灭活病毒组合物和寨卡疫苗制剂制造技术

本发明专利技术涉及一种液体灭活病毒组合物，其包含：灭活全寨卡病毒；浓度为至少约6.5mM的至少一种药学上可接受的缓冲液；和任选地多元醇，其中所述至少一种药学上可接受的缓冲液不包含磷酸根离子；并且涉及衍生自所述液体灭活病毒组合物的疫苗。毒组合物的疫苗。毒组合物的疫苗。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】灭活病毒组合物和寨卡疫苗制剂


[0001]本公开涉及包含灭活全寨卡病毒和制剂的灭活病毒组合物、其制造方法和用途以及从其衍生的疫苗。

技术介绍

[0002]寨卡病毒是与其他蚊媒病毒(例如，黄热病病毒、登革热病毒、西尼罗河(West Nile)病毒和日本脑炎病毒)一起被分类在黄病毒科(Flaviviridae family)内的黄病毒(flavivirus)，自从所述病毒在2013年被引入巴西以来，它以遍及全半球的流行病的形式迅速蔓延。病毒已到达中美洲和北美洲，包括美国领土，因此现在正威胁着美国大陆。实际上，寨卡病毒毒株PRVABC59是从一名2015年前往波多黎各的人的血清中分离出来的。此毒株的基因组已被测序至少三次(参见Lanciotti等人Emerg.Infect.Dis.2016年5月,22(5):933
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5和GenBank登录号KU501215.1；GenBank登录号KX087101.3；以及Yun等人Genome Announc.2016年8月18日；4(4)和GenBank登录号ANK57897.1)。
[0003]病毒最初于1947年在乌干达被分离出来，1952年首次与人类疾病相关联，并且在非洲和东南亚偶尔被认为是导致轻度、自限性发热性疾病的原因(Weaver等人(2016)Antiviral Res.130:69
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80；Faria等人(2016)Science.352(6283):345
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349)。然而，2007年，北太平洋雅浦岛出现爆发，然后跨太平洋在岛屿之间传播，2013
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2014年在法属波利尼西亚导致大面积爆发，然后蔓延到新喀里多尼亚、库克群岛，并最终蔓延到复活节岛。亚洲谱系病毒随后通过尚未确定的途径转移到西半球(Faria等人(2016)Science.352(6283):345
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349)。病毒可通过埃及伊蚊(Aedes aegypti)、白纹伊蚊(A.albopictus)并且可能通过赫斯里伊蚊(A.hensilli)和波利尼西亚伊蚊(A.polynieseinsis)进行人兽共患性传播(Weaver等人(2016)Antiviral Res.130:69
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80)。另外，据认为可能存在用于传播病毒的其他载体，并且病毒可通过输血、经胎盘和/或通过性传播来传播。
[0004]在2015年末，寨卡病毒广泛感染地区的胎儿畸形(例如，小头畸形)和格
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巴二氏综合征(Guillain
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Barre syndrome；GBS)的显著增加引起了警惕，寨卡病毒可能比原先想象的更具毒性，促使世界卫生组织(WHO)宣布国际关注的突发公共卫生事件(Public Health Emergency of International Concern；PHEIC)(Heymann等人(2016)Lancet 387(10020):719
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21)。虽然寨卡病毒对公共健康构成重大威胁，但目前尚不存在FDA批准的疫苗或治疗方法，并且用于控制寨卡病毒的唯一预防措施涉及管理蚊子群体。
[0005]在最近表征重组寨卡病毒以开发潜在疫苗的努力中，鉴定了非人细胞适应的寨卡病毒，其在病毒包膜蛋白的位置330处携带突变(Weger
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Lucarelli等人2017.Journal of Virology)。此研究的作者发现寨卡病毒毒株PRVABC59的全长感染性cDNA克隆在克隆期间扩增时在遗传上不稳定，并且选择分裂病毒基因组以解决观察到的不稳定性，开发并应用两质粒系统。然而，用于开发寨卡疫苗的两质粒系统不太理想。因此，需要开发利用遗传稳定的寨卡病毒来治疗和/或预防寨卡病毒感染的疫苗。
