一种快速测定茶叶中农药残留的前处理方法及定量分析方法技术

本发明专利技术公开了一种快速测定茶叶中农药残留的前处理方法及其定量分析方法，步骤如下：1)提取：将茶叶浸泡于水中，加入乙腈提取农药残留，然后加入醋酸钠进行盐析使有机相和水相进行相分离，所得乙腈层即为茶叶提取液；2)净化：将步骤1)所得茶叶提取液中加入活性炭、N‑丙基乙二胺和硫酸镁进行净化，所得上清液即为快速测定茶叶中农药残留的待测液；3)采用标准曲线法经气相色谱‑串联质谱进行定量分析。本发明专利技术前处理过程中，所得提取液中茶叶基质的含量大大减少，净化效果好，且农药的回收率基本不受影响，大大提高了样品前处理的效果，结合气相色谱‑串联质谱对农药进行分离检测，大大提高了农药的分离效率，检测灵敏度和准确性高，且重现性好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于快速分析检测
，特别涉及一种快速测定茶叶中农药残留的前处理方法及定量分析方法。
技术介绍
茶叶是我国重要的农产品，也是我国传统的出口商品，由于具有独特的芳香气味，同时含有多种对人体有益的物质，已成为世界上最受欢迎的饮品之一。然而，在茶叶种植过程中，病虫害较多，为了减少病虫草对茶叶产量和质量的影响，在生产过程中不可避免的使用各种农药，这些农药最终可能会残留在茶叶中，给人类健康带来严重威胁。许多国家和相关机构已规定了茶叶中多种农药最大残留量(MRLs)，从而保证消费者的健康以及国际贸易的顺利进行。因此，为了保障茶叶质量安全的最后一道防线，建立简单有效、高灵敏度的分析方法用于茶叶中农药残留的检测是十分必要的。在茶叶中农药残留的检测中，茶叶中大量的色素、甾醇、生物碱、茶多酚等基质组分不仅会降低检测结果的灵敏度和选择性，而且还会对色谱柱、离子源和检测器等造成极大的损害。因此，在进行仪器分析前，通常需要采用合适的样品前处理技术避免基质对目标物分析的干扰，提高检测结果的准确性。目前，文献上已报道过多种茶叶样品的前处理方法，如凝胶渗透色谱(GPC)、固相萃取(SPE)、分散固相萃取(DSPE)、基质固相分散萃取(MSPD)、固相微萃取(SPME)等，然而这些方法通常较为繁琐，使得检测方法耗时过长。因此，发展简便、高效的样品前处理技术用于农药残留的检测是尤为关键的，能够有效地保证茶叶中农药残留检测分析方法的建立。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对上述现有技术中的不足，提供一种快速测定茶叶中农药残留的前处理方法及定量分析方法，提取液中茶叶基质的含量大大减少，净化处理效果好，且农药的回收率基本不受影响，大大提高了样品前处理的效果，结合气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)对农药进行分离检测，大大提高了农药的分离效率，检测灵敏度和准确性高，且方法具有很好的重现性。为了解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案如下：一种快速测定茶叶中农药残留的前处理方法，包括如下步骤：1)提取：将茶叶浸泡于水中，加入乙腈(ACN)提取茶叶中农药残留，然后加入醋酸钠(NaOAc)进行盐析，使乙腈和水进行相分离，所得上层乙腈层即为茶叶提取液；2)净化：将步骤1)所得茶叶提取液中加入活性炭(AC)、N-丙基乙二胺固相吸附剂(PSA)和硫酸镁(MgSO4)进行净化，然后经固液分离后，所得上清液即为茶叶净化液，可以作为快速测定茶叶中农药残留的待测液。按上述方案，所述茶叶预先进行匀质化处理。按上述方案，所述茶叶与水的质量比在0.2-1范围内。按上述方案，所述浸泡时间为5min以上，优选5-80min。按上述方案，所述乙腈的体积与茶叶的质量的比例范围为(2.5-10)mL：1g；提取时间在0.5-10min范围内。按上述方案，所述醋酸钠与水的质量比在0.25-1.00范围内。在盐析过程中，本专利技术加入NaOAC取代传统的无机盐，其与传统的QuEChERS提取方法相比较，效果十分突出。传统的QuEChERS方法在提取过程中通常同时加入硫酸镁(MgSO4)和NaOAC(或NaCl)，而NaOAC的量加入较少(与水的比例在0.1左右)，我们将醋酸钠的量提高了2.5-10倍，茶叶提取液中的茶叶基质较传统方法少了很多，而对茶叶中残留农药的提取效率没有影响。按上述方案，所述活性炭(AC)与茶叶的质量比为0.01-0.5；所述N-丙基乙二胺固相吸附剂(PSA)与茶叶的质量比为0.1-2；所述硫酸镁(MgSO4)与茶叶的质量比为0.2-2；净化时间优选0.2-2min。活性炭的吸附能力很强，本领域技术人员通常在净化茶叶时不采用活性炭，以避免活性炭对其中的农药残留进行吸附，从而影响对茶叶中农药残留的准确测定。本专利技术中意外尝试了加入少量活性炭作为吸附剂之一，发现并不影响农药残留的回收，反而会优先吸附茶叶中其他物质，最终净化效果非常突出。本专利技术在上述快速测定茶叶中农药残留的前处理方法的基础上，进一步提供一种快速测定茶叶中农药残留的定量分析方法，即将快速测定茶叶中农药残留的待测液采用标准曲线法经气相色谱-串联质谱进行定量分析。