一种桑椹及其制品中绿原酸的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种桑椹及其制品中绿原酸的检测方法，其步骤为：将待测桑椹样品进行预处理后，采用高效液相色谱法进行检测；其中，所述预处理的方法为，将待测桑椹样品配成水溶液，再对所述水溶液进行加热回流提取或超声处理；所述高效液相色谱的检测条件为，采用C18色谱柱，流动相为乙腈和0.2～0.4％磷酸水溶液的混合液，二者的体积比为10～20:80～90。本发明专利技术所述的方法可准确的测定桑椹中绿原酸的含量，为以桑椹为原料生产桑椹颗粒药物提供含量检测方法学指导。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及活性物质检测领域，具体涉及一种桑椹及其制品中绿原酸的检测方法。
技术介绍
桑椹，桑树的成熟果实，桑椹又叫桑果、桑泡儿，桑椹的成熟鲜果味甜汁多，是人们常食的水果之一。在药效方面，桑椹性味甘寒，具有补肝益肾、生津润燥、乌专利技术目等功效。桑果古来就是百姓常采用的一种利尿，保健，消暑的鲜果，在本草纲目中有记载其特殊功效。在现代中药学中，桑椹通常加工成桑椹颗粒。绿原酸是一种重要的生物活性物质，具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用。桑椹中含有少量的绿原酸，但桑椹的产地较多，不同产地中绿原酸的含量相差较大，这就导致最终的桑椹颗粒中的绿原酸含量差异也较大，这势必会导致桑椹颗粒的药效不稳定，因此有必要研究一种桑椹及其制品中绿原酸的检测方法，为桑椹颗粒的生产及其质量检测提供指导。
技术实现思路
(一)要解决的技术问题针对现有技术中没有专门针对桑椹及其制品中的绿原酸的检测方法的缺陷，本专利技术提供一种利用高效液相色谱法检测桑椹及其制品中绿原酸的方法。(二)技术方案本专利技术所述的方法，其步骤为，将待测桑椹样品进行预处理后，采用高效液相色谱法进行检测；其中，所述预处理的方法为，将待测桑椹样品溶于水，再对其进行加热回流或超声处理；所述高效液相色谱的检测条件为，采用C18色谱柱，流动相为乙腈和0.2～0.4％磷酸水溶液的混合液，二者的体积比为10～20:80～90。本专利技术所述的方法，所述水溶液中待测桑椹样品的浓度，按桑椹干粉计，与水的质量体积比为1～5：100；所述桑椹干粉中水分的含量为15～18％；若待测样品为新鲜的桑椹，可将其干燥到上述含水量后进行测试。本专利技术所述的方法，若待测样品为桑椹干粉，对其进行加热回流，加热回流的时间为1～3h；回流1～2次。本专利技术所述的方法，所述水溶液中待测桑椹样品的质量浓度，按桑椹颗粒计，与水的质量体积比为0.5～1.5:100；对其进行超声处理，所述超声处理的时间为10～15min，功率280～350W，频率40～50kHz；本专利技术中所述的桑椹样品与水的质量体积比的单位g/mL或kg/L等与g/mL相对应的单位；所述桑椹颗粒的制备方法为将桑椹鲜果加水煎煮二次，每次2～3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成稠膏，加辅料适量，混匀，制成颗粒，干燥，即得。本专利技术所述的方法，待测桑椹样品的粒度为20～80目。本专利技术所述的方法，理论塔板数以绿原酸峰计算不低于4000。优选的，所述C18色谱柱的规格为250×4.6mm，5μm。本专利技术所述的C18色谱柱优选KromasilC18色谱柱。本专利技术所述的方法，检测器检测波长为327nm，流动相的流速为0.7～0.9ml/min，柱温为室温，进样量为5～10μl。本专利技术所述的方法，检测之前制备绿原酸浓度与峰面积的标准曲线，所述标准曲线的线性范围为1.300～312.000μg/mL。优选的，本专利技术所述的方法包括如下步骤：1)确定检测条件：色谱柱：C18色谱柱250×4.6mm，5μm，流动相：体积比为10～20：80～90的乙腈和0.3％磷酸水溶液的混合液，检测波长：327nm，流速：0.7～0.9ml/min，柱温：室温，进样量：10μl，理论塔板数以绿原酸峰计算不低于4000；2)标准曲线的绘制：绘制线性范围为1.300～312.000μg/mL的绿原酸标准曲线；3)样品的检测：取含水量为15～18％，粒度为20～40的桑椹干粉，配成质量浓度为1.5～2.5％的水溶液，加热回流提取1.0～2h，取滤液作为供试品溶液；或取粒度为60～80的桑椹颗粒，将其配成质量浓度为0.8％～1.5％的水溶液，在功率280～350W，频率40～50kHz的条件下超声处理10～15min，取滤液作为供试品溶液；4)将上述两种供试品溶液按照步骤1)所述的方法进行检测。