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一种美洲大蠊酶解物及其制备方法和应用技术

技术编号:13586656 阅读:95 留言:0更新日期:2016-08-24 19:55
本发明专利技术公开了一种美洲大蠊酶解物及其制备方法和应用,所述的美洲大蠊酶解物中的肽类物质含量高、无毒、色泽浅等优点。所述的制备方法包括加入蛋白酶水解,除油脂,离心,醇沉,大孔树脂吸附等步骤,本发明专利技术研究表明,所述的美洲大蠊酶解物还具有缩短创面修复时间、治疗消化道溃疡的效果显著的有益效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药
,具体涉及一种美洲大蠊酶解物及其制备方法和应用
技术介绍
美洲大蠊(Periplanetaamericana)为昆虫纲有翅亚纲蜚蠊目蜚蠊科大蠊属昆虫,俗称“蟑螂”,其入药始载于《神农本草经》,其中把它列为中品,谓“味:咸、寒;治:血瘀证坚寒热、破积聚、喉咽闭、内寒无子”。“蟑螂”为其俗名首见于《本草纲目拾遗》,也称其为石姜、滑虫;各地方有其不同的称法,如:偷油婆、茶婆子、灶蚂子等。蜚蠊科(Blattidae)是—个庞大的昆虫家族,在地球上已生存了3.2亿年,与恐龙属同—时代出现的生物。无疑它是世界上生命力最强、最古老、至今繁衍最成功的昆虫类群之一。近几年来随着我国对传统中医药资源研究开发的重视,有些学者对这一几千年来无法根绝的害虫进行了应用方面的研究,并取得了可喜的成就,发掘出了这一传统意义上的害虫的正面价值。以美洲大蠊醇提物纯化制成的产品“康复新液”,在烧伤、烫伤等外伤创面的良好疗效,同时具有抗炎、消肿、加速病损组织修复、提高免疫力,故可以内服用于治疗十二指肠溃疡,胃溃疡,肺结核。现代消化理论认为,蛋白质口服后不能被直接吸收进入血液,只有经过胃肠道转化成小分子肽才能被吸收,小分子肽主要指含2~15个氨基酸残基的肽,其相对分子质量在3000以下,具有可直接被消化道吸收、转运速度快、耗能低和不易饱和等特点。而美洲大蠊醇提取物中主要成分除了游离氨基酸外,还有蛋白质,多肽类等大分子物质,而蛋白质这一类大分子是不能被直接吸收进入血液的,而是需要口服后经过胃肠道的转化才能起到相应的作用。因此,需要得到一种新的美洲大蠊提取物,其包含的主要成分为可以直接被吸收进入血液的游离氨基酸、肽类等小分子物质。
技术实现思路
针对上述技术问题,本专利技术提供了一种美洲大蠊酶解物。所述的美洲大蠊酶解物中肽类成分含量高,能够被直接吸收进入血液,快速的作用病患处。所述的美洲大蠊酶解物为一种新的美洲大蠊提取物。本专利技术的目的还在于提供所述美洲大蠊酶解物的制备方法。本专利技术所述的美洲大蠊酶解物的制备方法,它包括如下步骤:(1)取美洲大蠊干虫或鲜虫,粉碎后加入2~20倍原料药重量的纯水,混
匀料液,调解pH值;(2)向步骤(1)中所述的料液中加入原料药重量的1%~10%的蛋白酶,水解后,过滤,冷藏去油脂后离心;将离心后的上清液浓缩,向浓缩液中加入乙醇至所得溶液中乙醇体积浓度为60%~90%,静置,过滤,滤液回收乙醇,得回收乙醇后的滤液;(3)取步骤(2)中得到的回收乙醇后的滤液,通过吸附树脂柱,纯水冲洗,收集流出液至流出液茚三酮反应呈阴性;然后流出液再通过聚酰胺柱,纯水冲洗,并收集流出液至流出液茚三酮反应呈阴性;(4)将步骤(3)中得到的最终流出液浓缩、干燥,即得美洲大蠊酶解物。其中,步骤(1)中所述的纯水为原料药的10~20倍。其中,步骤(2)中所述的蛋白酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶中一种或者一种以上的组合,其中蛋白酶加入量为原料药的3%~10%。其中,步骤(2)所述的水解温度为20~60℃。其中,步骤(2)所述的水解时间为1~8小时,优选的为3.5~8小时。其中,步骤(2)所述离心的时间为15~60分钟,速率为10000转/分~28000转/分。其中,步骤(2)所述加入乙醇的体积浓度为90%~96%。其中,步骤(2)所述静置温度为0~10℃,静置时间为12~24小时。其中,步骤(3)所述吸附树脂柱为极性、弱极性和非极性大孔树脂。其中,步骤(3)所述聚酰胺柱中聚酰胺的粒度为100~200目。本专利技术的目的还在于提供所述美洲大蠊酶解物在消化道溃疡、创面修复中的应用。进一步地,所述消化道溃疡为胃溃疡。进一步地,所述创面为烧烫伤创面。本专利技术所述的美洲大蠊酶解物中肽类成分的重量百分比能达到50%以上,且具有缩短创面愈合时间,无毒副作用,治疗溃疡效果好等优点。通过本专利技术提供的制备方法能够将美洲大蠊中的大分子蛋白质在提取过程中直接水解为能被吸收进入血液的小分子肽,氨基酸等有效的小分子物质,制备出的美洲大蠊酶解物具有色泽浅、腥臭味淡、患者顺应性高,药效高且快速的优点。利用本专利技术所述的制备方法提高了美洲大蠊提取物的产品品质,制备的药物能够更易被病患接受,且药效更好,克服了现有美洲大蠊提取物色泽深、腥臭味重以及口服后需要经过胃肠道转化才能被有效吸收的缺陷。显然,根据本专利技术的上述内容,按照本领域的普通技术知识和惯用手段,在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下,还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式,对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。具体实施方式实施例1 本专利技术美洲大蠊酶解物的制备方法称取10kg美洲大蠊鲜虫鲜料,用高速组织捣碎机处理成匀浆状,再加入100升水,混匀,用10%的氢氧化钠调节pH值为7.8,加入药材重量4%的弹性蛋白酶,混匀,在20℃的温度下保持8小时,放入冷藏室冷藏16小时,用滤纸去除上层油脂后,在28000转速下离心15分钟;上清液浓缩至相对密度为60℃时的1.20,加入体积浓度为94%的乙醇至溶液中乙醇体积浓度达60%,在10℃静置12小时,过滤;滤液回收乙醇,加水至15升,过滤;滤液通过型号为HPD300的大孔吸附树脂柱,用纯水冲洗树脂柱,收集流出液直至流出液茚三酮反应呈阴性,流出液再通过粒度为100目的聚酰胺柱,用纯水冲洗聚酰胺柱,收集流出液直至流出液茚三酮反应呈阴性,60℃减压浓缩、干燥、粉碎,得0.71kg浅黄色粉末,即为美洲大蠊酶解物。采用凯氏定氮法结合氨基酸分析仪,最终测得上述美洲大蠊酶解物中肽类成分含量占61.7%(重量百分比)。实施例2 本专利技术美洲大蠊酶解物的制备方法称取美洲大蠊干虫5kg,粉碎成粉末,加100升纯水,混匀,用10%的氢氧化钠调节pH值为8.0,加入药材重量3%的胰蛋白酶,混匀,在45℃的温度下保持3.5小时,放入冷藏室冷藏20小时,用滤纸去除上层油脂后,在15000转速下离心50分钟;上清液浓缩至相对密度为60℃时的1.15,加入体积浓度为95%乙醇至溶液中乙醇体积浓度达75%,在20℃静置24小时,过滤;滤液回收乙醇,加水至10升,过滤;滤液通过型号为HPD400的大孔吸附树脂柱,用纯水冲洗树脂柱,收集流出液直至流出液茚三酮反应呈阴性,流出液再通过粒度为100目的聚酰胺柱,用纯水冲洗聚酰胺柱,收集流出液直至流出液茚三酮反应呈阴性,75℃减压浓缩、干燥、粉碎,得1.05kg浅黄色色粉末,即为美洲大蠊酶解物。采用凯氏定氮法结合氨基酸分析仪,最终测得上述美洲大蠊酶解物中肽类成分含量占58.1%(重量百分比)。实施例3 本专利技术美洲大蠊酶解物的制备方法称取美洲大蠊干虫5kg,粉碎成粉末,再加入70升水,混匀,用10%的氢氧化钠调节pH值为9.0,加入药材重量10%的胰凝乳蛋白酶,混匀,在40℃的温度下保持5小时,放入冷藏室冷藏24小时,用滤纸去除上层油脂后,在18000转速下离心50分钟;上清液浓缩至相对密度为60℃时的1.10,加入体积浓度为92%的乙醇至溶液中乙醇体积浓度达75%,在本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种美洲大蠊酶解物,其特征在于,它是由蛋白酶处理美洲大蠊虫体后得到的。

