胃肠外诺如病毒疫苗配制剂制造技术

本发明专利技术涉及胃肠外诺如病毒疫苗配制剂。本发明专利技术涉及包含单价诺如病毒病毒样颗粒混合物的单剂胃肠外疫苗组合物。还公开了通过施用此类组合物在人受试者中赋予针对诺如病毒感染的保护性免疫的方法。

【技术实现步骤摘要】
【专利说明】胃肠外诺如病毒疫苗配制剂 本申请是申请日为2012年07月11日、中国申请号为201280043691. 2、专利技术名称 为"胃肠外诺如病毒疫苗配制剂"的专利技术申请的分案申请。 对相关申请的交叉引用 本申请要求2011年7月11日提交的美国临时专利申请61/506,447的优先权，其 全部内容通过提及并入本文。 专利
本专利技术属于疫苗，特别是诺如病毒疫苗领域。另外，本专利技术涉及制备疫苗组合物的 方法及诱导和评估人中针对诺如病毒的保护性免疫应答的方法。 专利技术背景 诺如病毒是不可培养的人类杯状病毒，已经成为非细菌性胃肠炎的流行性爆发的 单一最重要起因（Glass等，2000;Hardy等，1999)。在灵敏的分子诊断测定法的开发之前， 对诺如病毒的临床意义的重视不够。原型基因小组I (genogroup I)诺沃克病毒（NV)基因 组的克隆和自重组杆状病毒表达系统生成病毒样颗粒（VLP)引起了测定法的开发，其揭示 了分布广泛的诺如病毒感染（Jiang等1990 ; 1992)。 诺如病毒是单链、正义RNA病毒，含有不分段的RNA基因组。病毒基因组编码三个 可读框，其中后两个分别规定主要衣壳蛋白和次要结构蛋白的生成（Glass等2000)。当在 真核表达系统中以高水平表达时，NV和某些其它诺如病毒的衣壳蛋白自组装成在结构上模 拟天然诺如病毒病毒体（virion)的VLP。当通过透射电子显微术观看时，VLP在形态上与 自人粪样品分离的感染性病毒体不可区分。 针对诺如病毒的免疫应答是复杂的，而且现在正在阐明保护的关联（correlate)。 用天然病毒实施的人志愿者研究证明了粘膜衍生的记忆免疫应答提供免于感染的短期 保护并提示疫苗介导的保护是可行的（Lindesmith等2003 ;Parrino等1997 ;Wyatt 等，1974)。 虽然由于VLP的可得性和它们被大量生成的能力，诺如病毒不能在体外培养，但 是在定义诺如病毒衣壳的抗原拓扑学和结构拓扑学方面已经取得了可观的进步。VLP保 留病毒衣壳蛋白的真实构象（authentic confirmation)，但是缺乏感染性遗传物质。结 果，VLP模拟病毒与细胞受体的功能相互作用，由此引发适宜的宿主免疫应答，但是缺乏繁 殖或引起感染的能力。与NIH联合，贝勒医学院（Baylor College of Medicine)在学术 性的、调查人发起的I期临床试验中研究了人志愿者中针对NV VLP的体液、粘膜和细胞免 疫应答。口服施用VLP在健康成人中是安全的且有免疫原性的（Ball等1999 Jacket等 2003)。但是，需要相对大量的多剂VLP以观察免疫应答。在其它学术中心，在动物模型中 进行的临床前实验已经证明了当与细菌外毒素佐剂一起鼻内施用时针对VLP的免疫应答 的增强（Guerrero 等 2001 ;Nicollier_Jamot 等 2004 ;Periwal 等 2003 ;Souza 等（2007) Vaccine Vol. 25(50) :8448-59)。然而，人中针对诺如病毒的保护性免疫仍然难以捉摸， 因为人中保护性免疫应答的指标仍然尚未清楚鉴定（Herbst-Kralovetz等（2010)Expert Rev.Vaccines 9 (3)，299 - 307)。 专利技术概述 本专利技术部分基于如下的发现，即单剂诺如病毒疫苗在胃肠外施用时在人中引发快 速的、强力的针对诺如病毒的保护性免疫应答。因而，本专利技术提供了一种在人中引发针对诺 如病毒的保护性免疫的方法，其包括对所述人胃肠外施用不超过单剂疫苗组合物，所述组 合物包含原型基因小组I和/或原型基因小组II诺如病毒VLP，其中与施用所述组合物前 所述人中的滴度相比，所述组合物至少诱导诺如病毒特异性血清抗体滴度的3倍升高。