天然产物Hirtellanine B及其衍生物的制备方法与在制备治疗肿瘤药物中的应用技术

本发明专利技术提供了天然产物Hirtellanine B的制备方法，以2，4，6-三羟基苯乙酮为原料，通过制备化合物a、b、c、d、e、f、g等步骤，制得天然产物Hirtellanine B。本发明专利技术人对Hirtellanine B及其14个Hirtellanine B衍生物进行了生物活性筛选，结果显示天然产物Hirtellanine B能够抑制Jurkat细胞，Raji细胞以及K562细胞增殖。它们对肿瘤细胞均具有一定的抑制活性。本发明专利技术方法原料易得，反应收率高，操作合理，宜于工业化生产。本发明专利技术Hirtellanine B及其衍生物可用于制备治疗肿瘤药物，有较大的临床应用价值。本发明专利技术天然产物Hirtellanine B的制备方法反应式如下：

【技术实现步骤摘要】
本专利申请为专利技术专利申请日2012年3月22日；申请号201210079103.2；专利技术创造名称：天然产物HirtellanineB及其衍生物的制备方法与在制备治疗肿瘤药物中的应用，的分案申请。
本专利技术涉及天然药物，具体涉及天然产物HirtellanineB及其衍生物的制备方法与在制备治疗肿瘤药物中的应用。
技术介绍
天然产物HirtellanineB的化学结构式如下：该化合物由寿清耀等人从植物Campylotropishirtella(Franch.)Schindl.的根中提取分离得到的一个异黄酮类化合物(Shou，Q.Y.；etal.，Bioorg.Med.Chem.Lett.2009，13，3389)。生物活性测试其表现出中等B淋巴细胞抑制活性(IC50＝3.00μM)和T淋巴细胞抑制活性(IC50＝9.55μM)。本专利技术人经研究，通过化学合成方法制备得到天然产物HirtellanineB，并制备了该化合物的系列衍生物。经药效实验发现了化合物HirtellanineB对人白血病淋巴细胞(Jurkat)和恶性B淋巴瘤细胞株(Raji)的生长具有显著的抑制作用，(IC50分别为92.6ug/ml和63.0ug/ml)。因此，有进一步开发的前景。其主要作用机制是通过抑制恶性淋巴细胞的G2/M期，进而抑制其细胞增殖与生长，最终将引起恶性淋巴细胞凋亡。本专利技术在完成HirtellanineB全合成的基础上合成了14个HirtellanineB衍生物，生物活性筛选结果显示这些衍生物对肿瘤细胞均具有一定的抑制活性。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于研究设计天然产物HirtellanineB的化学制备方法及其在制药中的应用。本专利技术提供了一种天然产物HirtellanineB的制备方法，反应式如下：包括下列步骤：(1)制备化合物a(5，7-二羟基色酮)；2，4，6-三羟基苯乙酮在三氟化硼乙醚和甲磺酰氯存在下与N，N`-二甲基甲酰胺(DMF)进行Vilsmeyer-Haack(维尔斯迈尔-哈克)甲酰化反应；2，4，6-三羟基苯乙酮与三氟化硼乙醚和甲磺酰氯摩尔比为1.0：2.0～5.0：1.5～4.5，反应溶剂为DMF，温度为0～50℃，时间为0.5～2.0小时；随后反应物发生闭环反应，得到化合物a(5，7-二羟基色酮)；溶剂为DMF，反应时间为1～6小时，反应温度为0～100℃；(2)制备化合物b(7-(1，1-二甲基-2-丙炔氧基)-5-羟基色酮)；化合物a溶解于丙酮中，在碳酸钾和碘化钾存在下，碘化亚铜催化,与3-氯-3-甲基-1-丁炔进行选择性单醚化反应,得到化合物b(7-(1，1-二甲基-2-丙炔氧基)-5-羟基色酮)；