CCR4拮抗剂在抑制癌生长及转移中的应用制造技术

本发明专利技术涉及CCR4拮抗剂在抑制癌生长及转移中的应用，属于生物医药技术领域，具体涉及CCR4拮抗剂，尤其是C-021和ST45177901在抑制癌尤其是肝癌生长及转移中的应用。本发明专利技术提供的化合物在抑制癌尤其是肝癌生长及转移中具有良好的临床应用前景。

【技术实现步骤摘要】
CCR4拮抗剂在抑制癌生长及转移中的应用
本专利技术涉及生物医药
，具体涉及CCR4拮抗剂在抑制癌生长及转移中的应用。
技术介绍
肝癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一，具有恶性度高、进展快、预后差的特点，严重威胁着人类健康和生命安全。中国是全球肝癌发病率最高和病死数最多的国家，肝癌患者约占全球的55％。近年来，肝癌在全球的发病率都呈上升趋势，而中国新增癌症病例高居世界第一位，其中肝癌的新增病例和死亡人数均居世界首位。由于肝脏具有丰富的血流供应，因此，血管转移是最重要的肝癌转移途径。有报道称，90％以上的癌症患者死于癌转移。目前国内外应用于治疗肝癌血管转移的有效药物很少，因此，深入开展肝癌血管转移的药物防治研究具有重要意义。CC趋化因子受体4(CCchemokinereceptor4,CCR4)又称CKR4、CMKBR4、ChemR13、K5-5等，属于CC趋化因子受体家族，含360个氨基酸残基，定位于3号染色体p24-p21.3区域，为7次跨膜G蛋白偶联受体，主要表达于各淋巴细胞和组织，CCR4的高表达与多种血液系统肿瘤以及恶性实体瘤的浸润、转移和预后相关。已知的CCR4高亲和力配体有两个，分别为胸腺活化调节趋化因子(Thymusandactivationregulatedchemokine,TARC/CCL17)和巨噬细胞衍生趋化因子(macrophage-derivedchemokine,MDC/CCL22)。CCR4主要通过CCR4+Treg细胞及CCR4+Th2细胞发挥免疫效应，如Treg细胞表面的CCR4通过与其配体TARC、MDC的结合趋化Treg细胞，引起免疫逃逸，从而导致不良临床后果。通过研究CCR4拮抗剂抑制TARC/MDC-CCR4信号通路，有可能成为恶性肿瘤分子靶向治疗的新策略。CCR4拮抗剂根据其化学结构可分为：噻唑烷酮类、内酰胺类、2-氨基噻唑类、芳基磺酰胺类、二氮基嘧啶类、2，4-二氨基喹唑啉类及环胺类化合物等。在哮喘、鼻炎、皮炎、血栓性疾病、自身免疫性疾病等疾病的研究中均有良好的治疗效果，具有较大的临床应用价值。迄今为止，尚未见CCR4拮抗剂用于治疗肝癌生长及转移的报道。
技术实现思路
本专利技术研究发现，CCR4拮抗剂，尤其是小分子化合物c-021及ST45177901可有效拮抗CCR4，具有抑制癌尤其是肝癌生长及转移的作用。所述小分子化合物c-021和ST45177901均为CCR4拮抗剂，通过小鼠原位肝癌模型研究发现，这两种化合物均可通过有效拮抗CCR4，从而抑制TARC/MDC-CCR4信号通路趋化Treg细胞，有效抑制了小鼠体内肝癌的生长及转移，具有良好的临床应用前景。因此，本专利技术涉及以下各项：1.CCR4拮抗剂在制备用于抑制癌生长及抑制癌症转移的药物中的用途。2.根据第1项所述的用途，所述CCR4拮抗剂是小分子化合物c-021、ST45177901或其组合，所述小分子化合物c-021、ST45177901的结构式分别为和3.根据第1或2项所述的用途，所述癌症是肝癌。4.根据第1或2项所述的用途，所述CCR4拮抗剂可以被制备成注射剂,片剂或胶囊剂。本专利技术利用小鼠肝癌原位移植实验的效果验证结果表明，CCR4拮抗剂，尤其是小分子化合物c-021及ST45177901，均可有效抑制肿瘤细胞的生长及转移，c-021的抑制效应更为显著。本专利技术提供的小分子化合物在治疗肝癌生长及转移中具有良好的临床应用前景。附图说明图1.化合物c-021对小鼠肝癌生长及转移的作用图2.化合物ST45177901对小鼠肝癌生长及转移的作用具体实施方式实施例1：化合物1.