一种金纳米棒试剂盒，由检测试纸和微孔试剂组成；检测试纸由底板、吸水板、硝酸纤维素膜、样品吸液板、MAX线组成；硝酸纤维素膜叠放在底板的中部上面；吸水板叠放在底板一端上面，样品吸液板叠放在底板另一端上面；硝酸纤维素膜两端分别与吸水板和样品吸液板相交叠；硝酸纤维素膜依次设置试验线和控制线；试验线由喹诺酮-大分子蛋白偶联物包被；控制线由羊抗鼠多克隆抗体包被；微孔试剂为冻干后的金纳米棒标记喹诺酮单克隆抗体复合物。本实用新型专利技术在传统的胶体金免疫层析试纸基础上进行了改进，将胶体金标记抗体复合物直接冻干于微孔中，使得检测过程中待测样本与金标抗体充分反应，提高检测灵敏度。
【技术实现步骤摘要】
本技术涉及动物性食品快速检测领域，尤其是涉及一种喹诺酮类药物的胶体金纳米棒快速检测试剂盒。
技术介绍
喹诺酮类(Quinolones，QNs)，是一类人工合成的含4-喹诺酮基本结构，对细菌DNA螺旋酶具有选择性抑制的抗生素。当前应用的喹诺酮大多为含有氟原子的喹诺酮类。这类药物抗菌谱广，对革兰氏染色呈阴性杆菌活性较高，对其他抗生素耐药的德细菌也具有良好的抗菌作用，无交叉耐药性；在体内分布广，体内和组织中药物浓度高；口服吸收好，半衰期长，使用方便；与头孢菌素类药物相比，抗菌作用相似，但价格便宜。目前在兽医临床上常用的药物主要有诺氟沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、沙拉沙星、氟甲喹等十几种，随着应用的增加，其各种毒副作用也逐渐显现出来，主要体现在头晕、低血糖、恶心、胃肠道症状、中枢神经系统和过敏反应。特别是近几年，严重的不良反应发生率约为1.6％～1.8％，引起了全世界的关注。为了保障动物源性食品的安全，欧盟、美国及我国等很多国家都对喹诺酮类药物在动物源性食品中残留制定了最大残留限量(MRL)。我国农业部文件(农质发[2009]3号文件)中规定了2009年我国畜禽产品监测项目，禽肉中4种喹诺酮类药物残留是重要的监测项目之一。现有的喹诺酮类检测方法多为色谱法，但是这些方法的灵敏度受样品的净化、浓缩等步骤的影响较大，再者这些方法需要复杂的仪器，过程繁琐，不适应现场大量样本的筛查。胶体金免疫层析法以其灵敏、快速、准确、操作简便得到越来越广泛的应用，但目前的胶体金检测产品仍存在灵敏度低的状况。
技术实现思路
针对现有技术存在的上述问题，本申请人提供了一种金纳米棒试剂盒。本技术在传统的胶体金免疫层析试纸基础上进行了改进，将胶体金标记抗体复合物直接冻干于微孔中，使得检测过程中待测样本与金标抗体充分反应，提高 检测灵敏度。本技术的技术方案如下：一种金纳米棒试剂盒，由检测试纸和微孔试剂(8)组成；所述检测试纸由底板(7)、吸水板(1)、硝酸纤维素膜(5)、样品吸液板(2)、MAX线(6)组成；所述硝酸纤维素膜(5)叠放在底板(7)的中部上面；所述吸水板(1)叠放在底板(7)的其中一端的端头部分上面，所述样品吸液板(2)叠放在底板(7)的另一端的端头部分上面；所述硝酸纤维素膜(5)两端分别与吸水板(1)和样品吸液板(2)相交叠，且所述硝酸纤维素膜(5)位于吸水板(1)和样品吸液板(2)的下方；在所述底板(7)和硝酸纤维素膜(5)及样品吸液板(2)之间设置一层导流板(9)；所述导流板(9)的一个端部与底板(7)设置有样品吸液板(2)的那个端部平齐，所述导流板(9)的另一个端部与硝酸纤维素膜(5)靠近吸水板(1)的那个端部平齐；所述导流板(9)在背离底板(7)的那个面上设置竖直贯通整个板体的导流槽(10)，所述导流槽(10)平行于底板(7)的长度方向；所述导流板(9)在与硝酸纤维素膜(5)接触的那个面上、在导流槽(10)上依次打固液孔(11)。