一种包被丁酸梭菌活菌制剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种包被丁酸梭菌活菌制剂及其制备方法和应用，所述方法的步骤包括：收集丁酸梭菌发酵离心后的菌泥；依次加入丁酸梭菌发酵原液

【技术实现步骤摘要】
一种包被丁酸梭菌活菌制剂及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及一种包被丁酸梭菌活菌制剂及其制备方法和应用，属于益生菌剂领域
。

技术介绍

[0002]我国国民对食用肉类的品质要求越来越高
。
在饲料禁抗的大前提下，微生态制剂作为一种抗生素代替物，具有更绿色
、
健康
、
安全的特点
。
[0003]丁酸梭菌作为微生态制剂类的饲料添加剂，可有效改善畜禽肠道健康，增强机体免疫，促进畜禽生长
。
丁酸梭菌能代谢产生乙酸
、
丙酸和丁酸等短链脂肪酸
(SCFAs)
，
SCFAs
可起到调节免疫系统
、
抗炎
、
护肝
、
调肠
、
抗致病菌的功效
。
丁酸梭菌产生的多种消化酶还能促进动物对饲料中营养物质的吸收，提高饲料转化率，进而提高动物的生长性能；此外，丁酸梭菌的抗氧化性能优异，可改善肉品质，已在畜禽养殖中被广泛应用
。
作为一种产芽孢菌，丁酸梭菌的抗逆性较强，可以耐受饲料制粒时的高温以及宿主胃肠环境中的胃酸
、
胆盐
。
[0004]固态包被技术是指按特定工艺将成膜材料包裹在活菌表面，干燥后形成紧密黏附的保护层，从而将活菌与外界环境隔绝
。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种包被丁酸梭菌活菌制剂及其制备方法和应用，所制备的丁酸梭菌制剂具有活性高
、
稳定
、
耐储存
、
耐酸
、
耐胆盐
、
耐高温以及耐制粒等优良性能，弥补了传统工艺中储存稳定性不佳的缺点
。
[0006]为了达成上述的目的，本专利技术提供了一种包被丁酸梭菌活菌制剂的制备方法，包括以下步骤：
[0007]1)
丁酸梭菌发酵原液经管式离心机
12000
～
15000
转
/min
，离心
30
～
50min
，收集丁酸梭菌高活性菌泥
4.0
～
6.0
×
10
10
CFU/g
；
[0008]2)
制备丁酸梭菌混合湿料：将步骤
1)
得到的丁酸梭菌菌泥依次与保护剂
、
载体混合，搅拌器搅拌
20min
，得到丁酸梭菌混合湿料；
[0009]3)
耐挤压制粒：将步骤
2)
得到的丁酸梭菌混合湿料加入制粒机中，调节粒度至
20
目，得到
20
～
30
目的丁酸梭菌湿颗粒；
[0010]4)
赋型抛丸：将步骤
3)
得到的丁酸梭菌湿颗粒加入抛丸机中旋转抛丸塑形，旋转速度为
400
～
600r/min
，获得丁酸梭菌抛丸颗粒；
[0011]5)
烘干
、
包衣：将步骤
4)
得到的丁酸梭菌抛丸颗粒置于流化床进行干燥，获得丁酸梭菌烘干颗粒；启动流化床侧喷包衣装置，将包衣液通过高压气流雾化后以
50
～
80mL/min
的速度喷向丁酸梭菌颗粒，形成包衣层，制得具有活性高
、
稳定
、
耐储存
、
耐酸
、
耐胆盐
、
耐高温以及耐制粒等优良性能的包被丁酸梭菌活菌制剂
。
利用流化床包被的作用可以归纳为4点：
1、
隔绝外界氧气对活菌的影响；
2、
提高活菌在饲料制粒过程中的高温和挤压的耐受度；
3、
减少储存
、
运输和饲料加工过程中的活性损失；
4、
降低胃肠道消化液中的胃酸和胆盐对活菌活性的影响
。
[0012]进一步地，其中步骤
1)
中所述的丁酸梭菌发酵原液通过以下步骤制得：用四区划线法将
‑
80℃
保藏的丁酸梭菌甘油管活化至
MRS
固体平板上，
37℃
厌氧培养
40
～
48h
至长出单菌落；用灭菌牙签挑取单菌落接种至丁酸梭菌种子培养基，