相对于化合物a，碳酸钾用量为2.0～5.0，碘化钾用量为2.0-4.5，催化剂用量为0.02～0.1当量(优选为0.05当量)，3-氯-3-甲基-1-丁炔用量为1.0～1.5当量(优选1.05当量)；温度为40～70℃，反应时间为1.0～5.0小时；(3)制备化合物c(5-羟基-8，8-二甲基-8H-吡喃(3，2-g)色酮)；化合物b在强碱条件和高沸点溶剂中,进行选择性的热环合反应，得到化合物c(5-羟基-8，8-二甲基-8H-吡喃(3，2-g)色酮)；强碱为NaH、Na、NaOH或KOH，溶剂为甲苯、二甲苯、硝基苯或N，N`-二甲基甲酰胺，温度为100～160℃，强碱用量为1.0～10.0当量，优选为4.0～6.0当量，反应时间为8.0～24.0小时；(4)制备化合物d(5-甲氧基-8，8-二甲基-8H-吡喃(3，2-g)色酮)；化合物c在碳酸钾存在下与甲基化试剂进行酚甲基化反应，得到化合物d(5-甲氧基-8，8-二甲基-8H-吡喃(3，2-g)色酮)；甲基化试剂为硫酸二甲酯或碘甲烷；化合物c与甲基化试剂的摩尔比为1：1.0～3.0，反应时间为2.0～8.0小时，反应溶剂为丙酮，反应在回流下进行；(5)制备化合物e(3-碘-5-甲氧基-8，8-二甲基-8H-吡喃(3，2-g)色酮)；化合物d在醇溶剂中，用哌啶开环，然后在吡啶存在下与碘进行碘化、闭环反应，得到化合物e(3-碘-5-甲氧基-8，8-二甲基-8H-吡喃(3，2-g)色酮)；相对化合物d，哌啶加入量为5.0～20.0当量，吡啶加入量为1.0～5.0当量(优选为2.0当量)，碘为1.0～10.0当量；开环反应所用溶剂为甲醇或乙醇，在回流条件下进行，反应时间为1.0～3.0小时；碘化、闭环所用溶剂为二氯甲烷，在室温(20℃)下进行，反应时间为10.0～20.0小时；(6)制备化合物f(2-咪唑-5-甲氧基-8，8-二甲基-8H-吡喃[3，2-g]色酮)；化合物e与咪唑在碱性碳酸钾条件下，进行Michael(迈克)加成并失去一分子HI，得到化合物f(2-咪唑-5-甲氧基-8，8-二甲基-8H-吡喃[3，2-g]色酮)；相对于化合物e，咪唑的加入量为1.0～3.0当量，碳酸钾的加入量为5.0～15.0当量，溶剂为N，N`-二甲基甲酰胺，反应温度为80℃，反应时间为2小时；(7)制备化合物g(5-甲氧基-8，8-二甲基-8H-吡喃[3，2-g]-4-羟基-香豆素)；化合物f在酸性条件下(PH＝1～2)水解得到化合物g(5-甲氧基-8，8-二甲基-8H-吡喃[3，2-g]-4-羟基-香豆素)，溶剂为冰醋酸，用量为5.0～10.0ml，反应温度为95℃，反应时间为20.0～40.0小时；(8)制备化合物HirtellanineB；化合物g和邻苯二酚溶于丙酮中，加入醋酸钠水溶液，铁氰化钾作氧化剂，室温下进行氧化偶联反应，生成化合物HirtellanineB，(此步骤的方法定义为“方法A”)；相对于化合物g的量，邻苯二酚的量为1.5～3.0当量，醋酸钠的量为10.0～20.0当量，铁氰化钾的量为5.0～10.0当量，反应时间为2～3小时；通过测试本专利技术方法制得的化合物HirtellanineB的熔点、1HNMR、13CNMR、IR、MS数据，证实其结构与天然产物HirtellanineB完全一致。本专利技术的另一目的是提供了天然产物HirtellanineB的衍生物的制备方法。本专利技术天然产物HirtellanineB的衍生物包括下列化合物：化合物1(8,9-二羟基-苯并[4,5]呋喃[3,2-c]色烯-6-色酮)；化合物2(N-(8,9-二羟基-6-氧代-6H-苯并[4,5]呋喃[3,2-c]色烯-2-基)乙酰本文档来自技高网...

