用于诱导免疫应答的新方法技术

提供了用于诱导免疫应答的方法和用途，包括含有M72相关抗原的免疫原性组合物的至少2次施用，且其中后续施用被延迟。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于诱导免疫应答的方法，尤其是包括含佐剂的免疫原性组合物的至少2次施用（其中后续施用被延迟）的免疫方法。
技术介绍
疫苗接种是用于预防传染性疾病的最有效方法之一。但是，抗原的单次施用经常不足以赋予最佳免疫和/或持久应答。用于建立针对特定病原体的强且持久的免疫的方案包括将佐剂加入疫苗中和/或重复的疫苗接种，即通过施用一个或多个另外剂量的抗原来强化免疫应答。这样的另外施用可以用相同疫苗(同源强化)或用不同疫苗(异源强化)执行。用于同源强化的最常见方案是不仅施用相同疫苗，而且以与早前施用相同的剂量施用它。结核病(TB)是一种由结核分枝杆菌（Mycobacteriumtuberculosis）和其它分枝杆菌属（Mycobacterium）种的感染造成的慢性传染性疾病。它是发展中国家的一种主要疾病以及是世界发达地区的一个日益严重的问题。蛋白抗原Mtb72f和M72(描述在例如国际专利申请WO2006/117240和WO2012/080369，它们通过引用并入本文)或其片段或衍生物是具有用于治疗或预防结核病的潜在益处的蛋白抗原。以前的研究已经得出将M72与免疫刺激剂3-O-去酰化单磷酰脂质A(3D-MPL)和QS21结合地在脂质体制剂中并在0、1个月时间表中施用给人类，其中使用10ugM72、25ug3D-MPL和25ugQS21(Leroux-Roels等人Vaccine2013312196-2206,Montoya等人J.Clin.Immunol.201333(8):1360-1375)。利用抗原M72的候选疫苗目前处于IIB期测试(ClinicalTrials.govIdentifier:NCT01755598)中，以在生活于TB流行国家中的18-50岁成年人中与安慰剂相比评价两剂针对肺TB的保护效力。仍然需要针对疾病（包括结核病）进行免疫的新方法，所述新方法是非常有效的、安全的、有成本效益的、持久的，且诱导广谱的交叉反应性免疫应答。专利技术概述现在已经令人惊讶地发现，在使用含佐剂的M72疫苗的多次剂量免疫方法中，当后续剂量(强化剂量)与早前剂量(激发剂量)相比延迟时，所述免疫是更有效的。使用的佐剂包含TLR4激动剂、3D-MPL和免疫学活性的皂苷级分QS21。因此，在本专利技术的第一方面，提供了一种用于在受试者中诱导免疫应答的方法，所述方法包括将包含M72相关抗原和第一佐剂的第一免疫原性组合物施用给所述受试者，随后将包含M72相关抗原的第二免疫原性组合物施用给所述受试者，其中所述第一佐剂包含TLR激动剂和/或免疫学活性的皂苷，且其中所述第一次施用和第二次施用之间的间隔是在2个月至5年之间。任选地，所述第二免疫原性组合物包含第二佐剂，其中所述第二佐剂包含TLR激动剂和/或免疫学活性的皂苷。适当地，所述第二佐剂包含TLR激动剂和/或免疫学活性的皂苷且具有与所述第一佐剂共有的这两种组分中的至少一种。附图简述图1：来自以标准方案和延迟方案施用M72的小鼠的CD4T细胞应答图2：来自以标准方案和延迟方案施用M72的小鼠的CD8T细胞应答图3：来自以标准方案和延迟方案施用M72的小鼠的CD4T细胞细胞因子概况图4：来自以标准方案和延迟方案施用M72的小鼠的CD8T细胞细胞因子概况图5：来自以标准方案和延迟方案施用M72的小鼠的抗M72血清学。序列标识符的简要描述SEQIDNo.1：M72的多肽序列SEQIDNo.2：具有两个N-端His残基的M72蛋白的多肽序列SEQIDNo.3：Mtb72f的多肽序列。专利技术详述结核病(TB)是一种由结核分枝杆菌（Mycobacteriumtuberculosis）和其它分枝杆菌属（Mycobacterium）种的感染造成的慢性传染性疾病。它是发展中国家的一种主要疾病以及是世界发达地区的一个日益严重的问题。认为超过20亿人被TB杆菌感染，每年有约900万新TB病例和150万例死亡(世界卫生组织TuberculosisFacts2014)。10%的被TB杆菌感染的人会发展为活动性TB，每个具有活动性TB的人平均每年感染其他10-15人。结核分枝杆菌通过呼吸途径感染个体。肺泡巨噬细胞吞噬该细菌，但是它能够通过抑制具有酸性溶酶体的吞噬体融合而存活和增殖。随后发生涉及CD4+和CD8+T细胞的复杂免疫应答，最终导致肉芽肿的形成。结核分枝杆菌作为病原体的成功关键在于以下事实：该分离的、但是未根除的细菌可能长期存在，使得个体容易随后发展为活动性TB。在感染后的第一年，少于5%的感染个体会发展为活动性TB。该肉芽肿可以存在数十年，并被认为在缺乏氧和营养物的休眠状态下包含活结核分枝杆菌。