一种毛发毒品痕量检测提取液及其制备、使用方法技术

本申请描述了一种毛发毒品痕量检测提取液及其制备、使用方法，所述的提取液包括溶剂双蒸水，溶质50mM Tris

【技术实现步骤摘要】
一种毛发毒品痕量检测提取液及其制备、使用方法


[0001]本专利技术属于生物鉴定
，具体涉及一种毛发毒品痕量检测提取液及其制备、使用方法。

技术介绍

[0002]药物滥用也称为“吸毒”或“毒品滥用”。药物滥用(drug abuse)是指与医疗目的无关地反复大量使用一些具有依赖性或称依赖性潜力的药物，用药者采用自身给药形式，导致精神依赖性和身体依赖性，造成精神混乱和一些异常行为，其严重危害社会安全和人类生命健康。
[0003]毒品一经吸食会相应地在尿液、血液、唾液等生物检材中留下痕迹，成为认定吸毒违法行为的证据。目前，国内外主要应用免疫胶体金技术、气质联用色谱和高效液相色谱
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质谱联用分析对吸毒人员的尿液和唾液进行检测和认定。不同种类的检材具有不同的吸毒追溯期。但通常吸毒24
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48小时后，尿液和唾液毒品基本代谢排出，导致检测阴性而无法提供有价值的信息。
[0004]血液中的毒品、药物分子进入头发、腿毛、阴毛、腋毛等毛发毛囊周围密集的毛细血管，在毛囊中毒品分子被毛发中的角蛋白固定，大约3
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5天内含有毒品分子的毛发将长出头皮表面。由于毛发的生长速度相对较慢，毒品分子可在毛发中长期稳定存在，且毛发中毒品及其代谢物的含量很低。毛发作为毒品小分子的一个特殊载体，具有样本易获取、易保存、结果稳定、检测时限长、能反映较长时间(长达六个月以上)的药物使用情况等独特优势。因此，毛发毒品和药物分析在毒品检测、法医毒物学、临床毒物学以及兴奋剂检测领域具有非常广泛的应用前景。
[0005]由于毛发中的毒品包埋在角蛋白中，首先需要用酸解、碱解和甲醇等有机溶剂对毛发进行消解，使得毒品小分子释放并呈游离状态进入溶液，因此如何安全、快速、高效地对人体毛发样本中富集的毒品小分子进行提取就成为当前首要的技术难题。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的为提供一种痕量毒品检测的毛发提取液及其制备、使用方法，该方法操作简单，提取率高，可以快速地从毛发中提取痕量毒品及其代谢物，毒品释放快，无毒高效。
[0007]为实现本专利技术的上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0008]一种毛发毒品痕量检测提取液，包括下述重量份的原料：包括溶剂双蒸水，溶质50mM Tris
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Hcl、体积浓度0.5％
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1％聚乙二醇辛基苯基醚、质量浓度0.5％十二烷基硫酸钠(SDS)、50mM
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100mM二硫苏糖醇(DTT)、50
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100ug/ml蛋白酶K和1mM氯化钙。
[0009]三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(Tris
‑
Hcl)被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂。
[0010]聚乙二醇辛基苯基醚是一种有机高分子化合物，为无色或几乎无色透明黏稠液体。用作气相色谱固定液，分离分析烃类化合物，含氧化合物、碱性和中性含氮化合物、硫
醇、无机气体。
[0011]十二烷基硫酸钠是一种有机化合物，为白色或淡黄色粉末，易溶于水，具有去污、乳化和优异的发泡力。
[0012]二硫苏糖醇是一种小分子有机还原剂，其还原状态下为线性分子，被氧化后变为包含二硫键的六元环状结构。其可作为巯基化DNA的还原剂和去保护剂，也常常被用于蛋白质中二硫键的还原，可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。
[0013]蛋白酶K为强力蛋白溶解酶，是一种从白色念珠菌分离出来的强力蛋白溶解酶，具有很高的比活性，是DNA提取的关键试剂。在DNA提取中，主要作用是酶解与核酸结合的组蛋白，使DNA游离在溶液中，随后用不同方法进行抽提，除去杂质，收集DNA。蛋白酶K溶液为无色透明，如出现沉淀就不能再使用。
