一种用于水中农药残留去除的颗粒剂制备方法技术

本发明专利技术涉及一种颗粒剂制备方法。目的是提供一种农药解毒酶颗粒剂的制备方法，该方法具有工艺简单、操作方便的特点；所制成的颗粒剂应具有降解水中农药残留的功能，并且降解效果好、贮存安全和使用方便。技术方案是：一种用于水中农药残留去除的颗粒剂制备方法，依次包括以下步骤：１）制取每克１０００ＩＵ的标准化酶粉，２）配制酶溶液，３）凝固液配制，４）颗粒剂成形，５）干燥。

Granule preparation method for removing pesticide residue in water

The invention relates to a preparation method of granules. The purpose is to provide a preparation method of pesticide detoxification enzyme granules, the method has the characteristics of simple process and convenient operation; granules made with the degradation of pesticide residues, and the degradation effect is good, safe and convenient use. A technical scheme is that: the preparation method of granules for removal of pesticide residues in water, which comprises the following steps: 1) production per gram 1000IU standard enzyme powder, preparation of enzyme solution, 2) 3) 4) solidification liquid preparation, granule forming, drying) 5.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种颗粒剂制备方法，尤其是用于水中农药残留去除的颗粒剂 制备方法。
技术介绍
我国以占世界7%的耕地面积养活着世界22%的人口，取得了巨大成就。其 中农药的防治作用功不可没。但由于农药生产管理上的落后，所带来的生态环 境污染损失也高达50多亿元，特别在广大农村， 一些经济欠发达地区的农村仍 在使用一些有害的、禁用的农药，如節T等； 一些有机磷农药真正用于毒杀病 虫害的量仅占施用量的10%-2()%，其余大部分的农药都残留在蔬菜水果表面， 或者渗入土壤、水和空气中使一些原始生态系统受到损害，造成大面积的农业 生态污染；同时，农药在生产、流通及使用领域中也存在意外泄漏。当前受农 药污染较重的食品有蔬菜、水果、肉类、蛋类、食油、家禽、粮食、水产品等； 其中蔬菜、水果、地下水的污染对人的危害最为直接而严重；而且由于水体的 循环作用，水体中的农药残留会造成污染的扩散，使得土壤、农作物及养殖动 物等的农药本底数提高，成为影响人民的身体健康的主要因素之一。中国专利申请(申请号200410042712.6)针对水中农药残留问题，提供了 重组菌fco〃 BL-21(DE3)携带质粒pETDuet-叩d-bl，利用该菌经发酵、诱导、 提取后得到的酶粉(包括有机磷水解酶和羧酸酯酶)，对于降解水中农 药残留具有明显效果。然而，酶粉的使用方式对于农药降解的效果也有较 大影响，如果直接使用酶粉泼洒方式，自来水厂、食品饮料厂、果蔬加工厂的 水处理设备前需要加装一个处理水池，进行脱毒反应，该反应只能是间隙式的， 无法连续生产；而用直接泼洒酶溶液方式，虽然也能降解农药，但由于酶的本 质是蛋白质，容易受到环境微生物的降解，稳定性不高，降低了降解效果。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服上述
技术介绍
的不足,提供一种农药解毒酶颗粒剂的 制备方法，该方法具有工艺简单、操作方便的特点；所制成的颗粒剂应具有 降解水中农药残留的功能，并且降解效果好、贮存安全和使用方便。本专利技术采用的技术方案是 ， 依次包括以下步骤 1)制取每克1000IU的标准化酶粉在重组菌f. co〃 BL-:"(DE3)携带质粒pETDue1:-opd-bl表达得到的原酶粉 中，按下列公式加入凹凸棒土 Y=XA/1000-X其中A:为原酶粉活性单位；X:为原酶粉重量(克)；Y:为需要加入 的凹凸棒土的重量(克)；2) 配制酶溶液(以1()0重量份计)， 称取2份标准化酶粉，加入2—6份凝胶剂、l份硅藻土，加入91一95份的0.2M 的pH8.5的磷酸缓冲液，搅拌均匀；3) 凝固液配制凝固液为2 — 5重量百分比的氯化钙溶液，凝固液与酶溶液的重量比为8-12: 1;4) 颗粒剂成形用常规农用喷雾器将酶溶液喷入凝固液中，喷雾器压力2. 05mpa-2. 3mpa (绝对 压力)，固化时间O. 5-2小时后，进行固液分离；5) 干燥将分离得到的颗粒冷冻干燥，冻结温度一45。C -5(TC，升华温度小于45度。所述的凝胶剂是海藻酸钠或、和卡拉胶。 所述的喷雾压力是2. lmpa (绝对压力)。