一种含有脂肪干细胞的凝胶制剂及其制备方法和医用敷料技术

技术编号:12625382 阅读:57 留言:0更新日期:2015-12-31 18:54
本发明专利技术属于生物材料领域,尤其涉及一种含有脂肪干细胞的凝胶制剂及其制备方法和医用敷料。本发明专利技术提供的凝胶制剂,包括脂肪干细胞、白蛋白、明胶和溶剂。本发明专利技术开创性的采用脂肪干细胞、白蛋白、明胶和溶剂制成干细胞凝胶制剂,该制剂使用时不需要经过静脉回注,仅需要敷贴在创口处,进行简单包扎即可对创口起到修复效果。由于本发明专利技术提供的干细胞制剂不需要采用静脉回注的方式进行施药,因此避免了静脉回注造成的制剂中干细胞大量流失,从而使干细胞制剂表现出较好的创口修复效果。实验结果表明,将含有本发明专利技术提供的凝胶制剂的医用敷料敷贴在创口表面后,7d的创口愈合率大于80±7%,说明本发明专利技术提供的凝胶制剂对创口具有较好的修复效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物材料领域,尤其涉及一种含有脂肪干细胞的凝胶制剂及其制备方 法和医用敷料。
技术介绍
干细胞是一种具有自我复制和分化潜能的细胞,多呈圆形或椭圆形,体积小,胞浆 少,核/质比大。干细胞增殖速度较慢,自稳性好,利于自我复制和维持。由于增殖速度缓 慢,使干细胞有充足的时间发现和纠正复制错误,避免自我突变,以便稳步进入特定的分化 程序。一旦机体需要时,干细胞就可进入分化状态,此时增殖速度开始逐渐加快,以适应组 织器官生长,发育和修复的需要。 干细胞根据分化潜能,可分为:1)单能干细胞:指干细胞分裂产生的子细胞只能 分化成单一功能类型的细胞,如表皮干细胞只能分化产生角化表皮细胞,精原细胞只能分 化产生精子;2)多能干细胞:指可具有分化成一种器官的两种或多种组织潜能的干细胞, 如骨髓造血干细胞可分化产生定向干细胞,进一步分化后可产生红系、髓系、粒系等12种 类型的血细胞,已用于治疗血液病;3)全能干细胞:指具有无限分化潜能的干细胞,如桑梓 胚期、囊胚期胚胎干细胞可分为化成任何一种组织类型,可形成胚体、胚后期组织和器官, 已用于转基因动物和克隆动物器官。 由于干细胞具有自我复制和分化的潜能,因此其对组织器官的损伤具有较好的修 复效果。近年来,已有研究人员将干细胞制成液体制剂,并将其应用于创口的修复。但液体 制剂需要采用静脉回注的方式进行使用,这种使用方式会导致制剂中的干细胞随血液流动 而流失,使得制剂中的干细胞只有一部分能够归巢到"目的地",从而降低了制剂对创口的 修复效果。
技术实现思路
有鉴于此,本专利技术的目的在于提供一种含有脂肪干细胞的凝胶制剂及其制备方法 和医用敷料,本专利技术提供的凝胶制剂对创口的修复效果较好。 本专利技术提供了一种含有脂肪干细胞的凝胶制剂,包括脂肪干细胞、白蛋白、明胶和 溶剂。 优选的,所述脂肪干细胞在所述凝胶制剂中的含量为5X IO5~5X 10 6个/mL。 优选的,所述白蛋白在所述凝胶制剂中的含量为5~20ng/mL。 优选的,所述明胶在所述凝胶制剂中的含量为30~50wt%。 本专利技术提供了一种含有脂肪干细胞的凝胶制剂的制备方法,包括以下步骤: a)、脂肪干细胞、白蛋白、明胶和溶剂混合,得到含有脂肪干细胞的凝胶制剂。 优选的,所述步骤a)具体为: al)、脂肪干细胞、白蛋白和部分溶剂混合,得到含白蛋白的脂肪干细胞悬液; a2)、含白蛋白的脂肪干细胞悬液、明胶和余量的溶剂混合,得到含有脂肪干细胞 的凝胶制剂。 优选的,所述脂肪干细胞按照以下方法获得: b)、脂肪组织依次进行消化处理和离心分离,得到脂肪干细胞。 优选的,获得脂肪干细胞后,对其进行传代培养,获得P2~P5代脂肪干细胞。 本专利技术提供了一种医用敷料,包括: 医用敷料原料; 复合在医用敷料原料表面的修复层; 所述修复层由上述技术方案所述的凝胶制剂上述技术方案所述的方法制得凝胶 制剂在医用敷料原料表面涂覆后,经过固化成形得到。 优选的,所述凝胶制剂在医用敷料表面的涂覆量为0. 5~5mL/cm2。 与现有技术相比,本专利技术提供了一种含有脂肪干细胞的凝胶制剂及其制备方法和 医用敷料。本专利技术提供的凝胶制剂,包括脂肪干细胞、白蛋白、明胶和溶剂。本专利技术开创性 的采用脂肪干细胞、白蛋白、明胶和溶剂制成干细胞凝胶制剂,该制剂使用时不需要经过静 脉回注,仅需要敷贴在创口处,进行简单包扎即可对创口起到修复效果。由于本专利技术提供的 干细胞制剂不需要采用静脉回注的方式进行施药,因此避免了静脉回注造成的制剂中干细 胞大量流失,从而使干细胞制剂表现出较好的创口修复效果。