【技术保护点】
天然产物Hirtellanine B的衍生物，其特征在于，所述衍生物为下列化合物：化合物1 8,9‑二羟基‑苯并[4,5]呋喃[3,2‑c]色烯‑6‑色酮；化合物2 N‑(8,9‑二羟基‑6‑氧代‑6H‑苯并[4,5]呋喃[3,2‑c]色烯‑2‑基)乙酰胺；化合物3 2‑氯‑8,9‑羟基‑苯并[4,5]呋喃并[3,2‑c]色烯‑6‑色酮；化合物4 2‑溴‑8,9‑羟基‑苯并[4,5]呋喃并[3,2‑c]色烯‑6‑色酮；化合物5 8,9‑二羟基‑1,3‑二甲氧基苯并[4,5]呋喃并[3,2‑c]色烯‑6‑色酮；化合物6 8,9‑二羟基‑1,3‑二乙氧基苯并[4,5]呋喃并[3,2‑c]色烯‑6‑色酮；化合物7 8,9‑二羟基‑1,3‑二乙氧基‑2‑硝基苯并[4,5]呋喃并[3,2‑c]色烯‑6‑色酮；化合物8 8,9‑二羟基‑3‑甲氧基苯并[4,5]呋喃并[3,2‑c]色烯‑6‑色酮；化合物9 8,9‑二羟基‑3‑乙氧基苯并[4,5]呋喃并[3,2‑c]色烯‑6‑色酮；化合物10 8,9‑二羟基‑2,2‑二甲基‑2H‑苯并[4,5]呋喃[3,2‑c]吡喃并[2,3‑h]色烯‑6‑色酮；化合物11 8,9‑二羟基‑2H‑苯并[4,5]呋喃并[3,2‑c]吡喃[2,3‑h]色烯‑6‑色酮；化合物12 8,9‑二羟基‑5‑甲基‑5H‑11‑氧杂‑5‑氮杂苯并[a]芴‑6‑色酮；化合物13 3‑烯丙氧基‑8,9‑羟基‑苯并[4,5]呋喃并[3,2‑c]色烯‑6‑色酮；化合物14 8,9‑二羟基‑1,3‑二甲氧基‑5H‑11‑氧杂‑5‑氮杂苯并[A]芴‑6‑色酮。...

【技术特征摘要】
1.天然产物HirtellanineB的衍生物，其特征在于，所述衍生物为下列化
合物：
化合物18,9-二羟基-苯并[4,5]呋喃[3,2-c]色烯-6-色酮；
化合物2N-(8,9-二羟基-6-氧代-6H-苯并[4,5]呋喃[3,2-c]色烯-2-基)
乙酰胺；
化合物32-氯-8,9-羟基-苯并[4,5]呋喃并[3,2-c]色烯-6-色酮；
化合物42-溴-8,9-羟基-苯并[4,5]呋喃并[3,2-c]色烯-6-色酮；
化合物58,9-二羟基-1,3-二甲氧基苯并[4,5]呋喃并[3,2-c]色烯-6-色
酮；
化合物68,9-二羟基-1,3-二乙氧基苯并[4,5]呋喃并[3,2-c]色烯-6-色
酮；
化合物78,9-二羟基-1,3-二乙氧基-2-硝基苯并[4,5]呋喃并[3,2-c]色烯
-6-色酮；
化合物88,9-二羟基-3-甲氧基苯并[4,5]呋喃并[3,2-c]色烯-6-色酮；
化合物98,9-二羟基-3-乙氧基苯并[4,5]呋喃并[3,2-c]色烯-6-色酮；
化合物108,9-二羟基-2,2-二甲基-2H-苯并[4,5]呋喃[3,2-c]吡喃并
[2,3-h]色烯-6-色酮；
化合物118,9-二羟基-2H-苯并[4,5]呋喃并[3,2-c]吡喃[2,3-h]色烯-6-
色酮；
化合物128,9-二羟基-5-甲基-5H-11-氧杂-5-氮杂苯并[a]芴-6-色酮；
化合物133-烯丙氧基-8,9-羟基-苯并[4,5]呋喃并[3,2-c]色烯-6-色酮；
化合物148,9-二羟基-1,3-二甲氧基-5H-11-氧杂-5-氮杂苯并[A]芴-6-
色酮。
