一种军团菌抗体胶体金检测试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及生物检测领域，特别是涉及一种军团菌抗体胶体金检测试剂盒及其制备方法和用途。本发明专利技术提供一种军团菌抗体胶体金检测试剂盒，包括试纸卡，试纸卡包括底板、及位于底板表面的从加样端开始依次排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述金标垫上包含胶体金标记的重组军团菌抗原和鼠IgG，所述硝酸纤维素膜上包被有检测线和质控线。本发明专利技术所提供的军团菌抗体胶体金检测试剂盒兼具灵敏性和特异性，具有操作快速简便、结果准确、经济适用等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测领域，特别是涉及一种军团菌抗体胶体金检测试剂盒及其制备方法和用途。
技术介绍
军团菌为需氧的多性革兰阴性菌，广泛存在于自然环境中，其传染源是水源和空调系统，通过空气传播。军团杆菌的菌体微小,悬浮在空气中,人在正常呼吸时,会将空气中含有军团杆菌的气溶胶吸入呼吸道内,致使军团杆菌有机会侵染肺泡组织和巨噬细胞,引发炎症,导致军团菌病，易爆发流行。军团杆菌可以侵犯身体内许多器官,因此其临床表现常是多种多样。军团菌病根据临床特征,一般分为两种类型,一类为非肺炎型,病情较轻,潜伏期1～2d,似普通感冒或流感样起病,有发热、肌痛、咽喉疼痛、咳嗽等症状,约1～2周可自愈。另一类是肺炎型,潜伏期2～10d,其初发症状为全身不适、疲乏、肌肉酸痛、头痛、发热、咳嗽、胸痛、咳血、呼吸困难等,还能侵犯消化系统、中枢神经系统,重症病人可出现肝功能变化及肾功能衰竭,并可出现精神紊乱等脏器损害。
技术实现思路
鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种军团菌抗体胶体金检测试剂盒及其制备方法和用途，用于解决现有技术中的问题。为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术采用以下技术方案：本专利技术的第一方面，提供一种军团菌抗体胶体金检测试剂盒，包括试纸卡，所述试纸卡包括底板、及位于底板表面的从加样端开始依次排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述金标垫上包含胶体金标记的重组军团菌抗原和鼠IgG，所述硝酸纤维素膜上包被有检测线和质控线。优选的，所述底板为PVC底板。优选的，所述硝酸纤维素膜上，检测线位于离加样端较近一侧，质控线位于离加样端较远一侧。优选的，所述检测线上包被有重组军团菌抗原。优选的，质控线上包被羊抗鼠IgG。优选的，所述样品垫采用缓冲液处理，所述缓冲液选自PBS缓冲液、Tris-HCl缓冲液、甘氨酸缓冲液、硼酸盐缓冲液和柠檬酸-磷酸盐缓冲液中的一种或多种的组合，缓冲液的浓度为50-100mM。优选的，本专利技术所述的金标垫还经过预处理，预处理时所使用的预处理缓冲液选自甘氨酸缓冲液、Tris-HCl缓冲液、硼酸盐缓冲液的一种或多种的组合，缓冲液的浓度为10-40mM。优选的，所述缓冲液还包括反应增强剂，所述反应增强剂选自PEG4000、PEG6000、PEG8000和PEG20000中的任意一种，所述反应增强剂的浓度为10～50g/L。优选的，所述缓冲溶液还包括表面活性剂，所述表面活性剂选自S-19TWEEN20、S-20TWEEN80、S-13TRITONX-45、S-14TRITONX-100、S-15TRITONX305中的任意一种或多种的组合，所述表面活性剂的浓度为20～40g/L。优选的，为了使得试剂盒具有更佳的灵敏度和显色效果，本专利技术所述的金标垫在预处理时所使用的预处理缓冲液包括下列组分：果糖、氢氧化铝、葡萄糖、氯化钠和甘氨酸，且果糖、氢氧化铝、葡萄糖、氯化钾和甘氨酸的总浓度为4.5－6.5g/L，缓冲液的pH值为7.3－7.5。优选的，各组分在缓冲液中的浓度为：果糖1.0-2.0g/L；氢氧化铝0.25-0.75g/L；葡萄糖1.0-1.5g/L；氯化钠0.25-0.5g/L；甘氨酸2.0-2.25g/L。所述预处理缓冲液的溶剂为水。所述预处理的具体步骤为：将金标垫在预处理液中浸泡1.5～2h，取出放于36～38℃烘干。所述预处理缓冲液可使用本领域各种常用的pH调节剂进行pH值的调节。优选的，所述试剂盒还包括卡壳，所述卡壳包括背卡和上盖，所述背卡设有试纸卡卡槽，所述试纸卡嵌于所述试纸卡卡槽内，所述上盖设有测试窗和加样孔，所述测试窗的位置与所述检测线和质控线的位置相配合，所述加样孔的位置与所述样品垫的位置相配合。更优选的，所述卡壳为塑料卡壳。优选的，所述检测试剂盒用于定性检测人血清/血浆中军团菌抗体。本专利技术第二方面提供所述军团菌抗体胶体金检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤：1)用胶体金标记的重组军团菌抗原和鼠IgG溶液喷涂金标垫，制得包含重组军团菌抗原和鼠IgG的金标垫；2)在硝酸纤维素膜的检测线和质控线上分别喷涂重组军团菌抗原及羊抗鼠IgG，制得包被后的硝酸纤维素膜；3)将样品垫、步骤1)制备金标垫、步骤2)制备的硝酸纤维素膜、吸水垫依次粘贴在底板上，切裁制得检测试纸卡；最后将检测试纸卡装入卡壳制得检测试剂盒。