本发明专利技术提供了一株具有益生作用的凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)，该菌株命名为HEW‑B379，保藏编号为CGMCC No.12553。本发明专利技术的凝结芽孢杆菌HEW‑B379具有显著的益生性，可有效抑制肠道致病大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌属、变形杆菌、腐败希瓦氏菌、铜绿假单胞菌的生长繁殖。本发明专利技术凝结芽孢杆菌HEW‑B379具有较强的抗逆性，可以耐高温、耐模拟胃液、模拟胆盐环境，且能保持99％‑100％的存活率，该菌可有效调节动物肠道微生物平衡，抑制有害微生物生长，促进动物对营养的吸收，提高饲料转化率，提高动物生产性能。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物学领域，具体地说，涉及一种具有益生作用的凝结芽孢杆菌HEW-B379及其应用。
技术介绍
随着人们对畜产品安全和环境保护意识的不断加强，作为抗生素的替代品，益生菌越来越多的应用于动物营养和饲料中。益生菌是一类能改善动物胃肠道微生态平衡，有益于动物健康和生产性能发挥的微生物添加剂。其主要作用效果体现在改善动物新陈代谢，提高营养物质吸收和利用，提高免疫力，减少环境污染等方面发挥重要作用。由于芽孢杆菌对干燥、高温、高压、氧化等不良环境抵抗力很强，这种稳定性增加了它作为益生菌的潜力。因此，获得新型具有益生特性的芽孢杆菌的研究具有重大意义。分离和筛选抗病原菌且具有益生效果的凝结芽孢杆菌，可以更好的应用于饲料添加剂，以代替抗生素。但凝结芽孢杆菌作为益生菌制剂或饲料添加剂的研究与应用较少，尤其是在替代饲养抗生素和促进动物对营养的吸收，提高动物生产性能等方面。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种具有益生作用的凝结芽孢杆菌HEW-B379及其应用。为了实现本专利技术的目的，本专利技术的凝结芽孢杆菌HEW-B379(Bacillus coagulans)是从健康猪肠道内容物中分离的芽孢杆菌菌株，通过菌落形态观察、发酵性能检测、抑菌性能检测、16S rDNA基因序列分析和体外益生效果评价得到，该菌株抗逆性强，耐酸碱及耐高温强、益生性更加显著。其16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所
示。该菌株已于2016年5月27日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，分类命名为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)，保藏编号为CGMCC No.12553。本专利技术提供的凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)HEW-B379具有以下微生物学特征：凝结芽孢杆菌HEW-B379是革兰氏阳性杆菌，在MRS培养基上生长良好，白色菌落、圆形、有光泽、边缘整齐，菌落直径为2～3mm，菌落形态如图1，显微镜下菌体呈直杆状，芽孢短生，兼性厌氧生长，经革兰氏染色后菌株形态如图2；凝结芽孢杆菌HEW-B379生长适宜温度范围：4℃-65℃，最适生长温度：20℃-45℃；生长适宜pH1.5-10，最适pH值为6-8。部分生理生化特性如表1。本专利技术提供了含有保藏编号为CGMCC No.12553的凝结芽孢杆菌HEW-B379的菌剂。本专利技术提供了含有保藏编号为CGMCC No.12553的凝结芽孢杆菌HEW-B379的饲料添加剂。饲料添加剂中凝结芽孢杆菌HEW-B379的活菌数为1.0×106～1.0×1010CFU/g。优选地，饲料添加剂中凝结芽孢杆菌HEW-B379的活菌数为1×107CFU/g。本专利技术提供了含有保藏编号为CGMCC No.12553的凝结芽孢杆菌HEW-B379的动物饲料。本专利技术提供了含有保藏编号为CGMCC No.12553的凝结芽孢杆菌HEW-B379的药物，所述药物为预防或治疗动物腹泻的药物。本专利技术提供了含有保藏编号为CGMCC No.12553的凝结芽孢杆菌HEW-B379或含有其的菌剂在提高饲料转化率，提高动物生产性能中的应用。本专利技术提供了含有保藏编号为CGMCC No.12553的凝结芽孢杆