小分子化合物c-021购于Tocris公司(货号：3581，纯度>99％)，该化合物分子式为C27H41N5O2·2HCl，结构如下：2.小分子化合物ST45177901购于Timtec公司(货号：MFCD04147999，纯度>99％)，该化合物分子式为C26H16ClN3O4S3，结构如下：实施例2：CCR4拮抗剂用于治疗肝癌生长及转移的动物实验小鼠肝癌原位移植模型可有效模拟肝癌自然生长、侵袭及转移的过程，是研究肝癌常用的动物实验模型(GaoYS,ChenXP,LiKY,WuZD.Nudemicemodelofhumanhepatocellularcarcinomaviaorthotopicimplantationofhistologicallyintacttissue.WorldJGastroenterol.2004.10:3107-3111)。因此用其验证化合物c-021及ST45177901在肝癌生长及转移中的作用。1、动物C57/6BL小鼠，雄性，体重20～24g，每组6只/笼群养，共分4组。购于北京维通利华实验动物技术有限公司，饲养于SPF级动物房。2、细胞利用IVIS公司的荧光素酶报告系统，构建了含荧光素酶报告基因的Hepa1-6细胞系。并给每只小鼠接种3*106个上述细胞，获得实验小鼠。所述含荧光素酶报告基因的Hepa1-6细胞系的具体构建方法如下：Hepa1-6细胞购自ATCC细胞库(货号：CRL-1830)，荧光素酶报告质粒购自IVIS公司(pcDNA6-Luci)。将每2ug所述质粒与200uljetPRIMEbuffer(公司：Polyplus，货号：PT-114-07)混合，再加4uljetPRIME转染试剂(公司：Polyplus，货号：PT-114-07)转染至Hepa1-6细胞，培养48h后加入2mg/mLG418(公司：Amresco，货号E859-5G)继续培养，连续培养2周，获得稳转细胞系。3、药物将实验小鼠进行分组：c-021组：实验组：每两天腹腔注射小分子化合物c-021，10μmol/kg对照组：每两天腹腔注射PBSST45177901组：实验组：每两天腹腔注射小分子化合物ST45177901，10μmol/kg对照组：每两天腹腔注射PBS4、实验仪器仪器名称：小动物活体体内成像系统IVISSpectrum，型号：IVISSpectrum，出产厂家：美国Caliper。5、实验方法将小鼠用10％水合氯醛(购自国药集团化学试剂有限公司，货号30037517)腹腔注射麻醉，仰卧位固定，75％酒精擦拭腹部消毒，剪去多余毛发，暴露腹部皮肤，沿腹中线于剑突下剪开0.5cm小口，暴露肝脏，挤出肝左叶，用眼科镊固定肝左叶，注射20-30μl含3*106所述含荧光素酶的Hepa1-6稳转细胞于肝实质中，轻压片刻将肝左叶送回腹腔，分别缝合肌肉层与皮肤。实验组分别每两天腹腔注射化合物c-021(10μmol/kg)和ST45177901(10μmol/kg)，对照组则腹腔注射PBS。在手术后1d、14d(对于c-021)/10d(对于ST45177901)分别进行荧光显像，观察肝癌细胞生长及转移情况。(1)化合物c-021对小鼠肝癌生长及转移的影响手术后1d检测两组荧光信号强度未见明显区别，经过给药处理14d，经c-021处理的实验组小鼠肝癌细胞荧光信号几乎检测不到，与对照组相比差别显著，而且对照组中荧光信号分布不均，出现多个强信号点，为转移灶信号(图1)。由上述实验结果本文档来自技高网...

【技术保护点】
CCR4拮抗剂在制备用于抑制癌生长及抑制癌症转移的药物中的用途。

【技术特征摘要】
1.CCR4拮抗剂作为唯一活性成分在制备用于抑制癌生长及抑制癌症转移的药物中的用途，其中所述癌症是肝癌，所述CCR4拮抗剂是小分子化合物ST45...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨鹏远，
申请(专利权)人：中国科学院生物物理研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11