PD‑l抗体、其抗原结合片段及其医药用途制造技术

本发明专利技术提供了人PD‑1抗体、其抗原结合片段及其医药用途。还提供了包含所述抗体CDR区的嵌合抗体、人源化抗体、包含人PD‑1抗体及其抗原结合片段的药物组合物，以及所述抗体在制备用于治疗疾病或病症的药物中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】PD-1抗体、其抗原结合片段及其医药用途
本专利技术涉及一种PD-1抗体，PD-1的抗原结合片段，包含所述PD-1抗体CDR区的嵌合抗体、人源化抗体，以及包含PD-1抗体及其抗原结合片段的药物组合物，以及其作为抗癌药物的用途。
技术介绍
肿瘤免疫治疗是肿瘤治疗领域一个长时间的热点，其中T细胞的肿瘤免疫治疗又处于其核心位置。肿瘤免疫治疗是充分利用、调动肿瘤患者体内的杀伤性T细胞，对肿瘤进行杀伤作用，它可能是最有效的也是最安全的治疗肿瘤的途径。与此同时，肿瘤逃逸是肿瘤免疫治疗面临的一个巨大障碍，肿瘤细胞利用其自身对免疫系统的抑制作用促进了肿瘤的快速生长。肿瘤的免疫逃逸机制与机体对肿瘤的免疫应答之间存在着极为复杂的关系。肿瘤免疫治疗早期肿瘤特异性的杀伤性T细胞是有其生物活性的，但随着肿瘤生长后期失去了杀伤的功能。所以肿瘤免疫治疗是为了最大限度的提高患者自身对肿瘤的免疫系统反应，它不但要在体内激活原有的免疫系统反应，更要维持免疫系统反应的持续时间和反应强度，才是免疫治疗肿瘤的关键。人体内T细胞的活化采取了两条信号通路的系统，除了需要通过抗原呈递细胞递呈MHC-抗原肽给T细胞提供第一信号外，还需要一系列协同刺激分子提供第二信号，进而才能使T细胞产生正常的免疫应答。这个双信号通路系统对体内免疫系统的平衡起到着至关重要的作用，它严格调控着机体对自身和非自身抗原产生不同的免疫应答。如果缺少协同刺激分子提供的第二信号，将会导致T细胞的无应答或持续特异性免疫应答，从而产生耐受。因此，第二信号通路在机体免疫应答的整个过程中起着非常关键的调节作用。程序性死亡分子1(programmeddeath-1，PD-1)是1992年发现的表达在T细胞表面的一个蛋白受体，参与到细胞的凋亡过程之中。PD-1属于CD28家族，与细胞毒性T淋巴细胞抗原4(cytotoxicTIymphocyteantigen4，CTLA-4)具有23％的氨基酸同源性，但其表达却与CTLA不同，主要表达在活化的T细胞、B细胞和髓系细胞上。PD-1有两个配体，分别为PD-L1和PD-L2。PD-L1的主要表达于T细胞、B细胞、巨噬细胞和树突状细胞(dendriticcell，DC)上，在活化后细胞上的表达能够进行上调。而PD-L2的表达相对较局限，主要表达在抗原呈递细胞上.，如活化的巨噬细胞和树突状细胞。新的研究发现乳腺癌、肺癌、胃癌、肠癌、肾癌、黑素瘤等人类肿瘤组织中检测到高PD-L1蛋白的表达，且PD-L1的表达水平和患者的临床及预后紧密相关。由于PD-L1起到着第二信号通路抑制T细胞增殖的作用，所以阻断PD-L1/PD-1之间结合成为了肿瘤免疫治疗领域一个非常有潜力的新兴靶点。目前有多家跨国制药公司在研发针对PD-1的单克隆抗体，它通过阻断PD-L1/PD-1之间结合，最大限度的提高患者自身对肿瘤的免疫系统反应，从而达到对肿瘤细胞进行杀伤的目的。如WO2009114335。BMS公司和Merck公司的PD-1单克隆抗体在临床结果中，在非小细胞肺癌、黑素瘤和肾癌中都看到了一定的响应率，而且响应率和肿瘤PD-L1的表达有很高的关联性。这表明PD-1抗体对肿瘤有着积极疗效。本专利技术提供有着高亲和力，高选择性，高生物活性的PD-1抗体。
技术实现思路
本专利技术提供一种PD-1抗体或其抗原结合片段，其包含：抗体轻链可变区，所述的抗体轻链可变区至少1个选自如以下序列所示的LCDR：SEQIDNO：6，SEQIDNO：7或SEQIDNO：8；和抗体重链可变区，所述的抗体重链可变区至少1个选自如以下序列所示的HCDR：SEQIDNO：3，SEQIDNO：4或SEQIDNO：5。在本专利技术一个优选的实施方案中，本专利技术提供一种PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述的抗体轻链可变区包含如SEQIDNO：6所示的LCDR1。在本专利技术一个优选的实施方案中，本专利技术提供一种PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述的抗体轻链可变区包含如SEQIDNO：7所示的LCDR2。在本专利技术一个优选的实施方案中，本专利技术提供一种PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述的抗体轻链可变区包含如SEQIDNO：8LCDR3区。在本专利技术一个优选的实施方案中，本专利技术提供一种PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述的抗体重链可变区包含如SEQIDNO：3所示的HCDR1。在本专利技术一个优选的实施方案中，本专利技术提供一种PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述的抗体重链可变区包含如SEQIDNO：4所示的HCDR2。在本专利技术一个优选的实施方案中，本专利技术提供一种PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述的抗体重链可变区包含如SEQIDNO：5所示的HCDR3。在本专利技术一个优选的实施方案中，本专利技术提供一种PD-1抗体或其抗原结合片段，其所述的抗体轻链可变区包分别如SEQIDNO：6、SEQIDNO：7和SEQIDNO：8所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3。在本专利技术一个优选的实施方案中，本专利技术提供一种PD-1抗体或其抗原结合片段，其所述的抗体重链可变区包含分别如SEQIDNO：3、SEQIDNO：4和SEQIDNO：5所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3。