一种美洲大蠊酶解物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种美洲大蠊酶解物及其制备方法和应用，所述的美洲大蠊酶解物中的肽类成分含量高，且能直接被吸收，无需经过胃肠的转化。所述的制备方法包括加入在超高压提取器中进行蛋白酶水解，离心，醇沉，大孔树脂吸附等步骤，本方法可以大大减少酶解时间，使酶解在短时间内得到所需要的小肽成分。本发明专利技术研究表明，所述的美洲大蠊酶解物还具有缩短创面修复时间、治疗消化道溃疡效果显著的有益效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药
，具体涉及一种美洲大蠊酶解物及其制备方法和应用。
技术介绍
美洲大蠊(Periplanetaamericana)为昆虫纲有翅亚纲蜚蠊目蜚蠊科大蠊属昆虫，俗称“蟑螂”，其入药始载于《神农本草经》，其中把它列为中品，谓“味：咸、寒；治：血瘀证坚寒热、破积聚、喉咽闭、内寒无子”。“蟑螂”为其俗名首见于《本草纲目拾遗》，也称其为石姜、滑虫；各地方有其不同的称法，如：偷油婆、茶婆子、灶蚂子等。蜚蠊科(Blattidae)是—个庞大的昆虫家族，在地球上已生存了3.2亿年，与恐龙属同—时代出现的生物。无疑它是世界上生命力最强、最古老、至今繁衍最成功的昆虫类群之一。近几年来随着我国对传统中医药资源研究开发的重视，有些学者对这一几千年来无法根绝的害虫进行了应用方面的研究，并取得了可喜的成就，发掘出了这一传统意义上的害虫的正面价值。以美洲大蠊醇提物纯化制成的产品“康复新液”，在烧伤、烫伤等外伤创面的良好疗效,同时具有抗炎、消肿、加速病损组织修复、提高免疫力，故可以内服用于治疗十二指肠溃疡，胃溃疡，肺结核。现代消化理论认为，蛋白质口服后不能被直接吸收进入血液，只有经过胃肠道转化成小分子肽才能被吸收，小分子肽主要指含2～15个氨基酸残基的肽，其相对分子质量在3000以下，具有可直接被消化道吸收、转运速度快、耗能低和不易饱和等特点。而美洲大蠊醇提取物中主要成分除了游离氨基酸外，还有蛋白质，多肽类等大分子物质，而蛋白质这一类大分子是不能被直接吸收进入血液的，而是需要口服后经过胃肠道的转化才能起到相应的作用。因此，需要得到一种新的美洲大蠊提取物，其包含的主要成分为可以直接被吸收进入血液的游离氨基酸、肽类等小分子物质。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种美洲大蠊酶解物。所述的美洲大蠊酶解物中肽类成分含量高，能够被直接吸收进入血液，快速的作用病患处。所述的美洲大蠊酶解物为一种新的美洲大蠊提取物。本专利技术的目的还在于提供所述美洲大蠊酶解物的制备方法。本专利技术所述的美洲大蠊酶解物的制备方法，它包括如下步骤：a、取美洲大蠊虫体，粉碎，加入原料药2～20倍的纯水，调解pH值后，加入蛋白酶；b、将上述含有蛋白酶的料液置于超高压提取器中，在压力为100～400MP，温度20～60℃条件下，酶解1～3次，每次20～60min，过滤，滤液离心，取上清液浓缩后加入无水乙醇至药液中乙醇的体积浓度为60％～90％，静置，滤过；c、取步骤b得到的滤液，通过吸附树脂柱，纯水冲洗，收集流出液至流出液茚三酮反应呈阴性；然后流出液再通过聚酰胺柱，纯水冲洗，并收集流出液至流出液茚三酮反应呈阴性；d、将步骤c所得的流出液进行浓缩干燥，即得美洲大蠊酶解物。其中，步骤a所述的美洲大蠊为脱脂后的美洲大蠊。其中，步骤a中所述的纯水为原料药的10～20倍。其中，步骤a中所述的蛋白酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶中一种或者一种以上的组合，其中蛋白酶加入量为原料药的1％～10％。其中，步骤b所述的超高压压力为100～300Mpa，时间为40～60min。其中，步骤b所述离心的时间为15～60分钟，速率为10000转/分～28000转/分。其中，步骤b所述静置温度为0～10℃，静置时间为12～48小时。其中，步骤c所述吸附树脂柱为极性、弱极性和非极性大孔树脂。其中，步骤c所述聚酰胺柱中聚酰胺的粒度为100～200目。本专利技术的目的还在于提供所述美洲大蠊酶解物在消化道溃疡、创面修复中的应用。进一步地，所述消化道溃疡为胃溃疡。进一步地，所述创面为烧烫伤创面。本专利技术所述的美洲大蠊酶解物中肽类成分的重量百分比能达到55％以上，色泽浅，无腥臭味，且具有缩短创面愈合时间，无毒副作用，治疗溃疡效果好，保护胃粘膜不受损伤等优点。本专利技术制备方法可以缩短酶解的时间，避免酶的失活，酶解出的产物随时间会有很多变化，短时间的高压下即不会影响酶的活性，也能使产物更加稳定，并且获得的肽类成分更多。