一种冻干人凝血因子VIII的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种从冷沉淀中制备冻干人凝血因子VIII的方法，包括如下步骤：(1)冷沉淀的溶解与压滤；(2)S/D病毒灭活；(3)DEAE SephadexA-50凝胶去除维生素K依赖的凝血因子；(4)阴离子交换树脂柱层析纯化FVIII;(5)超滤透析并浓缩洗脱液；(6)浓缩液中加入稳定剂并调节FVIII的效价及PH值；(7)纳米膜除病毒过滤；(8)除菌过滤及分装；(9)冻干；(10)干热病毒灭活。本发明专利技术制备工艺采用DEAE SephadexA-50凝胶吸附去除维生素K依赖的凝血因子，代替传统的氢氧化铝及PEG沉淀方式，具有生产稳定、得率高、质量好的优点；采用三步病毒灭除措施使产品的安全性大大提高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物制药领域，设及一种血液制品的制备方法，具体是设及一种冻干 人凝血因子VIII的制备方法。
技术介绍
人凝血因子VIIUFVIII)是人体中最重要的凝血因子之一，在肝脏中合成，有 2332个氨基酸残基，由两条肤链所组成，重链分子量为90-200kDa;轻链分子量为SOkDa， 二条肤链间由Ca2+连接。在人体内的半衰期8-12小时，血浆中的含量仅为0.05 -0.Img/ L。 FVIII缺乏会导致甲型血友病发生，该病是一种遗传性疾病，患者多为男性，发病 率约1/ 10000-1 /5000，根据血友病的发病率估算，世界血友病患者约40万人，中国血友 病患者人数约为10万人左右。目前登记在册的约1万余人，仅占一成左右。患者出血部 位集中于关节、肌肉和内脏。其中，关节反复出血导致骨骼变形，肌肉萎缩；而内脏和烦内出 血则会危及生命。甲型血友病因属遗传性疾病，目前尚无根治的方法，只能通过输注FVIII 制剂进行替代性治疗，但只要定期输注FVIII制剂，甲型血友病患者完全可W像正常人一 样生活，不会影响工作学习。 目前，国内血制品公司供应市场的FVIII产品数量本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种冻干人凝血因子VIII的制备方法，其特征在于包括如下步骤： ( 1 )冷沉淀溶解并过滤按1：5‑20 的重量比，将冷沉淀投入预先配制的溶解缓冲液中，温度控制在15‑30℃ ，搅拌2‑4小时，使其充分溶解；然后用颇尔公司生产的Supradur 50P 滤板串联0.45µm 滤芯过滤，收集澄清滤液，过滤前用溶解缓冲液预洗滤板及滤芯； ( 2 ) DEAE Sephadex A‑50 凝胶吸附以上滤液中加入预先用热的注射用水溶胀并用平衡缓冲液A平衡的DEAE Sephadex A‑50 凝胶，缓慢搅拌0.5‑1.5小时，后静置5‑30 分钟；然后用滤布过滤，收集滤液； ( 3 ) S/D 病毒灭...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李春洲，
申请(专利权)人：上海洲跃生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31