次血红素6肽衍生物及其制备方法和用途技术

技术编号:13790953 阅读:98 留言:0更新日期:2016-10-05 23:27
本发明专利技术涉及一种次血红素6肽衍生物,其具有Dh-β-AH-CPP结构,其中CPP代表细胞膜穿透肽,所述Dh-β-AH与所述CPP是通过共价键偶联的。本发明专利技术还涉及该次血红素6肽衍生物的制备方法,涉及包含该次血红素6肽衍生物的组合物,涉及该次血红素6肽衍生物在制备用于预防和/或治疗疾病或预防衰老的药剂中的用途。所述次血红素6肽衍生物特别适于口服。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及次血红素6肽衍生物及其制备方法和用途。具体地,本专利技术涉及次血红素6肽衍生物Dh-β-AH-CPP、包含其的组合物、其制备方法及其在制备具有抗坏血酸过氧化物酶活性的药剂中的用途。
技术介绍
次血红素6肽(Deuterohaemin-β-Ala-His-Thr-Val-Glu-Lys,Dh-β-AHTVEK,DhHP-6)作为一种铁卟啉的肽类衍生物,是抗坏血酸过氧化物酶的模拟酶,体内/体外试验结果表明其具有良好的抗氧化活性,在预防和/或治疗糖尿病、白内障、心脑血管疾病、衰老、炎症方面均显示较好的功效。然而,次血红素6肽作为一种多肽,由于分子量大、不易透过细胞膜,因此常规的给药途径是注射。然而,从患者使用的方便、安全及顺应性角度考虑,尤其是例如糖尿病这类需要长期用药的情况,这样的给药方式并不理想。相较于注射给药,口服给药是各种给药方式中较为理想的方式之一。虽然目前通过多肽链修饰技术(参见CN 103450341 A)显著提高了多肽的稳定性,从而可提高多肽的生物利用度,为口服给药奠定了基础,但是这些修饰却不能显著改善次血红素6肽的肠道细胞透过性,因此,仍然不适于口服。为了解决上述问题,需要对次血红素6肽进一步改造,以使其适于口服。
技术实现思路
本专利技术的一个目的在于提供适于口服的次血红素6肽衍生物。本专利技术人发现,将次血红素6肽的序列截短,得到具有抗坏血酸过氧化物酶活性的最小单元——Dh-β-AH,再将此活性单元与细胞膜穿透肽(cell penetrating peptide,CPP)化学偶联,可获得具有活性的口服
次血红素6肽衍生物Dh-β-AH-CPP。所述次血红素6肽衍生物Dh-β-AH-CPP具有很好的穿膜性能,跨肠道细胞能力增加。因此,在本专利技术的第一个方面,提供了具有下式结构的次血红素6肽衍生物:Dh-β-AH-CPP,其中CPP代表细胞膜穿透肽,并且所述CPP与所述Dh-β-AH是化学偶联的。所述化学偶联是指所述CPP与所述Dh-β-AH是通过共价键连接在一起的。优选地,所述CPP为GRKKRRQRRRPPQ、RRRRRRRR、KLALKLALKALKAALKLA、MVTVLFRRLRIRRACGPPRVRV、RQIKIWFQNRRMKWKK、KKTWWKTWWTKWSQPKKKRKV或AGYLLGKINLKALAALAKKIL。在本专利技术的第二方面,提供了一种药物组合物,所述药物组合物包含本专利技术的次血红素6肽衍生物和可药用的载体。在本专利技术的第三方面,提供了本专利技术的次血红素6肽衍生物的制备方法,所述方法包括以下步骤:1)在固相载体上,按照Fmoc固相合成法从C端(羧基端)至N端(氨基端)顺序地偶联经Fmoc保护的CPP序列各个氨基酸以及Fmoc-His-OH、Fmoc-β-Ala-OH从而得到经保护的NH2-β-Ala-His-CPP-固相载体;2)偶联次血红素;3)脱除保护基团,同时将所得的Dh-β-AH-CPP从固相载体上切割下来,得到含有Dh-β-AH-CPP的溶液。优选地,其中所述CPP为GRKKRRQRRRPPQ、RRRRRRRR、KLALKLALKALKAALKLA、MVTVLFRRLRIRRACGPPRVRV、RQIKIWFQNRRMKWKK、KKTWWKTWWTKWSQPKKKRKV或AGYLLGKINLKALAALAKKIL。优选地,所述固相载体为Fmoc固相合成法中常用的载体。优选地,所述固相载体为Rink amide MBHA树脂。优选地,对3)中得到的含有Dh-β-AH-CPP的溶液进行纯化,纯化方法例如洗涤、重结晶及色谱法(例如HPLC)等。优选色谱法,更优
选HPLC。由于本专利技术的次血红素6肽衍生物(Dh-β-AH-CPP)具有抗坏血酸过氧化物酶活性,并且细胞透过性好,因此可以口服的方式作为抗坏血酸过氧化物酶用于疾病的治疗和/或预防。因此,本专利技术的第四方面提供了本专利技术的次血红素6肽衍生物在制备用于预防和/或治疗疾病或用于预防衰老的药剂中的用途,所述疾病可以使用抗坏血酸过氧化物酶或者具有抗坏血酸过氧化物酶活性的化合物治疗,具体而言,所述疾病可以选自糖尿病、白内障、心脑血管疾病、炎症,所述药剂特别适于口服给药。具体实施方式在本文中公开了一系列多肽的氨基酸序列,本领域技术人员能够理解的是,在以三字母的氨基酸残基或单个字母表示某一序列时,该序列从左至右表示的是该多肽从N端(氨基端)至C端(羧基端)的序列。例如当使用“Ala-His-Thr-Val-Glu-Lys”表示某一多肽的序列时,意为该多肽的序列为“N端-Ala-His-Thr-Val-Glu-Lys-C端”,而当使用“AHTVEK”表示某一多肽的序列时,意为该多肽的序列为“N端-AHTVEK-C端”。当没有具体标明氨基酸的构型时,其是指α-氨基酸。对本专利技术中所用英文及缩写及其含义说明如下:在本专利技术的一个实施方案中,提供了具有下式结构的次血红素6肽衍生物:Dh-β-AH-CPP,其中CPP代表细胞膜穿透肽,其为GRKKRRQRRRPPQ、RRRRRRRR、KLALKLALKALKAALKLA、MVTVLFRRLRIRRACGPPRVRV、RQIKIWFQNRRMKWKK、KKTWWKTWWTKWSQPKKKRKV或AGYLLGKINLKALAALAKKIL,所述CPP与Dh-β-AH通过共价键连接。上述次血红素6肽衍生物可以作为抗坏血酸过氧化物酶用于预防和/或治疗疾病或预防衰老,所述疾病是可以使用抗坏血酸过氧化物酶或者具有抗坏血酸过氧化物酶活性的化合物治疗的疾病,具体而言,所述疾病选自糖尿病、白内障、心脑血管疾病、炎症。本专利技术还提供了一种药物组合物,所述药物组合物中包括一种或多种本专利技术的次血红素6肽衍生物和一种或多种可药用的载体。“可药用的载体”是指在生物学上或其他方面不会具有不良作用的物质,即可以将所述物质与本专利技术的次血红素6肽衍生物一同给予受试者,同时不会引起任何不良的生物学影响或以有害的方式与含有它的药物组合物的任何其他组分相互作用。显然应当选择可使活性成分在受试者体内的任何降解降到最低以使任何不良副作用减到最小的载体,这是
本领域技术人员所熟知的。合适的载体包括但不限于:抗氧化剂、防腐剂、着色剂、调味剂和稀释剂、乳化剂、悬液剂、溶剂、填充剂、增量剂、缓冲剂、载体、冲淡剂、赋形剂和/或药用佐剂。在本专利技术的另一个实施方案中,提供了本专利技术的次血红素6肽衍生物的制备方法,所述方法包括以下步骤:1)在固相载体上,按照Fmoc固相合成方法从C端(羧基端)至N端(氨基端)顺序地偶联经Fmoc保护的CPP序列各个氨基酸以及Fmoc-His-OH、Fmoc-β-Ala-OH,从而得到经保护的NH2-β-Ala-His-CPP-固相载体;2)偶联次血红素;3)脱除保护基团,同时将Dh-β-AH-CPP从固相载体上切割下来,得到含有Dh-β-AH-CPP的溶液。优选地,其中所述CPP为GRKKRRQRRRPPQ、RRRRRRRR、KLALKLALKALKAALKLA、MVTVLFRRLRIRRACGPPRVRV、RQIKIWFQNRRMKWKK、KKTWWKTWWTKWSQPK本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种次血红素6肽衍生物,其具有Dh‑β‑AH‑CPP结构,其中CPP代表细胞膜穿透肽,所述Dh‑β‑AH与所述CPP是通过共价键偶联的。