[0006]希望灭活病毒组合物表现出良好的稳定性，特别是在疫苗制造期间有必要使已经
纯化且灭活的作为通常称为“原料药”的中间产品的灭活病毒组合物可在延长的时间段内运输和储存，并且在等待配制为最终产品(即疫苗)时不丧失其活性。例如，灭活病毒组合物可被冷冻(例如像在
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80℃下)，使得它们可被储存延长的时间段。因此，重要的是灭活病毒组合物在
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80℃下的储存期间稳定。此外，重要的是灭活病毒组合物能够承受温度的变化。特别地，重要的是灭活病毒组合物不会因导致一个或多个冻融循环的冷冻和解冻而丧失活性。对一个或多个冻融循环的耐受性也意味着在生产过程期间有可能冷冻原料药材料。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的是提供灭活病毒组合物，其中灭活全寨卡病毒在储存期间稳定。特别地，本专利技术的目的是提供灭活病毒组合物，其中灭活的全寨卡病毒在
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80℃下储存延长的时间段例如像储存至少10天直至例如6个月或一年期间稳定。旨在冷冻储存的此类组合物通常不(尚未)含有铝基佐剂，诸如铝盐，诸如明矾/氢氧化铝
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如果需要，可在之后不再安排冷冻储存时添加此类铝基佐剂。
[0008]本专利技术的另一个目的是提供能够在一个或多个冻融循环期间稳定灭活全寨卡病毒的灭活病毒组合物。
[0009]上述目的通过如本文所述和要求保护的本专利技术的实施方案来实现。
[0010]因此，本专利技术涉及一种液体灭活病毒组合物，其包含：
[0011]a)灭活全寨卡病毒，
[0012]b)至少一种药学上可接受的缓冲液，其浓度为至少约6.5mM，和
[0013]c)任选地多元醇，
[0014]其中液体灭活病毒组合物优选不含选自铝盐的佐剂，并且
[0015]所述至少一种药学上可接受的缓冲液不包含磷酸根离子。
[0016]在某个方面，液体灭活病毒组合物中磷酸根离子的浓度小于约7mM、或小于约6mM、或小于约5mM、或小于约4mM、或小于约3mM、或小于约2mM、或小于约1mM。
[0017]本专利技术还涉及灭活病毒组合物的用途，所述灭活病毒组合物包含：
[0018]a)灭活全寨卡病毒，
[0019]b)至少一种药学上可接受的缓冲液，其浓度为至少约6.5mM，和
[0020]c)任选地多元醇，
[0021]其中所述液体灭活病毒组合物优选不含选自铝盐的佐剂，并且
[0022]其中所述至少一种药学上可接受的缓冲液不包含磷酸根离子，用于稳定灭活的全寨卡病毒。
[0023]本专利技术还涉及一种制备液体灭活病毒组合物的方法，所述组合物包含：
[0024]a)灭活全寨卡病毒，
[0025]b)药学上可接受的缓冲液，其中所述缓冲液不是磷酸盐缓冲液，并且其中所述缓冲液的浓度为至少6.5mM；和
[0026]c)任选地多元醇，
[0027]其中所述灭活病毒组合物不含选自铝盐的佐剂；所述方法包括以下步骤：
[0028]步骤1.从一种或多种非人细胞获得的上清液中分离寨卡病毒制备剂；
[0029]步骤2.纯化所述寨卡病本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种液体灭活病毒组合物，其包含：a)灭活全寨卡病毒，b)至少一种药学上可接受的缓冲液，其浓度为至少约6.5mM，和c)任选地多元醇，其中所述液体灭活病毒组合物优选不含选自铝盐的佐剂，并且所述至少一种药学上可接受的缓冲液不包含磷酸根离子。2.如权利要求1所述的液体灭活病毒组合物，其中所述液体灭活病毒组合物中磷酸根离子的浓度小于约7mM、或小于约6mM、或小于约5mM、或小于约4mM、或小于约3mM、或小于约2mM、或小于约1mM。3.如权利要求1或2所述的液体灭活病毒组合物，其中所述液体灭活病毒组合物仅包含一种药学上可接受的缓冲液。4.如权利要求1或2所述的液体灭活病毒组合物，其中所述液体灭活病毒组合物包含至少两种不同的药学上可接受的缓冲液，其中所述液体灭活病毒组合物中两种浓度最高的药学上可接受的缓冲液的摩尔比不在1:2至2:1之间、或不在1:5至5:1之间、或不在8:1至1:8之间、或不在10:1至1:10之间。5.如前述权利要求中任一项所述的液体灭活病毒组合物，其中所述液体灭活病毒组合物中钾离子的浓度小于约4mM、或小于约3mM、或小于约2mM、或小于约1.5mM、或小于约0.5mM、或小于约0.1mM、或为约0mM。6.