(三)有益效果本专利技术所述的方法具有如下有益效果：1)本专利技术采用水提法提取桑椹中的绿原酸，该工艺稳定可靠、绿色环保，提取得率较高。3)本专利技术所述的在预处理过程中，合理限定了待测桑椹样品与水的相对用量，可对桑椹中的绿原酸进行最大限定的提取。2)采用本专利技术所述的检测条件进行检测，方法可靠、灵敏、准确、重复性好、专属性强，可有效控制桑椹颗粒的质量。具体实施方式以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。以下实施例中用到如下的仪器和药品：日本岛津LC-20AD高效液相色谱仪附双泵，SPD-M20A二极管阵列检测器，SIL-20ACHT自动进样器，LClabsolution软件，CTO-20A柱温箱，日本岛津公司；KromasilC18色谱柱(250×4.6mm，5μm，瑞士Kromasil公司)；1/10万电子分析天平(R200D型德国Sartorius公司)；台式天平(goldJewelleryscale，德国Sartorius公司)；电热套，1000ml(上海科析实验仪器厂)。超纯水，由美国Millipore纯水系统制备。乙腈，色谱级，美国Honeywell公司；磷酸，AR级，天津市富宇精细化工有限公司；绿原酸(批号110753-201415)对照品，购自中国食品药品检定研究院；桑椹干粉：江苏产地(批号20140528)由陕西君碧莎制药有限公司提供；桑椹颗粒：四川产地(批号20140627)由陕西君碧莎制药有限公司提供。实施例1本实施例涉及一种桑椹干粉中绿原酸的检测方法，包括如下步骤：1)确定检测条件：色谱柱：KromasilC18色谱柱(250×4.6mm，5μm瑞士Kromasil公司)，流动相：乙腈-0.3％磷酸水溶液(15:85)，检测波长：327nm，流速：0.8ml/min，柱温：室温，进样量：10μl，理论塔板数不低于4000；2)标准曲线的绘制A、精密称取13.0mg绿原酸对照品于10ml量瓶中加水至刻度，得浓度为1.30mg/ml对照品溶液，作为储备液备用。B、分别精密量取储备液0.005，0.030，0.045，0.500，0.700，1.200ml各置于5ml量瓶中，加水溶解并定容至刻度，分别得到浓度为1.300、7.800、11.700、130.000、182.000，312.0000μg/ml的对照...

【技术保护点】
一种桑椹及其制品中绿原酸的检测方法，其特征在于，将待测桑椹样品进行预处理后，采用高效液相色谱法进行检测；其中，所述预处理的方法为，将待测桑椹样品溶于水，再对其进行加热回流或超声处理；所述高效液相色谱的检测条件为，采用C18色谱柱，流动相为乙腈和0.2～0.4％磷酸水溶液的混合液，二者的体积比为10～20:80～90。

【技术特征摘要】
1.一种桑椹及其制品中绿原酸的检测方法，其特征在于，将待
测桑椹样品进行预处理后，采用高效液相色谱法进行检测；
其中，所述预处理的方法为，将待测桑椹样品溶于水，再对其进
行加热回流或超声处理；
所述高效液相色谱的检测条件为，采用C18色谱柱，流动相为乙
腈和0.2～0.4％磷酸水溶液的混合液，二者的体积比为10～20:80～90。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述水溶液中待测
桑椹样品的浓度，按桑椹干粉计，与水的质量体积比为1～5：100；所
述桑椹干粉中水分的含量为15～18％。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述加热回流
的时间为1～3h。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述水溶液中待测
桑椹样品的质量浓度，按桑椹颗粒的计，与水的质量体积比为0.5～1.5：
100；所述超声处理的时间为10～15min，功率280～350W，频率
40～50kHz。
5.根据权利要求1或2或4所述的方法，其特征在于，所述待测桑
椹样品的粒度为20～80目。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，理论塔板数以绿原
酸峰计算不低于4000。
7.根据权利要求1或6所述的检测方法，其特征在于，所述C18
色谱柱的规格为250×4.6mm，5μm。
8.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：王四旺，肖会敏，刘洋，史志辉，史萌，
申请(专利权)人：陕西君碧莎制药有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西;61