但是，最近已经提出，大部分处于休眠状态的细菌位于遍布体内的非巨噬细胞的细胞类型中(Locht等人,ExpertOpin.Biol.Ther.20077(11):1665-1677)。当宿主的天然免疫和病原体之间的平衡发生变化时（例如作为免疫抑制事件的结果），发生活动性TB的发展(AndersonPTrendsinMicrobiology200715(1):7-13;EhlersSInfection200937(2):87-95)。还已经提出描述潜伏性TB和活动性TB之间的平衡的动态假设(CardanaP-JInflammation&Allergy-DrugTargets20066:27-39;CardanaP-JInfection200937(2):80-86)。尽管感染在相当长时间内可以是无症状的，但是活动性疾病最常显现为肺的急性炎症，从而导致疲倦、重量减轻、发热和持续咳嗽。如果未经治疗，通常导致严重的并发症和死亡。结核病通常可以使用长期抗生素疗法进行控制，尽管这样的治疗不足以防止该疾病的扩散。活跃地感染的个体可以是很大程度上无症状的，但在一定时间具有传染性。此外，尽管对治疗方案的顺应性是关键的，但是患者行为难以监测。一些患者并未完成疗程，这可以导致无效治疗和抗药性的发展。多药抗性的TB(MDR-TB)是对一线药物没有应答的一种形式。所有TB病例中的3.3%是MDR-TB，据估计每年有440,000例新MDR-TB病例发生。当在对一线药物的耐受之上发生对二线药物的耐受时，产生广泛药物抗性的TB(XDR-TB)。已经在58个国家中证实了事实上无法治疗的XDR-TB(世界卫生组织TuberculosisFacts2010)。即使完成了抗生素治疗的整个疗程，结核分枝杆菌的感染可能无法从受感染的个体根除，并可能作为可以再活化的潜伏感染保留下来。为了控制结核病的扩散，对疾病的有效疫苗接种时间表和准确早期诊断是最为重要的。目前，用减毒活细菌进行疫苗接种是最广泛使用的用于诱导保护性免疫的方法。用于该目的的最常用的分枝杆菌是卡介苗(BCG)，即60多年前第一个开发的牛分枝杆菌（M.bovis）的无毒株。它在TB流行区域在出生后施用。但是，BCG的安全性和效力成为争论的来源——尽管在儿童中显示出对严重疾病的保护，但是BCG对疾病的效力是可变的。此外，一些国家，诸如美国，没有用这种药剂给普通民众接种疫苗。已经证实在分枝杆菌感染的早期阶段被强烈表达的多种蛋白会在动物疫苗接种模型中提供保护效力。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于在受试者中诱导免疫应答的方法，所述方法包括：(i)将包含M72相关抗原和第一佐剂的第一免疫原性组合物施用给所述受试者，其中所述第一佐剂包含TLR激动剂和/或免疫学活性的皂苷；随后(ii)将包含M72相关抗原的第二免疫原性组合物施用给所述受试者；且其中所述第一次施用和第二次施用之间的间隔是在2个月至5年之间。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.04.02 GB 1405921.61.一种用于在受试者中诱导免疫应答的方法，所述方法包括：(i)将包含M72相关抗原和第一佐剂的第一免疫原性组合物施用给所述受试者，其中所述第一佐剂包含TLR激动剂和/或免疫学活性的皂苷；随后(ii)将包含M72相关抗原的第二免疫原性组合物施用给所述受试者；且其中所述第一次施用和第二次施用之间的间隔是在2个月至5年之间。2.用在用于在受试者中诱导免疫应答的方法中的第一免疫原性组合物，其包含M72相关抗原和第一佐剂，其中所述第一佐剂包含TLR激动剂和/或免疫学活性的皂苷，所述方法包括将所述第一免疫原性组合物施用给所述受试者，随后将包含M72相关抗原的第二免疫原性组合物施用给所述受试者，且其中所述第一次施用和第二次施用之间的间隔是在2个月至5年之间。3.用在用于在受试者中诱导免疫应答的方法中的第二免疫原性组合物，其包含M72相关抗原，所述方法包括将包含M72相关抗原和第一佐剂的第一免疫原性组合物施用给所述受试者，其中所述第一佐剂包含TLR激动剂和/或免疫学活性的皂苷，随后将所述第二免疫原性组合物施用给所述受试者，且其中所述第一次施用和第二次施用之间的间隔是在2个月至5年之间。4.包含M72相关抗原和第一佐剂的第一免疫原性组合物在药物制备中的用途，其中所述第一佐剂包含TLR激动剂和/或免疫学活性的皂苷，所述药物用在用于在受试者中诱导免疫应答的方法中，所述方法包括将所述第一免疫原性组合物施用给所述受试者，随后将包含M72相关抗原的第二免疫原性组合物施用给所述受试者，且其中所述第一次施用和第二次施用之间的间隔是在2个月至5年之间。5.