对flOpn(SEQIDNO:15)和MmpOpn(SEQIDNO:16)中的每一种更具超过N倍的反应性；且其中N大于1.5，优选大于2，更优选大于3，甚至更优选大于5，最优选大于10，且优选地其中在分别用MmpOpn(SEQIDNO:16)、ThrOpn(SEQIDNO:17)和flOpn(SEQIDNO:15)包被的平板上，在用1％BSA封闭后，通过ELISA测量抗体分别对MmpOpn(SEQIDNO:16)、ThrOpn(SEQIDNO:17)和flOpn(SEQIDNO:15)的反应性，包括以下条件：所述抗体的浓度：0.25μg/ml，偶联有HRP的二抗的浓度：0.1μg/ml，HRP底物：ABTS和0.1％过氧化氢，读数：405nm处的吸光度...

【专利技术属性】
技术研发人员：G施塔夫勒，C兰德林格，M勒布拉斯，
申请(专利权)人：阿费里斯股份公司，
类型：发明
国别省市：奥地利;AT