实验结果表明,将含有本专利技术 提供的凝胶制剂的医用敷料敷贴在创口表面后,7d的创口愈合率大于80±7%,说明本发 明提供的凝胶制剂对创口具有较好的修复效果。【附图说明】 为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现 有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本 专利技术的实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据 提供的附图获得其他的附图。 图1是本专利技术实施例7提供的在X4倍率下观察到的P2代脂肪干细胞的细胞形 貌; 图2是本专利技术实施例7提供的在X 10倍率下观察到的P2代脂肪干细胞的细胞形 貌; 图3是本专利技术实施例7提供的在X4倍率下观察到的P5代脂肪干细胞的细胞形 貌; 图4是本专利技术实施例7提供的在X 10倍率下观察到的P5代脂肪干细胞的细胞形 貌。【具体实施方式】 下面对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例 仅仅是本专利技术一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例,本领域普通 技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本专利技术保护的范 围。 本专利技术提供了一种含有脂肪干细胞的凝胶制剂,包括脂肪干细胞、白蛋白、明胶和 溶剂。 本专利技术提供的凝胶制剂包括脂肪干细胞、白蛋白、明胶和溶剂。其中,所述脂肪干 细胞是本专利技术提供的凝胶制剂的主要活性组分。在本专利技术中,所述脂肪干细胞的主要作用 是通过与凝胶制剂中的其他组分协同作用实现创口部位的组织再生,从而达到修复创口的 目的。在本专利技术提供的一个实施例中,所述脂肪干细胞在所述凝胶制剂中的含量为IO 4~ IO8个/mL ;在本专利技术提供的另一个实施例中,所述脂肪干细胞在所述凝胶制剂中的含量为 IO5~107个/mL ;在本专利技术提供的其他实施例中,所述脂肪干细胞在所述凝胶制剂中的含量 为 5X105~5父106个/!1^。 本专利技术对所述脂肪干细胞的来源没有特别限定,采用本领域技术人员熟知的脂肪 干细胞的获取方式获得脂肪干细胞即可。在本专利技术提供的一个实施例中,可以按照以步骤 获得脂肪干细胞: 脂肪组织依次进行消化处理和离心分离,得到脂肪干细胞。 在本专利技术提供的上述脂肪干细胞的获得方式中,首先对脂肪组织进行消化处理。 所述消化处理使用的消化液优选为I型胶原酶溶液,所述I型胶原酶溶液中I型胶原酶的 含量优选为〇. 1~〇. 5g/100mL,更优选为0. 25g/100mL。所述消化处理的时间优选为0. 5~ 2h,更优选为1~I. 5h。所述消化处理的温度优选为30~40°C,更优选为37°C。消化处理 结束后,向消化处理后的脂肪组织中加入培养液终止消化。所述终止消化所用的培养液优 选为胎牛血清(Fetal Bovine Serum,简称FBS)。终止消化的脂肪组织进行离心分离。所 述离心分离的离心力优选为100~400g,更优选为200~300g。所述离心分离的时间优选 为3~lOmin,更优选为5~6min。离心分离结束后,弃上两层液体,剩余的细胞沉淀即为 脂肪干细胞。 在本专利技术中,为了提高获得的脂肪干细胞的纯净度,优选对所述细胞沉淀进行重 悬和离心分离。所述重悬采用的试剂优选为生理盐水。所述离心分离的离心力优选为 100~400g,更优选为200~300g ;所述离心分离的时间优选为3~lOmin,更优选为5~ 6min。离心分离结束后,弃上清,剩余的细胞沉淀即为纯净度较高的脂肪干细胞。 在本专利技术中,优选对获得的脂肪干细胞进行传代培养,获得P2~P5代脂肪干细 胞,该过程具体为: 首本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含有脂肪干细胞的凝胶制剂,包括脂肪干细胞、白蛋白、明胶和溶剂。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:王一飞陈海佳葛啸虎卢瑞珊王小燕
申请(专利权)人:广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
类型:发明
国别省市:广东;44

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