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一种罂粟碱人工抗原的合成方法技术

技术编号:13550287 阅读:83 留言:0更新日期:2016-08-18 16:17
一种罂粟碱人工抗原的合成方法,属于生物化工技术领域。本发明专利技术以罂粟碱与溴、碘化亚铜、氨水反应得到具有氨基的产物为半抗原,用重氮法将半抗原与载体蛋白偶联,用紫外法测定偶联物的偶联比。本发明专利技术成功合成了罂粟碱人工抗原,合成步骤简洁,有效,完全可用于免疫分析中,为以后人们的研究提供了必需的人工抗原。

【技术实现步骤摘要】
201610372103

【技术保护点】
一种罂粟碱人工抗原的合成方法,其特征在于其由罂粟碱与溴、碘化亚铜、氨水反应得到具有氨基的产物,即半抗原PAPAM,用重氮法将半抗原PAPAM与载体蛋白偶联,即得到罂粟碱人工抗原;步骤为:(1)半抗原PAPAM的合成:合成路线如下:称取罂粟碱原药Ⅰ 1 g,即2.95 mmol溶解于醋酸与水体积比1:1混合的溶液10 mL中,取溴0.4mL用醋酸4mL稀释后滴加入上述溶液,室温下搅拌3.5h;加入30mL水,用二氯甲烷30mL分三次进行萃取,得到有机层;所得有机层用饱和Na2S2O3及质量浓度为10%的NaHCO3水溶液进行洗涤并干燥;得到化合物Ⅱ 1.1g;称取化合物Ⅱ 600mg,即1.43mmol,碘化亚铜50mg,铜100mg,即1.78mmol混悬于氨水10mL中,在50mL密封管中140℃搅拌过夜;反应体系为水溶液体系,用乙酸乙酯萃取;用盐水洗涤有机层,经硫酸钠干燥并浓缩,得到粗产物;将粗产物通过制备型HPLC纯化,得到化合物Ⅲ 250mg,即为半抗原PAPAM;(2)完全抗原的制备:步骤(1)制备的半抗原PAPAM,与KLH偶联得到偶联物完全抗原PAPAM‑KLH;或与BSA偶联得到偶联物完全抗原PAPAM‑BSA;或与OVA偶联得到偶联物完全抗原PAPAM‑OVA。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:吴晓玲姚蕾珺胥传来匡华徐丽广马伟刘丽强宋珊珊胡拥明
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:江苏;32

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