一种检测赭曲霉毒素A的方法及试剂盒技术

本发明专利技术涉及一种检测赭曲霉毒素的方法及试剂盒，所述方法包括：(A)使抗赭曲霉毒素A核酸适体(Apt)和可与抗赭曲霉毒素A核酸适体杂交的单链信号探针DNA(Sp)杂交，形成杂交链；(B)使该杂交链与待测样品接触，当待测样品中有赭曲霉毒素A存在时，杂交链与赭曲霉毒素A反应释放出单链信号探针DNA；C)利用DNA扩增使杂交链成双链DNA，用外切酶，将双链DNA切成碎片，留下单链信号探针DNA；(D)在银离子还原检测体系中检测体系的荧光强度，测定真菌毒素赭曲霉毒素A的含量。根据本发明专利技术的检测方法和试剂盒，可以消除干扰，提了高抗赭曲霉毒素A的检测灵敏度和精度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属纳米生物传感以及生物检测
，涉及一种检测赭曲霉毒素A的方法及试剂盒。
技术介绍
赭曲霉毒素包括7种结构类似的化合物，结构通式：R1＝Cl或H；R2＝H、CH3或C2H5。其中赭曲霉毒素A(R1＝C1，R2＝H)毒性最大，在霉变谷物、饲料等最常见。赭曲霉毒素A是一种无色结晶化合物。可溶于极性有机溶剂和稀碳酸氢钠溶液。微溶于水。其苯溶剂化物熔点94～96℃，二甲苯中结晶熔点169℃。有光学活性[α]D-118°。其紫外吸收光谱随pH值和溶剂极性不同而有别，在乙醇溶液中最大吸收波长为213nm和332nm。有很高的化学稳定性和热稳定性。赭曲霉毒素A是由多种生长在粮食(小麦、玉米、大麦、燕麦、黑麦、大米和黍类等)、花生、蔬菜(豆类)等农作物上的曲霉和青霉产生的。动物摄入了霉变的饲料后，这种毒素也可能出现在猪和母鸡等的肉中。赭曲霉毒素主要侵害动物肝脏与肾脏。这种毒素主要是引起肾脏损伤，大量的毒素也可能引起动物的肠黏膜炎症和坏死。还在动物试验中观察到它的致畸作用。因本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测赭曲霉毒素A的方法，所述方法包括：(A)使抗赭曲霉毒素A核酸适体(Apt)和可与抗赭曲霉毒素A核酸适体杂交的单链信号探针DNA(Sp)杂交，形成杂交链；(B)使该杂交链与待测样品作用，当待测样品中有赭曲霉毒素A存在时，杂交链选择性地与赭曲霉毒素A反应释放出单链信号探针DNA；(C)为了消除杂交链的干扰，利用DNA扩增使杂交链成双链DNA，用外切酶，将双链DNA切成碎片；(D)利用银离子在抗赭曲霉毒素A核酸适体‑赭曲霉毒素A的结合体中不能还原生成荧光发射峰在650nm左右的银纳米簇，银离子只能在单链信号探针DNA中还原并生成被Sp修饰的荧光发射峰在650nm左右的银纳米簇的原理，在银离子...

【技术特征摘要】
1.一种检测赭曲霉毒素A的方法，所述方法包括：
(A)使抗赭曲霉毒素A核酸适体(Apt)和可与抗赭曲霉毒素A核酸适体杂交的单链
信号探针DNA(Sp)杂交，形成杂交链；
(B)使该杂交链与待测样品作用，当待测样品中有赭曲霉毒素A存在时，杂交链选择
性地与赭曲霉毒素A反应释放出单链信号探针DNA；
(C)为了消除杂交链的干扰，利用DNA扩增使杂交链成双链DNA，用外切酶，将双
链DNA切成碎片；
(D)利用银离子在抗赭曲霉毒素A核酸适体-赭曲霉毒素A的结合体中不能还原生成
荧光发射峰在650nm左右的银纳米簇，银离子只能在单链信号探针DNA中还原并生成被Sp
修饰的荧光发射峰在650nm左右的银纳米簇的原理，在银离子还原检测体系中检测体系荧
光强度，测定真菌毒素赭曲霉毒素A的含量。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述抗赭曲霉毒素A核酸适体为
GATCGGGTGTGGGTGGCGTAAAGGGAGCATCGGACAC。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述单链信号探针DNA(Sp)为
...

【专利技术属性】
技术研发人员：易守军，冉海宁，林雨欢，曾云龙，邓克勤，唐春然，
申请(专利权)人：湖南科技大学，
类型：发明
国别省市：湖南;43