【技术特征摘要】
1.一种美洲大蠊酶解物,其特征在于,它是由蛋白酶处理美洲大蠊虫体后得到的。2.根据权利要求1所述的美洲大蠊酶解物,其特征在于,所述的蛋白酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶中一种或者一种以上的组合。3.权利要求1-2中所述的一种美洲大蠊酶解物的制备方法,其特征在于,它包括如下步骤:(1)取美洲大蠊干虫或鲜虫,粉碎后加入2~20倍原料药重量的纯水,混匀料液,调解pH值;(2)向步骤(1)中所述的料液中加入原料药重量的1%~10%的蛋白酶,在20~60℃温度下水解后,过滤,冷藏去油脂后离心;将离心后的上清液浓缩,向浓缩液中加入乙醇至所得溶液中乙醇体积浓度为60%~90%,在0~10℃,静置12~24小时后,过滤,滤液回收乙醇,得回收乙醇后的滤液;(3)取步骤(2)中得到的回收乙醇后的滤液,通过吸附树脂柱,纯水冲洗,收集流出液至流出液茚三酮反应呈阴性;然后流出液再通过粒度为100~200目的聚酰胺柱,纯水冲洗,并收集流出液至流出液茚三酮反应呈阴性;(4...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈光健
申请(专利权)人:陈光健
类型:发明
国别省市:四川;51

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