菌HEW-B379或含有其的菌剂在制备微生态益生制剂中的应用。本专利技术提供了含有保藏编号为CGMCC No.12553的凝结芽孢杆菌HEW-B379或含有其的菌剂在制备预防或治疗动物腹泻的药物中的应用。本专利技术提供了含有保藏编号为CGMCC No.12553的凝结芽孢杆菌HEW-B379或含有其的菌剂在制备广谱抗菌剂中的应用。所述广谱抗菌剂的抗菌谱包括抗以下菌：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌属、变形杆菌、腐败希瓦氏菌、铜绿假单胞菌。本专利技术提供了含有保藏编号为CGMCC No.12553的凝结芽孢杆菌HEW-B379或含有其的菌剂在食品制造中的应用。优选地，所述的食品为动物用食品。本专利技术中所述凝结芽孢杆菌HEW-B379的培养方法如下：取凝结芽孢杆菌HEW-B379种子液1-5mL(种子液是挑取的单个菌落在种子液培养基中培养的，其活菌浓度以109CFU/mL计；种子液的培养基和培养条件与发酵的培养基和培养条件相同)，接种到300mL培养基中，进行摇瓶发酵培养。所述培养基由如下组分组成：可溶性淀粉0.5-5％，蔗糖0.5-5％，酵母浸粉0.5-3％，蛋白胨0.1-1.0％，磷酸氢二钾0.05-0.5％，硫酸镁0.05-0.5％，氯化钠0.1-2.0％，碳酸钙0.1-1.0％，余量为水，pH6.8±0.2；其中，优选为：可溶性淀粉1.2％，蔗糖1.8％，酵母浸粉1.0％，蛋白胨1.5％，磷酸氢二钾0.08％，硫酸镁0.2％，氯化钠0.5％，碳酸钙0.2％，余量为水，pH6.8±0.2。所述摇瓶发酵的条件为：发酵温度25-45℃，发酵时间8-24h，pH值6.0-8.0，转速为100-300r/m；优选为：发酵温度为40℃、pH值6.8、搅拌转速200r/m，发酵时间10h。50L种子罐罐培养基与摇瓶发酵培养基相同。50L发酵罐发酵条
件为：装液量为20-40L培养基，接种量为500-1000mL摇瓶种子液，发酵温度为25-45℃，发酵时间5-20h，pH值6.0-8.0，搅拌转速100-300r/min。其中，优选为：装液量为35L培养基，接种量为600mL，发酵温度为40℃，发酵时间10h，pH值6.8，搅拌转速150r/min。500L发酵罐中试培养基及发酵条件为：1-25％麸皮浸出液、1-5％淀粉、1-5％豆粕、1-5％玉米浆干粉、0.05-0.1％磷酸氢二钾、0.05-0.5％硫酸镁、0.1-2.0％氯化钠、0.01-0.05％硫酸锰、0.1-1.0％碳酸钙，余量为水，pH6.0-8.0，控制罐压0.02-0.05MpB，装液量250-300L、接种量25-35L，发酵温度为25-45℃，发酵时间5-20h，pH值6.0-8.0，搅拌转速100-300r/min，其中，优选为：装液量为300L培养基，接种量为35mL，发酵温度为40℃，发酵时间15h，pH值6.8，搅拌转速150r/min。5T发酵罐培养基与500L发酵罐中试培养基相同，其发酵条件为：控制罐压0.02-0.05MpB，装液量2.5T-3.5T、接种量250-350L，发酵温度为25-45℃，发酵时间20-36h，pH值6.0-8.0，搅拌转速100-300r/min，其中，优选为：装液量为3T培养基，接种量为300mL，发酵温度为40℃，发酵时间30h，pH值6.8，搅拌转速150r/min。本专利技术凝结芽孢杆菌HEW-B379的益生性的检验方法如下：在无菌操作台上，将病原菌(肠道致病大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌属、变形杆菌、腐败希瓦氏菌、铜绿假单胞菌)浓度为109CFU/mL的菌悬液10mL与90mL与冷却至50℃的营养琼脂(灭菌后)混匀，制备成厚度4mm左右的病原菌平板，将灭菌的牛津杯(内径6mm、外径本文档来自技高网...
【技术保护点】
一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)HEW‑B379，其保藏编号为CGMCC No.12553。
【技术特征摘要】
1.一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)HEW-B379，其保藏编号为CGMCC No.12553。2.含有权利要求1所述凝结芽孢杆菌HEW-B379的菌剂。3.含有权利要求1所述凝结芽孢杆菌HEW-B379的饲料添加剂。4.如权利要求3所述的饲料添加剂，其特征在于，饲料添加剂中凝结芽孢杆菌HEW-B379的活菌数为1.0×106～1.0×1010CFU/g。5.含有权利要求1所述凝结芽孢杆菌HEW-B379的药物，所述药物为预防或治疗动物腹泻的药物。6.权利要求1所述的凝结芽孢杆菌HEW-B3...
【专利技术属性】
技术研发人员：李雪平，
申请(专利权)人：北京好实沃生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11
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