本专利技术提供的活性颗粒，可以装柱后形成脱毒柱串连接入自来水厂、食品 饮料厂、果蔬加工厂的水处理设备，可以保证生产的连续性，而且设备的兼容 性非常好，对柱的外形、接口尺寸没有特殊要求，仅需按流量对容积作出要求。 也可以直接泼洒到河流、湖泊、池塘等遭受农药残留污染的水域，使用方便。本专利技术的有益效果是所采用的方法简单实用；采用的均为常规设备，加 工成本较低；所获得的颗粒剂成品使用方便，又便于贮存；选用的均为常规材 料，来源广阔容易获得，又价格低廉。 附图说明图1是流出液甲基对硫磷农药残留测定示意图。 图2是甲胺磷及乐果对硫磷农药残留测定示意图。 图3是室温下的酶稳定性试验效果示意图。 图4是4'C下的酶稳定性试验效果示意图。 具体实施例方式，依次包括以下步骤 1)制取每克1000IU的标准化酶粉所述的标准化酶粉是在通过工程菌表达得到的原酶粉(有机磷水解酶和 羧酸酯酶混合冻干物)中，按下列公式加入凹凸棒土 (即凹凸棒石粘土) 后得到Y=XA/1000-X其中A为原酶粉活性单位；X为原酶粉重量(克)；Y为需要加入的凹凸棒土的重量(克)；有机磷水解酶和羧酸酯酶混合冻千物(有机磷水解酶与羧酸 酯酶可以是任意比例)可外购获得，也可自制(通过一级菌种、 二级菌种培养制取)；其菌种为重组菌￡ co〃 BL-21 (DE3)携带质粒pETDuet-opd-bl，由中国科学院动物研究所提供。2) 配制酶溶液(以100重量份计)称取2份标准化酶粉，加入2 — 6份凝胶剂、l份硅藻土，加入91一95份的0.2M 的pH8.5的磷酸缓冲液，搅拌均匀；凝胶剂推荐采用海藻酸钠或、和卡拉胶。3) 凝固液配制凝固液为2% — 5%重量比的氯化钙溶液(氯化钙水溶液)，重量为酶溶液 的8-12倍；4) 颗粒剂成形用常规农用喷雾器将酶溶液喷入凝固液中，调整喷雾压力l. 05mpa-1. 3mpa (可以得到不同大小的颗粒；喷雾压力l. lmpa，可以得到20—40目的细颗粒。)， 固化时间0.5-2小时后，进行固液分离；5) 干燥将分离得到的颗粒冷冻干燥，冻结温度一45'C -5(TC。在冻干过程中，为 了提高效率，可以对物料进行适度加温，以提供水分蒸发所需的能量；在此升 华过程中，物料温度小于45度。由此获得具有降解水中农药残留功效的颗粒剂。 实施例l1、 取1克酶活为2000IU的酶粉，加入1.0克的凹凸棒土，混合均匀，得到2 克标准化酶粉。2、 取2克上述标准化酶粉，加上2克胶凝剂(1.75克海藻酸钠，0.25克卡拉 胶)，加上l克硅藻土，加上95克0.2M的pH8.5的磷酸缓冲液，搅拌均匀，形成 悬浊液。3、 另配制2%氯化钙溶液1000毫升，置于敞口容器中。4、 将2制取的含酶的悬浊液置于小型喷雾器内，将其喷入凝固液内，喷雾压力1.05mpa，静止30分钟，得到IO目的淡黄色凝胶颗粒。5、用60目筛网分离凝胶颗粒，放在不锈钢盘内，一45。C预冻后放入冷冻干燥 机冻干，过程温度低于45。C;得到4.9克干燥疏松颗粒。测定，其酶活性为360IU/ 克，总回收率为88.2%。 实施例21、取O. 8克酶活为250.011)的酶粉，加入1.2克的凹凸棒土，混合均匀，得到 2克标准化酶粉。2、取2克上述标准化酶粉，加上6克胶凝剂(4克海藻酸钠，2克卡拉胶)， 加上l克硅藻土，加上91克0. 2M的pH8. 5的磷酸缓冲液，搅拌均匀，形成悬浊液。3、 另配制5%氯化钙溶液1000毫升，置于敞口容器中。4、 将2制取的含酶的悬浊液置于小型喷雾器内，将其喷入凝固液内，静止120 分钟，喷雾器压力2. lmpa (绝对压力)，得到20目的淡黄色凝胶颗粒。5、 用60目筛网分离凝胶颗粒，放在不锈钢盘内，一45。C预冻后放入冷冻干 燥机冻干，过程温度低于45'C;得到4.8克干燥疏松颗粒。经测定，其酶活性为 390IU/克，总回收率为93.6%。实施例31、 取0.8公斤酶活为2500IU/克的酶粉，加入1.2公斤的凹凸棒土，混合均 匀，得到2公斤标准化酶粉。2、 取2公斤上述标准化酶粉，加上4公斤胶凝剂(3公斤海藻酸钠，l公斤卡 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于水中农药残留去除的颗粒剂制备方法，依次包括以下步骤：　１）制取每克１０００ＩＵ的标准化酶粉：　在重组菌Ｅ．ｃｏｌｉ　ＢＬ－２１（ＤＥ３）携带质粒ｐＥＴＤｕｅｔ－ｏｐｄ－ｂ１表达得到的原酶粉中，按下列公式加入凹凸棒土：Ｙ＝ＸＡ／１０００－Ｘ　其中：Ａ：为原酶粉活性单位；Ｘ：为原酶粉重量（克）；Ｙ：为需要加入的凹凸棒土的重量（克）；　２）配制酶溶液（以１００重量份计）：　称取２份标准化酶粉，加入２－６份混合凝胶剂、１份硅藻土，加入９１－９５份的０．２Ｍ的ｐＨ８．５的磷酸缓冲液，搅拌均匀；　３）凝固液配制：　凝固液选用重量百分比为２－５的氯化钙溶液，凝固液与酶溶液的重量比为８－１２∶１；　４）颗粒剂成形：　用常规农用喷雾器将酶溶液喷入凝固液中，喷雾器压力２．０５ｍｐａ－２．３ｍｐａ，固化时间０．５－２小时后，进行固液分离；　５）干燥：　将分离得到的颗粒冷冻干燥，冻结温度－４５℃～－５０℃，升华温度小于４５度。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：罗天生，杨志坚，高振岭，
申请(专利权)人：浙江凯越生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：33[中国|浙江]