2.如权利要求1所述天然产物HirtellanineB的衍生物的制备方法，其特
征在于，该方法包括下列步骤：
(一)制备化合物1，2：反应式如下：
(1)制备化合物18,9-二羟基-苯并[4,5]呋喃[3,2-c]色烯-6-色酮；
4-羟基香豆素和邻苯二酚溶于丙酮中，加入醋酸钠水溶液后，铁氰化钾作氧
化剂，室温条件下，进行氧化偶联反应，得到化合物1；相对于4-羟基香豆素
的量，所述邻苯二酚的量为1.5～3.0当量，醋酸钠的量为10.0～20.0当量，铁
氰化钾的量为5.0～10.0当量，反应时间为2～3小时；
(1)制备化合物2N-(8,9-二羟基-6-氧代-6H-苯并[4,5]呋喃[3,2-c]
色烯-2-基)乙酰胺；
4-羟基香豆素与硝酸钠在浓硫酸中，0℃进行硝化反应，反应1～2小时，生
成4-羟基-6-硝基香豆素，该化合物在Zn作催化剂、酸性条件下，发生水解反
应生成中间体4-羟基-6-乙酰胺基香豆素；该中间体4-羟基-6-乙酰胺基香豆素，
再通过方法A生成化合物2；相对于4-羟基香豆素的量，所述硝酸钠的用量为
1.0～2.0当量；相对于4-羟基-6-硝基香豆素的量，所述锌粉的用量为2.0～5.0
当量；相对于中间体4-羟基-6-乙酰胺基香豆素的量，所述邻苯二酚的量为
1.5～3.0当量，醋酸钠的量为10.0～20.0当量，铁氰化钾的量为5.0～10.0当量，
反应温度为室温，反应时间为2～3小时；
(二)制备化合物3，4：
(1)制备化合物32-氯-8,9-羟基-苯并[4,5]呋喃并[3,2-c]色烯-6-色酮；
氢化钠分散在甲苯中，加入2-羟基-5-氯苯乙酮和碳酸二乙酯，室温进行环
合反应2～3小时，生成中间体3a，该步骤为方法B；相对于2-羟基-5-氯苯乙酮
的量，所述氢化钠的用量为3.0～8.0当量，碳酸二乙酯的用量为1.0～3.0当量，
溶剂为甲苯，反应温度为回流温度，反应时间为1小时；然后，中间体4-羟基

\t-6-氯香豆素通过方法A生成化合物3；相对于中间体4-羟基-6-氯香豆素的量，
所述邻苯二酚的量为1.5～3.0当量，醋酸钠的量为10.0～20.0当量，铁氰化钾
的量为5.0～10.0当量；
(2)制备化合物42-溴-8,9-羟基-苯并[4,5]呋喃并[3,2-c]色烯-6-色酮；
氢化钠分散在甲苯中，加入2-羟基-5-溴苯乙酮和碳酸二乙酯，室温进行环
合反应2～3小时，生成中间体4a(4-羟基-6-溴香豆素)；相对于2-羟基-5-溴苯
乙酮的量，所述氢化钠的用量为3.0～8.0当量，碳酸二乙酯的用量为1.0～3.0
当量，溶剂为甲苯，反应温度为回流温度，反应时间为1小时；然后中间体4-
羟基-6-溴香豆素通过方法A生成化合物4；相对于中间体4-羟基-6-溴香豆素的
量，所述邻苯二酚的量为1.5～3.0当量，醋酸钠的量为10.0～20.0当量，铁氰
化钾的量为5.0～10.0当量；
(三)制备化合物5，6，7
(1)制备化合物58,9-二羟基-1,3-二甲氧基苯并[4,5]呋喃并[3,2-c]
色烯-6-色酮；
2，4，6-三羟基苯乙酮溶于丙酮中，加入碳酸钾后，与硫酸二甲酯进行甲基

\t醚化反应，生成中间体5a；相对于2，4，6-三羟基苯乙酮的量，所述碳酸钾的
用量为5.0～10.0当量，硫酸二甲酯的用量为3.0～6.0当量，温度为回流温度，