在本专利技术一个优选的实施方案中，本专利技术提供一种PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述的抗体轻链可变区包含分别如SEQIDNO：6、SEQIDNO：7和SEQIDNO：8所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；且其中所述的抗体重链可变区包含分别如SEQIDNO：3、SEQIDNO：4和SEQIDNO：5所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3。在本专利技术一个优选的实施方案中，根据本专利技术提供的PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述的抗体为鼠源抗体或其片段。在本专利技术一个优选的实施方案中，根据本专利技术提供的鼠源抗体或其片段，其抗体轻链可变区进一步包含鼠源κ、λ链或其变体的轻链FR区。在本专利技术一个优选的实施方案中，根据本专利技术提供的鼠源抗体或其片段，其进一步包含鼠源κ、λ链或其变体的轻链恒定区。在本专利技术一个优选的实施方案中，根据本专利技术提供的鼠源抗体或其片段，其抗体重链可变区进一步包含鼠源IgG1，IgG2，IgG3，IgG4或其变体的重链FR区。在本专利技术一个优选的实施方案中，根据本专利技术提供的鼠源抗体或其片段，其进一步包含鼠源IgG1，IgG2，IgG3，IgG4或其变体的重链恒定区。在本专利技术一个优选的实施方案中，根据本专利技术提供的PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述的抗体为嵌合抗体或其片段。在本专利技术一个优选的实施方案中，根据本专利技术提供的PD-1嵌合抗体或其片段，其中所述的嵌合抗体轻链可变区序列为：SEQIDNO：10。在本专利技术一个优选的实施方案中，根据本专利技术提供的PD-1嵌合抗体或其片段，其中所述的嵌合抗体重链可变区序列为：SEQIDNO：9。在本专利技术一个优选的实施方案中，根据本专利技术提供的PD-1嵌合抗体或其片段，其进一步包含人源κ、λ链或其变体的轻链恒定区。在本专利技术一个优选的实施方案中，根据本专利技术提供的PD-1嵌合抗体或其片段，其进一步包含人源IgG1，IgG2，IgG3或IgG4或其变体的重链恒定区，优选包含人源IgG2或IgG4重链恒定区，或者使用氨基酸突变后无ADCC(antibod本文档来自技高网...

【技术保护点】
PCT国内申请，权利要求书已公开。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.12.12 CN 20131068194261.一种PD-1抗体或其抗原结合片段，其包含：轻链可变区和重链可变区，其中所述的抗体轻链可变区包含分别如SEQIDNO:6、SEQIDNO:7和SEQIDNO:8所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；且其中所述的抗体重链可变区包含分别如SEQIDNO:3、SEQIDNO:4和SEQIDNO:5所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3。2.如权利要求1所述的PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述的抗体或其抗原结合片段为鼠源抗体或其片段。3.如权利要求1所述的PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述的抗体或其抗原结合片段为嵌合抗体或其片段。4.如权利要求3所述的PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述的嵌合抗体轻链可变区序列为：SEQIDNO:10。5.如权利要求3所述的PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述的嵌合抗体重链可变区序列为：SEQIDNO:9。6.如权利要求1所述的PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述的抗体或其抗原结合片段为人源化抗体或其片段。7.如权利要求6所述的PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述人源化抗体轻链可变区上的轻链FR区序列，来源于如SEQIDNO:14所示的人种系轻链IGKV1-39和JK4的组合序列；其包含人种系轻链IGKV1-39的FR1，FR2，FR3区和JK4的FR4区。8.如权利要求6所述的PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述人源化抗体轻链序列为如SEQIDNO:12所示的序列或其变体，所述的变体为在轻链可变区具有A43S的氨基酸变化。9.如权利要求6所述的PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述人源化抗体重链可变区进一步包含人源IgG1,IgG2,IgG3或IgG4或其变体的重链FR区。10.如权利要求6所述的PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述人源化抗体重链可变区进一步包含人源IgG2或IgG4重链FR区。11.如权利要求6所述的PD-1抗体或其抗原结合片段，其中所述人源化抗体重链可变区上的重链FR区序列，来源于如SEQIDNO:13所示的人种系重链IgHV3-7和JH6的组合序列；其包含人...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁纪军，屈向东，林菊芳，叶鑫，曹国庆，陶维康，张连山，张蕾，扬莉，
申请(专利权)人：上海恒瑞医药有限公司，江苏恒瑞医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31