具体包括如下步骤：(1)按照本专利技术所述前处理方法，制备快速测定茶叶中农药残留的待测液；(2)采用空白基质匹配的校准曲线，将若干种农药在茶叶的空白基质中配制成一系列浓度的标准混合溶液，并用气相色谱-串联质谱进行分析，然后以每一种农药以其浓度为横坐标，其对应的峰面积为纵坐标，绘制每种农药的线性标准曲线；(3)将本专利技术所得快速测定茶叶中农药残留的待测液用气相色谱-串联质谱进行分析，分别根据出峰时间和定性定量离子对确定农药具体类别，并将其峰面积分别代入对应农药的标准曲线，从而得到待测液中农药的含量。按上述方案，所述标准曲线的浓度线性范围在1-1000μg/kg。按上述方案，所述若干种农药为1-69种，包括有机磷、有机氯、有机氮、菊酯类、苯基吡唑类等农药。按上述方案，所述标准溶液的配制方法为：采用不含待测农药的空白茶叶样品按照本专利技术所述前处理方法处理，得空白茶叶基质；然后采用该空白茶叶基质将若干种农药配制成一系列浓度的标准混合溶液，标准混合溶液中每种农药的浓度均在线性范围内。按上述方案，所述气相色谱-串联质谱的检测条件：采用中等极性的毛细管色谱柱进行分离，采用适当的程序升温的方法，串联质谱的多反应监测模式检测。最优选地，分离使用熔融石英毛细管色谱柱Rtx-5MS，30m×0.25mm id，膜厚0.25mm(Restek，Pennsylvania，USA)；气相色谱升温程序如下：在40℃保持4min，之后以25℃/min的速度升至125℃，再以10℃/min的速度升至300℃，保持6min，溶剂切除时间为7min；采用不分流模式进样，进样体积1μL；选用纯度为99.999％的氦气作为载气，载气流速为1.0mL/min；选用纯度为99.999％的氩气作为碰撞气；进样口、连接口和离子源温度分别为250℃、250°℃和230℃。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：(1)本专利技术在QuEChERS的提取过程中，单独使用乙酸钠(NaOAc)取代传统的QuEChERS方法中的无机盐诱导相分离，得到的乙腈提取液中茶叶基质的含量大大减少，且农药的回收率基本不受影响，大大提高了样品前处理的效果；(2)本专利技术在QuEChERS的净化过程中，首次使用活性炭(AC)和N-丙基乙二胺固相吸附剂(PSA)作为吸附剂用以去除茶叶提取液中的基质干扰物，对茶叶的ACN提取液进行净化，大部分的农药的回收率都在70-120％之间，同时活性炭比传统的QuEChERS吸附剂GCB和C18具有更好的去除色素的效果，大大提高了提取液净化的效果；(3)与石墨化炭黑相比，活性炭具有比传统的QuEChERS吸附剂(GCB和C18)更好的去除色素的效果，且价格非常便宜，大大降低了样品分析的成本，在茶叶农药残留分析中具有广泛的应用前景；(4)本申请所述的前处理方法结合气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)对农药进行分离检测，大大提高了农药的分离效率，并建立了茶叶中可能含有的绝大多数农药快速、有效的多残留分析方法，检测灵敏度和准确性高，且方法具有很好的重现性，并能成功应用于市场上多本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速测定茶叶中农药残留的前处理方法，其特征在于包括如下步骤：1)提取：将茶叶浸泡于水中，加入乙腈提取茶叶中农药残留，然后加入醋酸钠进行盐析使乙腈和水进行相分离，所得乙腈层即为茶叶提取液；2)净化：将步骤1)所得茶叶提取液中加入活性炭、N‑丙基乙二胺固相吸附剂和硫酸镁进行净化，然后经固液分离后，所得上清液即为茶叶净化液，即作为快速测定茶叶中农药残留的待测液。

【技术特征摘要】
1.一种快速测定茶叶中农药残留的前处理方法，其特征在于包括如下步骤：1)提取：将茶叶浸泡于水中，加入乙腈提取茶叶中农药残留，然后加入醋酸钠进行盐析使乙腈和水进行相分离，所得乙腈层即为茶叶提取液；2)净化：将步骤1)所得茶叶提取液中加入活性炭、N-丙基乙二胺固相吸附剂和硫酸镁进行净化，然后经固液分离后，所得上清液即为茶叶净化液，即作为快速测定茶叶中农药残留的待测液。2.根据权利要求1所述的一种快速测定茶叶中农药残留的前处理方法，其特征在于所述茶叶预先进行匀质化处理。3.根据权利要求1所述的一种快速测定茶叶中农药残留的前处理方法，其特征在于所述茶叶与水的质量比在0.2-1.0范围内；所述浸泡时间为5min以上。4.根据权利要求1所述的一种快速测定茶叶中农药残留的前处理方法，其特征在于所述乙腈的体积与茶叶的质量的比例范围为(2.5-10)mL：1g；提取时间在0.5-10min范围内。5.根据权利要求1所述的一种快速测定茶叶中农药残留的前处理方法，其特征在于所述醋酸钠与水的质量比在0.25-1.00范围内。6.根据权利要求1所述的一种快速测定茶叶中农药残留的前处理方法，其特征在于所述活性炭与茶叶的质量比为0.01-0.5。7.根据权利要求1所述的一种快速测定茶叶中农药残留的前处理方法，其特征在于所述N-丙基乙二胺固相吸附剂与茶...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭西甜，张惠贤，鲁维，夏虹，胡西洲，王小飞，彭立军，
申请(专利权)人：湖北省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，
类型：发明
国别省市：湖北;42