一种检测曲霉属产毒真菌的LAMP通用引物及包含该引物的试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及一种检测曲霉属产毒真菌的LAMP通用引物及包含该引物的试剂盒。本发明专利技术所述的LAMP引物包括内引物FIP和BIP，外引物F3和B3，以及环引物LF和LB；所述试剂盒包括所述LAMP引物、Bst DNA聚合酶、含dNTPs的反应缓冲液和去离子水。本发明专利技术将环介导等温扩增技术用于曲霉属产毒真菌的快速检测，可以快速、准确、方便地检测出曲霉属产毒真菌，对曲霉属产毒真菌污染的预防和检测具有重要意义。本发明专利技术所述的检测方法特异性强，灵敏度较高，检测下限可达到1×10-12g/μL，反应时间短，可操作性强，不需要昂贵的仪器来实现；并且产物检测方便，通过肉眼观察法就能实现，具有很高的实用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种检测曲霉属产毒真菌的LAMP通用引物以及包含该引物的试剂盒，同时涉及一种使用包含该引物的试剂盒快速检测曲霉属产毒真菌的方法。属于食品安全检测和微生物检测

技术介绍
曲霉属产毒真菌是常见腐生真菌，多见于发霉的粮食、粮制品及其它霉腐的有机物上，菌落生长较快，结构疏松，菌体由许多复杂的分枝菌丝构成。曲霉属是丛梗孢目、丛梗孢科中的一个属，产真菌毒素的菌种主要有：黄曲霉(A.flavus)、寄生曲霉(A.parasiticus)、杂色曲霉(A.versicolor)、烟曲霉(A.fumigatus)、赭曲霉(Aspergillusochraceus)、溜曲霉(Aspergillustamari)、灰绿曲霉(A.glaucus)、构巢曲霉(A.nidurans)等。这些曲霉菌的有毒次级代谢产物为黄曲霉毒素、杂色曲霉素、烟曲霉震颤素、赭曲霉毒素等曲霉属产毒真菌及真菌毒素广泛地污染农作物、食品及饲料等植物源性产品。有些真菌能够直接引起人和动物的疾病，真菌毒素不但会影响人和动物本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测曲霉属产毒真菌的LAMP通用引物，其特征在于，其中包括：外侧正向引物F3：5’‑TTGGTGGTGGTATTGCCAA‑3’；外侧反向引物B3：5’‑GACGTGCATGTTGAGGCC‑3’；及内侧正向引物FIP：5’‑CAGAACAGGGGCGACCTCAC‑CTTCACCAACGTTGCTTCGA‑3’；内侧反向引物BIP：5’‑AGCACAAGGTCCAGATCTGGGT‑TCCTCACCAACGGACTTGA‑3’；以及环引物LF：5’‑GCACGGATGACACCCTTG‑3’；环引物LB：5’‑CCGTCGTGCTGGTCCTA‑3’。

【技术特征摘要】
1.一种检测曲霉属产毒真菌的LAMP通用引物，其特征在于，其中包括：
外侧正向引物F3：5’-TTGGTGGTGGTATTGCCAA-3’；
外侧反向引物B3：5’-GACGTGCATGTTGAGGCC-3’；及
内侧正向引物FIP：5’-CAGAACAGGGGCGACCTCAC-CTTCACCAACGTTGCTTCGA-3’；
内侧反向引物BIP：5’-AGCACAAGGTCCAGATCTGGGT-TCCTCACCAACGGACTTGA-3’；
以及环引物LF：5’-GCACGGATGACACCCTTG-3’；
环引物LB：5’-CCGTCGTGCTGGTCCTA-3’。
2.一种包含权利要求1中所述LAMP通用引物的检测曲霉属产毒真菌的试剂盒，包括
LAMP通用引物、BstDNA聚合酶、含dNTPs的反应缓冲液和去离子水，其特征在于，其中
包括的LAMP通用引物为权利要求1中所述LAMP通用引物。
3.根据权利要求2所述的检测曲霉属产毒真菌的试剂盒，其特征在于，所述的含dNTPs
的反应缓冲液包含dNTPs2.8mmol/L、40mmol/LpH8.8的Tris-HCl、20mmol/LKCl、20
mmol/L(NH4)2SO4、16mmol/LMgSO4、0.2％吐温20以及1.6mol/L甜菜碱。
4.根据权利要求2所述的检测曲霉...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄耀江，蒋丹，靳卫林，孙雷，闫强，
申请(专利权)人：黄耀江，中央民族大学，
类型：发明
国别省市：北京;11