优选的，本专利技术所述的金标垫还经过预处理，预处理时所使用的预处理缓冲液选自甘氨酸缓冲液、Tris-HCl缓冲液、硼酸盐缓冲液的一种或多种的组合，缓冲液的浓度为10-40mM。优选的，所述缓冲液还包括反应增强剂，所述反应增强剂选自PEG4000、PEG6000、PEG8000和PEG20000中的任意一种，所述反应增强剂的浓度为10～50g/L。优选的，所述缓冲溶液还包括表面活性剂，所述表面活性剂选自S-19TWEEN20、S-20TWEEN80、S-13TRITONX-45、S-14TRITONX-100、S-15TRITONX305中的任意一种或多种的组合，所述表面活性剂的浓度为20～40g/L。优选的，为了使得试剂盒具有更佳的灵敏度和显色效果，本专利技术所述的金标垫在预处理时所使用的预处理缓冲液包括下列组分：果糖、氢氧化铝、葡萄糖、氯化钠和甘氨酸，且果糖、氢氧化铝、葡萄糖、氯化钾和甘氨酸的总浓度为4.5－6.5g/L，缓冲液的pH值为7.3－7.5。优选的，各组分在缓冲液中的浓度为：果糖1.0-2.0g/L；氢氧化铝0.25-0.75g/L；葡萄糖1.0-1.5g/L；氯化钠0.25-0.5g/L；甘氨酸2.0-2.25g/L。所述预处理缓冲液的溶剂为水。所述预处理的具体步骤为：将金标垫在预处理液中浸泡1.5～2h，取出放于36～38℃烘干。所述预处理缓冲液可使用本领域各种常用的pH调节剂进行pH值的调节。本专利技术第三方面提供所述军团菌抗体胶体金检测试剂盒在军团菌抗体检测领域的用途。本专利技术的有益效果为：本专利技术所提供的军团菌抗体胶体金检测试剂盒兼具高灵敏性和高特异性，能够快速检测军团菌抗体。此外，所述检测试剂盒具有操作快速简便、结果准确、经济适用等优点。具体实施方式以下通过特定的具体实例说明本专利技术的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本专利技术的其他优点与功效。本专利技术还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本专利技术的精神下进行各种修饰或改变。在进一步描述本专利技术具体实施方式之前，应理解，本专利技术的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本专利技术实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本专利技术的保护范围；在本专利技术说明书和权利要求书中，除非文中另外明确指出，单数形式“一个”、“一”和“这个”包括复数形式。当实施例给出数值范围时，应理解，除非本专利技术另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本专利技术中使用的所有技术和科学术语与本
技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、材料外，根据本
的技术人员对现有技术的掌握及本专利技术的记载，还可以使用与本专利技术实施例本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种军团菌抗体胶体金检测试剂盒，包括试纸卡，试纸卡包括底板、及位于底板表面的从加样端开始依次排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述金标垫上包含胶体金标记的重组军团菌抗原和鼠IgG，所述硝酸纤维素膜上包被有检测线和质控线。

【技术特征摘要】
1.一种军团菌抗体胶体金检测试剂盒，包括试纸卡，试纸卡包括底板、及位于底板表面的从加样端开始依次排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述金标垫上包含胶体金标记的重组军团菌抗原和鼠IgG，所述硝酸纤维素膜上包被有检测线和质控线。2.如权利要求1所述的胶体金检测试剂盒，其特征在于，所述硝酸纤维素膜上，检测线位于离加样端较近一侧，质控线位于离加样端较远一侧。3.如权利要求1所述的胶体金检测试剂盒，其特征在于，所述检测线上包被有重组军团菌抗原。4.如权利要求1所述的胶体金检测试剂盒，其特征在于，质控线上包被羊抗鼠IgG。5.如权利要求1所述的胶体金检测试剂盒，其特征在于，所述样品垫采用缓冲液处理，所述缓冲液选自PBS缓冲液、Tris-HCl缓冲液、甘氨酸缓冲液、硼酸盐缓冲液和柠檬酸-磷酸盐缓冲液中的一种或多种的组合，缓冲液的浓度为50～100mM。6.如权利要求1所述的胶体金检测试剂盒，其特征在于，所述金标垫采用缓冲液处理，所述缓冲液选自甘氨酸缓冲液、Tris-HCl缓冲液、硼酸盐缓冲液的一种或多种的组合，缓冲液的浓度为10～40mM。7.根据权利要求6所述的胶体金检测试剂盒，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：张国华，
申请(专利权)人：上海凯创生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31