所述导流槽(10)为两条以上；所述固液孔(11)位于导流槽(10)上，且间隔距离相同；所述导流槽(10)及固液孔(11)的深度为导流板(9)厚度的1/2～1/3；所述固液孔(11)的直径为导流槽(10)间距的0.05～0.3倍。从所述硝酸纤维素膜(5)靠近样品吸液板(2)的那一端开始，依次设置试验线(3)和控制线(4)；所述试验线(3)由喹诺酮-大分子蛋白偶联物包被；所述控制线(4)由羊抗鼠多克隆抗体包被；所述微孔试剂(8)为冻干后的金纳米棒标记喹诺酮单克隆抗体复合物。底板(7)是PVC背板，样品吸液板(2)是玻璃纤维材料，微孔试剂(8)的微孔是聚苯乙烯材料；所述导流板(9)是纤维板。所述硝酸纤维素膜(5)两端与吸水板(1)和样品吸液板(2)相交叠的部分长度分别为1～2毫米。本试剂盒的使用方法如下：将水相待测样品加入金标微孔试剂(8)至微孔中固体充分溶解，样品中若含有喹诺酮类药物，样品中的喹诺酮类药物将与微 孔试剂(8)中喹诺酮单克隆抗体-金纳米棒标记物发生特异性结合。插入试纸条，由于毛细管作用样品将沿着试纸条吸水板端移动，当移动至固定有喹诺酮-大分子蛋白偶联物试验线时，由于喹诺酮单克隆抗体-金纳米棒标记物与样品中喹诺酮类药物优先结合成复合物而不能与喹诺酮-大分子蛋白偶联物结合，因此显色的金纳米棒不能滞留于试验线上，试验线处没有色带显示，即只有一条控制线为阳性。相反如果样品中没有喹诺酮类药物，喹诺酮单克隆抗体-金纳米棒标记物移动到试验线上，喹诺酮单克隆抗体就会与喹诺酮-大分子蛋白偶联物发生特异结合，使胶体金滞留于试验线上，即二条色带为阴性。当移动至羊抗鼠多克隆抗体控制线时，无论样品中有无喹诺酮类药物，控制线都会显色。因此控制线无色带产生则代表操作有误，即检测时样品液面超过MAX线或试纸已经过期。本技术有益的技术效果在于：本试剂盒改变了以往采用胶体金标记待测物质抗体的方法，而是采用金纳米棒标记待测物质的单克隆抗体。本技术所提供的检测试剂盒具有灵敏度高、操作简便、方便携带、成本低、检测结果可靠等特点。由于金纳米棒是首次用于检测试纸中，在使用中发现由于其分子结构为刚性，流动性差，吸收到检测试纸上以后，流动缓慢，在试验线附近也没有很好的与包被物吸收结合。故而在检测试纸上设置一个带有导流槽和固液孔的导流板，可以加速金纳米棒标记的抗体和测试样品的混合物的流动和吸收、显色。附图说明图1为本技术中检测试纸的主视结构图；图2为本技术中检测试纸的侧视结构图；图3为本技术中微孔试剂部分的结构图；图4为本技术的使用方法图；图5为导流板的结构图；图6为本技术的阴性结果图；图7为本技术的阳性结果图；图8、图9为本技术的无效结果图；图中：1、吸水板，2、样品吸液板，3、试验线，4、控制线，5、硝酸纤维素膜，6、MAX线，7、底板，8、微孔试剂，9、导流板，10、导流槽，11、固 液槽。具体实施方式下面结合附图，对本技术进行具体描述。一、本试剂盒的组成：本技术所涉及的试剂盒是由检测试纸和微孔试剂8组成，如图1所示。其中检测试纸由底板7、吸水板1、硝酸纤维素膜5、样品吸液板2、MAX线6组成。底板7中部上方叠加硝酸纤维素膜5，硝酸纤维素膜上5有平行的一条试验线(T线)3和一条控制线(C线)4；底板7一端端头上方叠加吸水板1，另一端端头上方叠加样品吸液板2，硝酸纤维素膜5两端分别与吸水板1和样品吸液板2相互交叠连接(交叠连接部分1～2毫米)，且位于吸水板1和样品吸液板2的下方。