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。具体实施例实施例1本专利技术所述的美洲大蠊酶解物的制备方法称取用石油醚(沸程：30～60℃)脱脂后的美洲大蠊干虫5kg，挥尽石油醚后粉碎成粉末，加入50L的纯水，用10％的氢氧化钠调节pH值为7.8，加入药材重量4％的弹性蛋白酶后，将混合有弹性蛋白酶的料液置于超高压提取器中，调节压力为150Mpa，温度为20℃进行酶解2次，每次时间为30min，将酶解后的料液进行过滤，滤液在28000转速下离心15分钟，上清液浓缩至相对密度为60℃时的1.20，加入无水乙醇至溶液中乙醇体积浓度达60％，在10℃静置12小时，过滤；滤液回收乙醇，加水至15升，过滤；滤液通过型号为HPD300的大孔吸附树脂柱，用纯水冲洗树脂柱，收集流出液直至流出液茚三酮反应呈阴性，流出液再通过粒度为100目的聚酰胺柱，用纯水冲洗聚酰胺柱，收集流出液直至流出液茚三酮反应呈阴性，60℃减压浓缩、干燥、粉碎，得0.94kg浅黄色粉末，即为美洲大蠊酶解物。采用凯氏定氮法结合氨基酸分析仪，最终测得上述美洲大蠊酶解物中肽类成分含量占67.0％(重量百分比)。实施例2本专利技术所述的美洲大蠊酶解物的制备方法称取用石油醚(沸程：30～60℃)脱脂后的美洲大蠊干虫10kg，挥尽石油醚后粉碎成粉末，加入80L的纯水，用10％的氢氧化钠调节pH值为7.5，加入药材重量5％的中性蛋白酶，混匀，将混合有中性蛋白酶的料液置于超高压提取器中，调节压力为400Mpa，温度为60℃进行酶解1次，每次时间为20min，将酶解后的料液进行过滤，滤液在11000转速下离心60分钟，上清液浓缩至相对密度为55℃时的1.10，加入无水乙醇至溶液中乙醇体积浓度达80％，在5℃静置18小时，过滤；滤液回收乙醇，加水至10升，过滤；滤液通过型号AB-8的大孔吸附树脂柱，用纯水冲洗树脂柱，收集流出液直至流出液茚三酮反应呈阴性，流出液再通过粒度为100目的聚酰胺柱，用纯水冲洗聚酰胺柱，收集流出液直至流出液茚三酮反应呈阴性，65℃减压浓缩、干燥、粉碎，得2.04kg浅黄色粉末，即为美洲大蠊酶解物。采用凯氏定氮法结合氨基酸分析仪，最终测得上述美洲大蠊酶解物中肽类成分含量占63.6％(重量百分比)。实施例3本专利技术所述的美洲大蠊酶解物称取用丙酮脱脂后的美洲大蠊干虫5kg，挥尽丙酮后粉碎成粉末，加入60L的纯水，用10％HCL溶液调节pH值为1.0，加入药材重量1％的胃蛋白酶，混匀，将混合有胃蛋白酶的料液置于超高压提取器中，调节压力为200Mpa，温度为40℃
进行酶解3次，每次时间为20min，将酶解后的料液进行过滤，滤液在10000转速下离心60分钟，上清液浓缩至相对密度为60℃时的1.15，加入无水乙醇至溶液中乙醇体积浓度达70％，在5℃静置12小时，过滤；滤液回收乙醇，加水至10升，过滤；滤液通过型号为D101的大孔吸附树脂柱，用纯水冲洗树脂柱，收集流出液直至流出液茚三酮反应呈阴性，流出液再通过粒度为200目的聚酰胺柱，用纯水冲洗聚酰胺柱，收集流出液直至流出液本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种美洲大蠊酶解物，其特征在于，它是由蛋白酶和超高压联合处理美洲大蠊虫体后得到的。

【技术特征摘要】
1.一种美洲大蠊酶解物，其特征在于，它是由蛋白酶和超高压联合处理美洲大蠊虫体后得到的。2.根据权利要求1所述的美洲大蠊酶解物，其特征在于，所述的蛋白酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶中一种或者一种以上的组合。3.权利要求1-2中所述的一种美洲大蠊酶解物的制备方法，其特征在于，它包括如下步骤：a、取脱脂后的美洲大蠊虫体，粉碎，加入原料药2～20倍的纯水，调解pH值后，加入原料药重量的1%～10%的蛋白酶；b、将上述含有蛋白酶的料液置于超高压提取器中，在压力为100～400MP，温度20～60℃条件下，酶解1～3次，每次20～60min，过滤，滤液离心，取上清液浓缩后加入无水乙醇至药液中乙醇的体积浓度为60%～90%，在0～10℃环境中静置12～48小时，滤过；c、取步骤b得到的滤液，通过吸附树脂柱，纯水冲洗，收集流出液至流出液茚三酮反应呈阴性；然后流出液再通过粒度为100...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈光健，
申请(专利权)人：陈光健，
类型：发明
国别省市：四川;51