一种用HPLC分离测定奥培米芬原料药有关物质的方法技术

本发明专利技术涉及一种用HPLC分离测定奥培米芬原料药有关物质的方法，包括如下步骤：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸调水pH至2.5～3.5为流动相A、甲醇‑乙腈为流动相B进行梯度洗脱，流速为0.8～1.2mL/min，柱温为32～37℃，采用紫外检测器对奥培米芬原料药的有关物质进行检测。本发明专利技术方法具有快速简便、灵敏度高、准确可靠的优点，适用于分离测定奥培米芬原料药的有关物质。本发明专利技术方法通过综合考虑分析柱、流动相、梯度洗脱程序以及流速、柱温对分离检测的综合影响，使得检测结果达到了最优化，具有快速简便、灵敏度高、准确可靠的优点，适用于分离测定奥培米芬原料药的有关物质。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种奥培米芬原料药的分析测定方法，具体涉及一种用HPLC分离测定奥培米芬原料药有关物质的方法。
技术介绍
奥培米芬是一种具有组织选择性作用的雌激素激动药和拮抗药。该药对雌激素受体α(ERα)和β(ERβ)的具有亲和性。其生物学作用是通过与雌激素受体结合介导。此种结合导致在某些组织中雌激素通路的激活(激动作用)和阻断其他雌激素通路(拮抗作用)，分子式为C24H23ClO2，分子量为378.9，结构式如下：为了控制奥培米芬原料药的质量，需要对主要成分和杂质进行控制，在现有的技术中，没有适合于快速、简便、精确分析检测奥培米芬原料药有关物质的分析方法。因此，对于奥培米芬原料药有关物质的测定方法存在进一步的改进和优化需求，这正是本专利技术得以完成的动力和出发点所在。
技术实现思路
为了克服现有技术存在的上述技术问题，本专利技术人在进行了大量的深入研究之后，从而提供了一种用HPLC分离测定奥培米芬原料药有关物质的方法，具有快速简便、灵敏度高、准确可靠的优点。本专利技术通过以下技术方案实现，具体而言，涉及一种用HPLC分离测定奥培米芬原料药有关物质的方法，包括如下步骤：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸调水pH至2.5～3.5为流动相A、甲醇-乙腈为流动相B进行梯度洗脱，流速为0.8～1.2mL/min，柱温为32～37℃，采用紫外检测器对奥培米芬原料药的有关物质进行检测。优选的，所述十八烷基硅烷键合硅胶的粒径为5μm，柱内径为4.6mm，柱长为250mm。优选的，以磷酸调水pH至3.0为流动相A。优选的，所述流动相B中，甲醇和乙腈的体积比为30∶70。优选的，在梯度洗脱时，流速为1.0mL/min，柱温为35℃。优选的，所述梯度洗脱的具体过程为：优选的，所述紫外检测器的检测波长为230nm。与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下：本专利技术方法通过综合考虑分析柱、流动相、梯度洗脱程序以及流速、柱温对分离检测的综合影响，使得检测结果达到了最优化，具有快速简便、灵敏度高、准确可靠的优点，适用于分离测定奥培米芬原料药的有关物质。附图说明图1是奥培米芬有关物质的液相谱图。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本专利技术，但不以任何形式限制本专利技术。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本专利技术的保护范围。一种用HPLC分离测定奥培米芬原料药有关物质的方法，包括如下步骤：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，十八烷基硅烷键合硅胶的粒径为5μm，柱内径为4.6mm，柱长为250mm，以磷酸调水pH至3.0为流动相A、体积比为30∶70的甲醇-乙腈为流动相，进行梯度洗脱，梯度洗脱程序见表1，流速为1.0mL/min，柱温为35℃，采用紫外检测器对奥培米芬原料药的有关物质进行检测，检测波长为230nm，奥培米芬原料药样品的液相谱图如图1所示，奥培米芬原料药样品的峰值如表2所示。表1梯度洗脱程序时间(分钟)流动相A(体积％)流动相B(体积％)050508505012356535257560109060.15050705050表2奥培米芬原料药的峰值表峰编号保留时间min高度mAu面积mAu*s面积％拖尾因子理论塔板数分离度A8.06515.95216.870.7450.9037519B8.67919.75274.910.9450.94987461.6C12.49818.32267.330.9190.969158989.9D14.11916.20210.390.7230.891276124.4E18.06016.64208.820.7180.9734517211.6F30.08620.11314.151.0791.0178392431.8主药31.1791681.7427109.7493.1471.048858372.6G32.07514.30239.600.8230.933857622.1H34.09015.39262.600.9021.030905174.5系统适用性试验：分别取奥培米芬及杂质A、B、C、D、E、F、G、H对照品适量，精密称定，置同一容量瓶中，加甲醇适量，超声使溶解并稀释制成每1mL中约含奥培米芬0.5mg、含各杂质约为5μg的混合溶液，各峰分离度应不小于1.5。具体试验操作：取本品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1mL中约含0.5mg的溶液作为供试品溶液，精密量取1mL，置100mL量瓶中，用溶剂稀释至刻度，作为对照溶液。取对照溶液20μL注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10％～20％。再精密量取供试品溶液和对照溶液各20μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.10倍(0.10％)，各杂质峰面积的和，不得大于对照溶液的主峰面积的1.0倍(1.0％)。(杂质C、杂质D、杂质E校正因子分别为0.74、0.80、0.80；其余已知杂质及未知杂质校正因子按1.0计算)。计算公式：总杂含量＝Σ已知杂质含量+Σ其他杂质含量A单：杂质峰面积 A对照：1％对照主峰面积 F：校正因子杂质名称相对保留时间校正因子(F)杂质A0.260.92杂质B0.281.06杂质C0.400.74杂质D0.450.80杂质E0.580.80杂质F0.961.00杂质G1.030.92杂质H1.091.04以上对本专利技术的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本专利技术并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变形或修改，这并不影响本专利技术的实质内容。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用HPLC分离测定奥培米芬原料药有关物质的方法，其特征在于，包括如下步骤：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸调水pH至2.5～3.5为流动相A、甲醇‑乙腈为流动相B进行梯度洗脱，流速为0.8～1.2mL/min，柱温为32～37℃，采用紫外检测器对奥培米芬原料药的有关物质进行检测。

【技术特征摘要】
1.一种用HPLC分离测定奥培米芬原料药有关物质的方法，其特征在于，包括如下步骤：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸调水pH至2.5～3.5为流动相A、甲醇-乙腈为流动相B进行梯度洗脱，流速为0.8～1.2mL/min，柱温为32～37℃，采用紫外检测器对奥培米芬原料药的有关物质进行检测。2.如权利要求1所述的用HPLC分离测定奥培米芬原料药有关物质的方法，其特征在于，所述十八烷基硅烷键合硅胶的粒径为5μm，柱内径为4.6mm，柱长为250mm。3.如权利要求1所述的用HPLC分离测定奥培米芬原料药有关物质的方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：葛德培，吴其华，刘涛，
申请(专利权)人：安徽联创生物医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽;34