在 某些实施方案中，在施用所述单剂组合物的7天内诱导诺如病毒特异性抗体滴度的升高。 在一些实施方案中，经由静脉内、皮下、皮内、或肌肉内施用路径对所述人施用所述疫苗组 合物。在一个实施方案中，通过肌肉内施用路径对所述人施用所述疫苗组合物。 单剂疫苗组合物可以包含约5 ii g至约150 ii g剂量的原型基因小组I诺如病毒 VLP、原型基因小组II诺如病毒VLP、或这两者。在单剂疫苗组合物包含原型基因小组I和原 型基因小组II诺如病毒VLP两者的实施方案中，每种VLP的剂量可以是相同的或不同的。 在一个实施方案中，组合物包含不超过50 y g原型基因小组I诺如病毒VLP。在另一个实施 方案中，组合物包含不超过25 y g原型基因小组I诺如病毒VLP。在又一个实施方案中，组 合物包含不超过150 y g原型基因小组II诺如病毒VLP。在又一个实施方案中，组合物包含 不超过50 y g原型基因小组II诺如病毒VLP。诺如病毒VLP可以是单价VLP或多价VLP。 在本专利技术的一些方面，疫苗组合物中的原型基因小组I诺如病毒VLP包含自原型 基因小组I病毒株衍生的衣壳蛋白。在一个实施方案中，原型基因小组I诺如病毒VLP包含 自原型基因小组I，基因型1诺如病毒衍生的衣壳蛋白。在另一个实施方案中，原型基因小 组I诺如病毒VLP包含来自诺沃克病毒的衣壳蛋白。在本专利技术的其它方面，疫苗组合物中 的原型基因小组II诺如病毒VLP包含自原型基因小组II病毒株衍生的衣壳蛋白。在一些 实施方案中，原型基因小组II诺如病毒VLP包含来自原型基因小组II，基因型4诺如病毒 的衣壳蛋白。在某些实施方案中，原型基因小组II诺如病毒VLP是自表达原型基因小组II 诺如病毒共有序列生成的VLP。在一个具体的实施方案中，原型基因小组II诺如病毒VLP 包含具有序列SEQ ID NO: 1的衣壳蛋白。 在某些实施方案中，疫苗组合物进一步包含至少一种佐剂。优选地，佐剂不是细菌 外毒素佐剂。在一个实施方案中，佐剂是toll样受体激动剂，诸如单磷酰脂质A(MPL)、鞭毛 蛋白、或CpG。在另一个实施方案中，佐剂是氢氧化铝（例如明矾）。在某些实施方案中，疫 苗组合物包含两种佐剂，诸如MPL和氢氧化铝。在一些实施方案中，疫苗组合物可以进一步 包含缓冲剂，诸如L-组氨酸、咪唑、琥珀酸、Tris、和柠檬酸。疫苗组合物可以配制为干粉末 或液体。在一个实施方案中，疫苗组合物配制为液体（例如水性配制剂）。 本申请涉及下述各项实施方案。 1.一种在人中引发针对诺如病毒（Norovirus)的保护性免疫的方法，其包括对所 述人胃肠外施用不超过单剂疫苗组合物，所述组合物包含原型基因小组I诺如病毒病毒样 颗粒（VLP)，其中与施用所述组合物前所述人中的滴度相比，所述组合物至少诱导诺如病毒 特异性血清抗体滴度的3倍升高，且其中所述原型基因小组I诺如病毒VLP包含自原型基 因小组I病毒株衍生的衣壳蛋白。 2.实施方案1的方法，其中所述组合物包含不超过150 iig所述原型基因小组I诺 如病毒VLP。 3.实施方案1的方法，其中所述组合物包含不超过50 ii g所述原型基因小组I诺 如病毒VLP。 4.实施方案1的方法，其中所述组合物包含不超过25 ii g所述原型基因小组I诺 如病毒VLP。 5.实施方案1的方法，其中所述组合物包含不本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种在人中引发针对诺如病毒(Norovirus)的保护性免疫的方法，其包括对所述人胃肠外施用不超过单剂疫苗组合物，所述组合物包含原型基因小组I诺如病毒病毒样颗粒(VLP)，其中与施用所述组合物前所述人中的滴度相比，所述组合物至少诱导诺如病毒特异性血清抗体滴度的3倍升高，且其中所述原型基因小组I诺如病毒VLP包含自原型基因小组I病毒株衍生的衣壳蛋白。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：C理查德森，RF巴加特兹，PM门德尔曼，
申请(专利权)人：武田疫苗股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US