[0014]双蒸水是重蒸水的一种，是将经过一次蒸馏后的水，再次蒸馏所得到的水。
[0015]上述一种毛发毒品痕量检测提取液，作为一种优选的实施方案，包括下述重量份的原料：包括溶剂双蒸水，溶质50mM Tris
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Hcl、体积浓度0.8％聚乙二醇辛基苯基醚、质量浓度0.5％十二烷基硫酸钠、80mM二硫苏糖醇、80ug/ml蛋白酶K、1mM氯化钙。
[0016]其中：nM为纳摩尔每升，mM为毫摩尔每升。
[0017]上述一种毛发毒品痕量检测提取液，作为一种优选的实施方案，所述Tris
‑
Hcl的pH为7.5。
[0018]本申请的第二方面，提供一种毛发毒品痕量检测提取液的制备方法，包括以下步骤：
[0019](1)将除去蛋白酶K的其余原料溶于双蒸水中混合搅拌均匀，得中间产品；
[0020](2)将待检测样品放入前，向中间产品中加入蛋白酶K，混合均匀得所述提取液。
[0021]本申请的第三方面，提供一种毛发毒品痕量检测提取液的使用方法，
[0022](1)将10mg的毛发剪为1
‑
2mm，放入研磨管，震荡研磨；
[0023](2)将所述提取液加入研磨管中，混合均匀，得毛发研磨液；
[0024](3)将步骤(2)所得毛发研磨液滴加到吗啡、冰毒或氯胺酮试剂条，5min后，上机检测。
[0025]上述一种毛发毒品痕量检测提取液的使用方法，作为一种优选的实施方案，步骤(1)中，震荡研磨为将研磨管放入震荡仪中，在100Hz下震荡研磨100s。
[0026]上述一种毛发毒品痕量检测提取液的使用方法，作为一种优选的实施方案，步骤(2)中，毛发与提取液的用量比为10mg：1ml。
[0027]本申请的有益效果为：本申请所述提取液所含原料蛋白酶K可水解毛发角蛋白的肽键，分解角蛋白，释放毒品小分子，提取液中的Ca
2+
离子可以提高酶的活性，二硫苏糖醇作为还原剂可提高蛋白酶的活性，十二烷基硫酸钠可破坏蛋白结构，有助于毒品分子释放，聚乙二醇辛基苯基醚是一种非离子表面活性剂，与脂质形成可溶性复合物，疏水端可结合膜蛋白的疏水区，溶于溶液，即本申请所述提取液所含各原料有机地结合在一起可使毛发中的毒品分子快速溶出。
[0028]本申请所述提取液可以对吗啡、甲基安非他命、氯胺酮、3,4
‑
亚甲二氧基苯丙胺、可卡因、甲卡西酮、合成大麻素等毒品小分子进行有效提取，使毒品小分子充分释放，提取
率高；工艺简单，无毒、无污染，现场检测的可行性高；与传统提取方法相比，将提取时间缩短到100s，并保证了结果的真实可靠，大大提高了执法机关及戒毒机构在一线检测的准备性和高效性。
具体实施方式
[0029]为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本专利技术所保护的范围。
[0030]本申请实施例中所使用的毛发毒品检测仪器本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种毛发毒品痕量检测提取液，其特征在于，包括溶剂双蒸水，溶质50mM Tris
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Hcl、体积浓度0.5％
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1％聚乙二醇辛基苯基醚、质量浓度0.5％十二烷基硫酸钠、50mM
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100mM二硫苏糖醇、50
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100ug/ml蛋白酶K、1mM氯化钙。2.根据权利要求1所述毛发毒品痕量检测提取液，其特征在于，包括下述重量份的原料：包括溶剂双蒸水，溶质50mM Tris
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Hcl、体积浓度0.8％聚乙二醇辛基苯基醚、质量浓度0.5％十二烷基硫酸钠、80mM二硫苏糖醇、80ug/ml蛋白酶K、1mM氯化钙。3.根据权利要求1所述毛发毒品痕量检测提取液，其特征在于，所述Tris
‑
Hcl的pH为7.5。4.权利要求1
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【专利技术属性】
技术研发人员：张国华，李令磊，杨雅惠，
申请(专利权)人：上海凯创生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：