37℃
厌氧发酵
12
～
18h
，得到丁酸梭菌一级种子液；将一级种子液以4～8％
(v/v)
的接种量转接至丁酸梭菌种子培养基中，
37℃
厌氧发酵8～
10h
，得到丁酸梭菌二级种子液；将二级种子液以1～3％
(v/v)
的接种量转接至装有丁酸梭菌扩繁培养基的种子罐中，
37℃
厌氧发酵
10
～
14h
，得到丁酸梭菌种子扩繁液；将种子扩繁液以1～2％
(v/v)
的接种量转移至装有丁酸梭菌发酵培养基的发酵罐中，经过
30
～
32h
厌氧发酵得到丁酸梭菌发酵原液，活性为
9.0
～
12
×
108CFU/mL。
[0013]进一步地，其中步骤
1)
中所述的厌氧发酵条件为：温度为
36
～
38℃
，
pH
为
5.5
～
6.5
，发酵转速为
60
～
80rpm。
[0014]进一步地，其中步骤
2)
中所述的保护剂的组成为：丁酸梭菌发酵原液
、
甘油及碳酸钙
。
[0015]进一步地，其中步骤
2)
中所述的载体的组成为：麦芽糊精及玉米淀粉
。
[0016]所述保护剂能有效的保持丁酸梭菌的芽孢环境，尽可能减少后处理过程中芽孢萌发导致的活性损失；所述载体可有效保持丁酸梭菌活菌制剂的稳定性及耐制粒挤压的存活率
。
[0017]进一步地，其中步骤
2)
中所述的菌泥与丁酸梭菌发酵原液
、
甘油
、
碳酸钙
、
麦芽糊精
、
玉米淀粉的质量比例为
10
：
(1
～
5)
：
(0.5
～
2)
：
(0.1
～
0.5)
：
(0.5
～
1)
：
(2
～
6)
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种包被丁酸梭菌活菌制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)
丁酸梭菌发酵原液经管式离心机
12000
～
15000
转
/min
，离心
30
～
50min
，收集丁酸梭菌高活性菌泥
4.0
～
6.0
×
10
10
CFU/g
；
2)
制备丁酸梭菌混合湿料：将丁酸梭菌菌泥依次与保护剂
、
载体混合，搅拌器搅拌
20min
；
3)
耐挤压制粒：将丁酸梭菌混合湿料加入制粒机中，调节粒度
20
目，得到
20
～
30
目的丁酸梭菌湿颗粒；
4)
赋型抛丸：将丁酸梭菌湿颗粒加入抛丸机中旋转抛丸塑形，旋转速度为
400
～
600r/min
，获得抛丸颗粒；
5)
烘干
、
包衣：将丁酸梭菌抛丸颗粒置于流化床进行干燥，获得丁酸梭菌烘干颗粒；启动流化床侧喷包衣装置，将包衣液通过高压气流雾化后以
50
～
80mL/min
的速度喷向丁酸梭菌颗粒，形成包衣层，制得包被丁酸梭菌活菌制剂
。2.
如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，其中步骤
1)
中所述的丁酸梭菌发酵原液通过以下步骤制得：用四区划线法将
‑
80℃
保藏的丁酸梭菌甘油管活化至
MRS
固体平板上，
37℃
厌氧培养
40
～
48h
至长出单菌落；用灭菌牙签挑取单菌落接种至丁酸梭菌种子培养基，
37℃
厌氧发酵
12
～
18h
，得到丁酸梭菌一级种子液；将一级种子液以4～8％
(v/v)
的接种量转接至丁酸梭菌种子培养基中，
37℃
厌氧发酵8～
10h
，得到丁酸梭菌二级种子液；将二级种子液以1～3％
(v/v)
的接种量转接至装有丁酸梭菌扩繁培养基的种子罐中，
37℃
厌氧发酵
10
～
14h
，得...

【专利技术属性】
技术研发人员：李雪平，刘建芳，汤立，袁云，杨俊岚，
申请(专利权)人：北京好实沃生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：