【技术特征摘要】
1.一种次血红素6肽衍生物,其具有Dh-β-AH-CPP结构,其中CPP代表细胞膜穿透肽,所述Dh-β-AH与所述CPP是通过共价键偶联的。2.权利要求1的次血红素6肽衍生物,其中CPP为GRKKRRQRRRPPQ、RRRRRRRR、KLALKLALKALKAALKLA、MVTVLFRRLRIRRACGPPRVRV、RQIKIWFQNRRMKWKK、KKTWWKTWWTKWSQPKKKRKV或AGYLLGKINLKALAALAKKIL。3.一种药物组合物,其包括一种或多种权利要求1或2的次血红素6肽衍生物和可药用的载体。4.权利要求3的药物组合物,其中所述可药用的载体选自抗氧化剂、防腐剂、着色剂、调味剂、稀释剂、乳化剂、悬液剂、溶剂、填充剂、增量剂、缓冲剂、载体、冲淡剂、赋形剂和/或药用佐剂。5.一种制备权利要求1或2的次血红素6肽衍生物的方法,所述方法包括以下步骤:1)在固相载体上,按照Fmoc固相合成法从C端至N端顺序地偶联经保护的所述CPP中的各个氨基酸、Fmoc-His-OH和Fmoc-β-Ala-...

【专利技术属性】
技术研发人员:董庆光李惟陈妍
申请(专利权)人:长春百益制药有限责任公司
类型:发明
国别省市:吉林;22

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