反应时间为5～8小时；然后中间体5a通过方法B与碳酸二乙酯发生环合反应，
生成中间体5b；相对于中间体5a的量，所述氢化钠的用量为3.0～8.0当量，碳
酸二乙酯的用量为1.0～3.0当量，溶剂为甲苯，反应温度为回流温度，反应时间
为1小时；最后中间体5b通过方法A生成化合物5；相对于中间体5b的量，所
述邻苯二酚的量为1.5～3.0当量，醋酸钠的量为10.0～20.0当量，铁氰化钾的
量为5.0～10.0当量，反应温度为室温，反应时间为2～3小时；
(2)制备化合物6(8,9-二羟基-1,3-二乙氧基苯并[4,5]呋喃并[3,2-c]
色烯-6-色酮)；
2，4，6-三羟基苯乙酮溶于丙酮中，加入碳酸钾后与硫酸二乙酯进行乙基醚
化反应，生成中间体6a；相对于2，4，6-三羟基苯乙酮的量，所述碳酸钾的用
量为5.0～10.0当量，硫酸二乙酯的用量为3.0～6.0当量，溶剂为丙酮，温度为
回流温度，反应时间为5～8小时；然后中间体6a通过方法B与碳酸二乙酯发生
环合反应生成中间体6b；相对于中间体6a的量，所述氢化钠的用量为3.0～8.0
当量，碳酸二乙酯的用量为1.0～3.0当量，溶剂为甲苯，反应温度为回流温度，
反应时间为1小时；最后中间体6b通过方法A生成化合物6，相对于中间体6b
的量，所述邻苯二酚的量为1.5～3.0当量，醋酸钠的量为10.0～20.0当量，铁
氰化钾的量为5.0～10.0当量，反应温度为室温，反应时间为2～3小时；
(3)制备化合物7(8,9-二羟基-1,3-二乙氧基-2-硝基苯并[4,5]呋喃并
[3,2-c]色烯-6-色酮)；
中间体6b在浓硫酸中与硝酸钠发生硝化反应生成中间体6c；相对于中间体
6b的量，所述硝酸钠的用量为1.0～2.0当量，反应温度为0℃，反应时间为1
小时；随后中间体6c通过方法A生成化合物7；相对于中间体6c的量，所述邻
苯二酚的量为1.5～3.0当量，醋酸钠的量为10.0～20.0当量，铁氰化钾的量为

\t5.0～10.0当量，反应温度为室温，反应时间为2～3小时；
(四)制备化合物8，9：
(1)制备化合物88,9-二羟基-3-甲氧基苯并[4,5]呋喃并[3,2-c]色烯-6-
色酮；
2，4-二羟基苯乙酮溶于丙酮中，加入碳酸钾，与硫酸二甲酯发生甲基醚化
反应，生成中间体8a；相对于2，4，-二羟基苯乙酮的量，所述碳酸钾的用量为
5.0～10.0当量，硫酸二甲酯的用量为3.0～6.0当量，温度为回流温度，反应时
间为5～8小时；然后中间体8a通过方法B与碳酸二乙酯发生环合反应,生成中间
体8b；相对于中间体8a的量，所述氢化钠的用量为3.0～8.0当量，碳酸二乙酯
的用量为1.0～3.0当量，溶剂为甲苯，反应温度为回流温度，反应时间为1小时；
最后中间体8b通过方法A生成化合物8；相对于中间体8b的量，所述邻苯二酚
的量为1.5～3.0当量，醋酸钠的量为10.0～20.0当量，铁氰化钾的量为5.0～10.0
当量，反应温度为室温，反应时间为2～3小时；
(2)...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈征武，郑书岩，张菁华，寿清耀，
申请(专利权)人：巴塞利亚药业中国有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32