如前述权利要求中任一项所述的液体灭活病毒组合物，其中所述液体灭活病毒组合物基本上不含或不含硫酸鱼精蛋白。7.如前述权利要求中任一项所述的液体灭活病毒组合物，其中所述液体灭活病毒组合物的pH为约pH 6.0至约pH 9.0、或约pH 6.5至约pH 8.0、或约pH 6.8至约pH 7.8、或约pH 7.6，如在室温下测定的。8.如前述权利要求中任一项所述的液体灭活病毒组合物，其中所述药学上可接受的缓冲液的浓度为至少约7mM、或至少约7.5mM、或至少约8mM、或至少约8.5mM、或至少约9mM、或至少约10mM。9.如权利要求8所述的液体灭活病毒组合物，其中所述药学上可接受的缓冲液的浓度为约7mM至约200mM、或约7.5mM至约200mM、或约8mM至约200mM、或约8.5mM至约200mM、或约9mM至约100mM、或约9mM至约60mM、或约10mM、或约20mM、或约50mM。10.如前述权利要求中任一项所述的液体灭活病毒组合物，其中所述药学上可接受的缓冲液包含含氨基的分子。11.如权利要求10所述的液体灭活病毒组合物，其中所述药学上可接受的缓冲液为Tris或组氨酸缓冲液。12.如权利要求11所述的液体灭活病毒组合物，其中所述药学上可接受的缓冲液为Tris。13.如前述权利要求中任一项所述的液体灭活病毒组合物，其中所述组合物还包含至少一种多元醇。14.如权利要求13所述的液体灭活病毒组合物，其中所述液体灭活病毒组合物包含约1％重量/体积至约60％重量/体积所述多元醇、或约6％重量/体积至约50％重量/体积所述
多元醇、或约6％重量/体积至约40％重量/体积所述多元醇、或约6％重量/体积至约35％重量/体积所述多元醇、或约6％重量/体积至约30％重量/体积所述多元醇、或约6％重量/体积至约25％重量/体积所述多元醇、或约6％重量/体积至约20％重量/体积所述多元醇、或约6％重量/体积至约15％重量/体积所述多元醇、或约6％重量/体积至约12％重量/体积所述多元醇、或约7％重量/体积所述多元醇、或约10％重量/体积所述多元醇。15.如权利要求14所述的液体灭活病毒组合物，其中所述液体灭活病毒组合物包含：药学上可接受的缓冲液，其包含含氨基的分子；和约6％重量/体积至约15％重量/体积多元醇。16.如权利要求15所述的液体灭活病毒组合物，其中所述液体灭活病毒组合物包含Tris和约6％重量/体积至约15％重量/体积多元醇。17.如权利要求13至16中任一项所述的液体灭活病毒组合物，其中所述多元醇为糖。18.如权利要求17所述的液体灭活病毒组合物，其中所述糖为二糖。19.如权利要求18所述的液体灭活病毒组合物，其中所述二糖为非还原糖。20.如权利要求19所述的液体灭活病毒组合物，其中所述非还原糖为蔗糖。21.如权利要求20所述的液体灭活病毒组合物，其中所述液体灭活病毒组合物包含约5％重量/体积至约20％重量/体积蔗糖、或约6％重量/体积至约15％重量/体积蔗糖。22.如权利要求21所述的液体灭活病毒组合物，其中所述液体灭活病毒组合物包含约6％重量/体积至约8％重量/体积蔗糖，例如约7％重量/体积蔗糖。23.如权利要求21所述的液体灭活病毒组合物，其中所述液体灭活病毒组合物包含约8.5mM至约50mM Tris和约6％重量/体积至约15％重量/体积蔗糖，其中在室温下测量时，所述灭活病毒组合物的pH为约pH 7.0至约pH 8.0。24.如权利要求13所述的液体灭活病毒组合物，其中所述多元醇为甘油。25.如权利要求24所述的液体灭活病毒组合物，其中所述液体灭活病毒组合物包含约1％体积/体积至约60％体积/体积甘油、或约7％体积/体积至约15％体积/体积甘油、或约10％体积/体积甘油。26.如权利要求25所述的液体灭活病毒组合物，其中所述灭活病毒组合物包含约8.5mM至约50mM Tris和约6％体积/体积至约15％体积/体积甘油，其中在室温下测量时，所述灭活病毒组合物的pH为约pH 7.0至约pH 8.0。27.如前述权利要求中任一项所述的液体灭活病毒组合物，其中所述液体灭活病毒组合物还包含氯化钠。28.如权利要求27所述的液体灭活病毒组合物，其中所述液体灭活病毒组合物中氯化钠的浓度为约5mM至约500mM氯化钠、或约10mM至约200mM氯化钠。29.如权利要求28所述的液体灭活病毒组合物，其中所述液体灭活病毒组合物中氯化钠的浓度为约10mM至约40mM、或约10mM至约30mM，诸如约20mM。30.如前述权利要求中任一项所述的液体灭活病毒组合物，其中所述液体灭活病毒组合物的离子强度低于约80mM、或低于约70mM、或低于约60mM、或低于约50mM、或低于约40mM、或低于约30mM。31.如前述权利要求中任一项所述的液体灭活病毒组合物，其中所述寨卡病毒为非洲谱系病毒或亚洲谱系病毒。
32.如权利要求31所述的液体灭活病毒组合物，其中所述寨卡病毒为亚洲谱系病毒。33.如权利要求32所述的液体灭活病毒组合物，其中所述寨卡病毒衍生...

【专利技术属性】
技术研发人员：M约翰逊，S科马雷迪，
申请(专利权)人：武田疫苗股份有限公司，
类型：发明
国别省市：