其中试验线3由喹诺酮-大分子蛋白偶联物包被，控制线4靠近吸水板，由羊抗鼠多克隆抗体包被。微孔试剂8为将喹诺酮单克隆抗体-金纳米棒标记物直接冻干于微孔中制成，如图3所示。二、喹诺酮类药物胶体金检测试剂盒的制备：1、喹诺酮-大分子蛋白偶联物即喹诺酮类药物半抗原-载体蛋白偶联物的合成与鉴定喹诺酮类药物是小分子物质，只有免疫反应性，没有免疫原性，不能诱发机体产生免疫应答，必须与大分子载体蛋白偶联后才具有免疫原性。(1)喹诺酮类药物半抗原的合成将诺氟沙星0.64g溶于20ml三氯甲烷中，加入二环己基碳二亚胺(DCC)0.82g、适量催化剂4-二甲氨基吡啶(DMAP)和1,3-丙二胺0.本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种金纳米棒试剂盒，由检测试纸和微孔试剂(8)组成；所述检测试纸由底板(7)、吸水板(1)、硝酸纤维素膜(5)、样品吸液板(2)、MAX线(6)组成；所述硝酸纤维素膜(5)叠放在底板(7)的中部上面；所述吸水板(1)叠放在底板(7)的其中一端的端头部分上面，所述样品吸液板(2)叠放在底板(7)的另一端的端头部分上面；所述硝酸纤维素膜(5)两端分别与吸水板(1)和样品吸液板(2)相交叠，且所述硝酸纤维素膜(5)位于吸水板(1)和样品吸液板(2)的下方；其特征在于：在所述底板(7)和硝酸纤维素膜(5)及样品吸液板(2)之间设置一层导流板(9)；所述导流板(9)的一个端部与底板(7)设置有样品吸液板(2)的那个端部平齐，所述导流板(9)的另一个端部与硝酸纤维素膜(5)靠近吸水板(1)的那个端部平齐；所述导流板(9)在背离底板(7)的那个面上设置竖直贯通整个板体的导流槽(10)，所述导流槽(10)平行于底板(7)的长度方向；所述导流板(9)在与硝酸纤维素膜(5)接触的那个面上、在导流槽(10)上依次打固液孔(11)。
【技术特征摘要】
1.一种金纳米棒试剂盒，由检测试纸和微孔试剂(8)组成；所述检测试纸由底板(7)、吸水板(1)、硝酸纤维素膜(5)、样品吸液板(2)、MAX线(6)组成；所述硝酸纤维素膜(5)叠放在底板(7)的中部上面；所述吸水板(1)叠放在底板(7)的其中一端的端头部分上面，所述样品吸液板(2)叠放在底板(7)的另一端的端头部分上面；所述硝酸纤维素膜(5)两端分别与吸水板(1)和样品吸液板(2)相交叠，且所述硝酸纤维素膜(5)位于吸水板(1)和样品吸液板(2)的下方；其特征在于：在所述底板(7)和硝酸纤维素膜(5)及样品吸液板(2)之间设置一层导流板(9)；所述导流板(9)的一个端部与底板(7)设置有样品吸液板(2)的那个端部平齐，所述导流板(9)的另一个端部与硝酸纤维素膜(5)靠近吸水板(1)的那个端部平齐；所述导流板(9)在背离底板(7)的那个面上设置竖直贯通整个板体的导流槽(10)，所述导流槽(10)平行于底板(7)的长度方向；所述导流板(9)在与硝酸纤维素膜(5)接触的那个面上、在导流槽(10)上依次打...
【专利技术属性】
技术研发人员：张勋，贾敏，李奇富，何奚君，
申请(专利权)人：江苏美正生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：江苏;32
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