第二免疫原性组合物在药物制备中的用途，所述药物用在用于在受试者中诱导免疫应答的方法中，所述方法包括将包含M72相关抗原和第一佐剂的第一免疫原性组合物施用给所述受试者，其中所述第一佐剂包含TLR激动剂和/或免疫学活性的皂苷，随后将包含M72相关抗原的第二免疫原性组合物施用给所述受试者，且其中所述第一次施用和第二次施用之间的间隔是在2个月至5年之间。6.根据权利要求1-5中的任一项所述的方法、组合物或用途，其中所述受试者在5年内接受共计2剂。7.根据权利要求1-5中的任一项所述的方法、组合物或用途，其中所述受试者在2年内接受共计2剂。8.根据权利要求1-7中的任一项所述的方法、组合物或用途，其中第一组合物的施用和第二组合物的施用之间的时间间隔是3个月至5年，诸如3个月至24个月、3-18个月、3-14个月、3-10个月、3-9个月或3-8个月。9.根据权利要求1-7中的任一项所述的方法、组合物或用途，其中第一组合物的施用和第二组合物的施用之间的时间间隔是4-14个月、4-9个月或4-8个月。10.根据权利要求1-5中的任一项所述的方法、组合物或用途，其中所述受试者在5年内接受共计3剂。11.根据权利要求1-5中的任一项所述的方法、组合物或用途，其中所述受试者在2年内接受共计3剂。12.根据权利要求10或11所述的方法、组合物或用途，其中所述受试者接受两剂所述第一组合物和一剂所述第二组合物。13.根据权利要求12所述的方法、组合物或用途，其中第一组合物的初次施用和第二组合物的施用之间的时间间隔是3个月至5年，诸如3个月至24个月、3-18个月、3-14个月、3-10个月、3-9个月或3-8个月。14.根据权利要求12所述的方法、组合物或用途，其中第一组合物的初次施用和第二组合物的施用之间的时间间隔是4-14个月、4-9个月或4-8个月。15.根据权利要求12-14中的任一项所述的方法、组合物或用途，其中第一组合物的最终施用和第二组合物的施用之间的时间间隔是3个月至5年，诸如3个月至24个月、3-18个月、3-14个月、3-10个月、3-9个月或3-8个月。16.根据权利要求12-14中的任一项所述的方法、组合物或用途，其中第一组合物的最终施用和第二组合物的施用之间的时间间隔是4-14个月、4-9个月或4-8个月。17.根据权利要求10或11所述的方法、组合物或用途，其中所述受试者接受一剂所述第一组合物和两剂所述第二组合物。18.根据权利要求17所述的方法、组合物或用途，其中所述第一组合物的施用和所述第二组合物的最终施用之间的时间间隔是3个月至5年，诸如3个月至24个月、3-18个月、3-14个月、3-10个月、3-9个月或3-8个月。19.根据权利要求17所述的方法、组合物或用途，其中所述第一组合物的施用和所述第二组合物的最终施用之间的时间间隔是4-14个月、4-9个月或4-8个月。20.根据权利要求17-19中的任一项所述的方法、组合物或用途，其中所述第一组合物的施用和所述第二组合物的初次施用之间的时间间隔是3个月至5年，诸如3个月至24个月、3-18个月、3-14个月、3-10个月、3-9个月或3-8个月。21.根据权利要求17-19中的任一项所述的方法、组合物或用途，其中所述第一组合物的施用和所述第二组合物的初次施用之间的时间间隔是4-14个月、4-9个月或4-8个月。22.根据权利要求1-21中的任一项所述的方法、组合物或用途，其中所述M72相关抗原包含与SEQIDNo.1具有至少90%同一性的序列。23.根据权利要求22所述的方法、组合物或用途，其中所述M72相关抗原包含SEQIDNo.1的残基2-723。24.根据权利要求23所述的方法、组合物或用途，其中所述M72相关抗原包含SEQIDNo.1。25.根据权利要求23所述的方法、组合物或用途，其中所述M72相关抗原包含SEQIDNo.2。26.根据权利要求23所述的方法、组合物或用途，其中所述M72相关抗原由SEQIDNo.2组成。27.根据权利要求1-22中的任一项所述的方法、组合物或用途，其中所述M72相关抗原包含具有至少300个氨基酸的长度的SEQIDNo:1的片段。28.根据权利要求1-27中的任一项所述的方法、组合物或用途，其中所述M72相关抗原含有少于1500个氨基酸残基，诸如少于1200个氨基酸残基，特别是少于1000个氨基酸残基，尤其是少于800个氨基酸残基。29.根据权利要求1-28中的任一项所述的方法、组合物或用途，其中所述第一和第二免疫原性组合物中M72相关抗原的量是相同的。30...

【专利技术属性】
技术研发人员：WR小巴劳，MA德莫伊蒂，MNR唐纳，N夸克德，ST特默曼，
申请(专利权)人：葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司，
类型：发明
国别省市：比利时;BE