【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于确定登革病毒的滴度的改进的免疫灶斑测定(immunofocusassay)，以及所述测定在例如基于减毒活登革病毒的疫苗等登革疫苗的质量控制中的用途。所述测定还可用于确定野生型病毒的滴度。
技术介绍
1、用于防止病毒感染的疫苗已被有效地用于降低人类疾病的发生率。关于病毒疫苗的最成功的技术之一是用减弱或减毒病毒株(“减毒活病毒”)对动物或人类进行免疫接种。有限的病毒复制足以表达完全病毒抗原谱系，并且可以对病毒产生强效且持久的免疫反应。因此，在随后暴露于致病性病毒株时，经历免疫接种的个体将免受疾病侵害。这些减毒活病毒疫苗是公共卫生中使用的最成功的疫苗之一。
2、登革热疾病是由感染登革病毒引起的蚊媒疾病。登革病毒感染会导致使人虚弱和痛苦的症状，包括突发高烧、头痛、关节和肌肉疼痛、恶心、呕吐和皮疹。迄今为止，已鉴别出登革病毒的四种血清型：登革-l(denv-l)、登革-2(denv-2)、登革-3(denv-3)和登革-4(denv-4)。登革病毒血清型1-4还可能引起登革出血热(dhf)和登革休克综合征(dss)。...
【技术保护点】
1.一种用于确定含登革病毒的样品中的登革病毒血清型的滴度的方法，所述方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述含登革病毒的样品包含选自登革血清型1、登革血清型2、登革血清型3和登革血清型4的至少两种不同的登革病毒血清型，优选至少三种不同的血清型，最优选所述样品包含四种不同的血清型。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述覆盖介质包含
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述覆盖介质包含
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述覆盖介质包含
6.根据权利要求1至5中任一项...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种用于确定含登革病毒的样品中的登革病毒血清型的滴度的方法，所述方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述含登革病毒的样品包含选自登革血清型1、登革血清型2、登革血清型3和登革血清型4的至少两种不同的登革病毒血清型，优选至少三种不同的血清型，最优选所述样品包含四种不同的血清型。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述覆盖介质包含
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述覆盖介质包含
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述覆盖介质包含
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中步骤(d)中的所述覆盖介质是通过混合等体积的含有4％胎牛血清(fbs)的2x杜尔伯科氏改良型伊格尔氏培养基(dmem)溶液与由以下组成的混合物来制备：(a)2％(w/v)的悬浮剂，所述悬浮剂由约89％(w/w)的微晶纤维素和约11％(w/w)的中等粘度羧甲基纤维素钠盐组成；和(b)0.7％(w/v)的低粘度羧甲基纤维素钠盐。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述方法是在6孔板或12孔板中进行，优选使用6孔板。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中步骤(c)中的所述第一孵育期是4至8小时。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中步骤(c)中的第一次孵育是在非离子型清洁剂、优选环氧乙烷和环氧丙烷的嵌段共聚物、更优选泊洛沙姆407的存在下进行的，并且任选地，其中步骤(d)中的所述覆盖介质还含有非离子型清洁剂，优选环氧乙烷和环氧丙烷的嵌段共聚物，更优选泊洛沙姆407。
10.根据权利要求9所述的方法，其中孵育介质中的所述非离子型清洁剂的最终浓度在0.01％(v/v)至2％(v/v)范围内，优选在0.05％(v/v)至0.15％(v/v)范围内，最优选是0.1％(v/v)。
11.根据权利要求9或10所述的方法，其中所述覆盖介质中的所述非离子型清洁剂的最终浓度在0.01％(v/v)至2％(v/v)范围内，优选在0.05％(v/v)至0.15％(v/v)范围内，最优选是0.1％(v/v)。
【专利技术属性】
技术研发人员：B·E·吕，S·H·华，S·M·埃布，J·A·利文古德，A·M·汤姆森，
申请(专利权)人：武田疫苗股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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