蜜桶花片在制备抑制绒癌细胞JEG-3细胞增殖药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于中药技术领域，具体涉及一种蜜桶花片在制备抑制绒癌细胞JEG-3细胞增殖药物中的应用及蜜桶花片的制备方法。所述蜜桶花片由蜜桶花1700g作为原料药制成，采用超临界萃取制备而成，使得麦角甾苷含量有很大提高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于中药
，具体涉及一种蜜桶花片在制备抑制绒癌细胞JEG-3细 胞增殖药物中的应用及蜜桶花片的制备方法。
技术介绍
蜜桶花颗粒标准号WS-11440(ZD-1440)-2002,记载于国家中成药标准汇编内科肝 胆分册。由蜜桶花1700g作为原料药制成，具有清热解毒，除湿利胆，用于肝胆湿热所致的急 慢性肝炎。 现有技术中，尚未有蜜桶花片在在制备抑制人绒癌细胞JEG-3细胞增殖药物中的 应用的报道，也未见有蜜桶花片提取制备方面采用超临界萃取的报道，而传统水煎煮的方 法，工艺粗糙、落后，杂质多，导致患者用量过大，不方便服用，严重影响了本品在临床上应 用。
技术实现思路
专利技术目的：本专利技术的目的在于提供一种蜜桶花片在制备抑制绒癌细胞JEG-3细胞 增殖药物中的应用。 本专利技术的另一个目的在于提供一种蜜桶花片的制备方法。 本专利技术的目的是通过如下的方案实现的： 蜜桶花片在制备抑制绒癌细胞JEG-3细胞增殖药物中的应用，所述蜜桶花片由蜜桶花 1700g作为原料药制成，所述蜜桶花片的制备方法由下列步骤组成:取蜜桶花，加入到0)2超 临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6%，萃取压力15-30MPa，温度3〇-50°C，C〇2流量l_3ml/g生药· min，萃取时间800-900min，得超临界萃取物， 将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成400片，每片重0.50g。 优选的，上述的蜜桶花片在制备抑制绒癌细胞JEG-3细胞增殖药物中的应用，所述 蜜桶花片的制备方法由下列步骤组成:取蜜桶花，加入到CO 2超临界萃取器中，乙醇作为夹 带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%，萃取压力25MPa，温度40°C，CO 2流量2ml/g生 药· min，萃取时间850min，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干 燥，压片，制成400片，每片重0.50g。 现有技术中，蜜桶花颗粒口服，一次5g，一日3次。蜜桶花颗粒服药量大。采用本发 明方法制备成的蜜桶花片每片重〇.50g，每次仅需2片，一日服用3次。在具有更多活性成分 的条件下大大减少了服用量。此结论可以通过下述试验证明。试验一、不同方法制备的蜜桶花片中麦角甾苷含量的比较 1、仪器及试药本专利技术蜜桶花片：按实施例1方法制备，使用1700g原料药，经提取制成 400片，每片重0.50g。原蜜桶花片，按照WS-11440( ZD-1440 )-2002标准方法制备。 AgiIent 1200高效液相色谱仪;METTLER AE240电子分析天平;麦角留苷对照品（中国药品生 物制品检定所）。 2、方法 照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.5%醋 酸(42:58)为流动相;检测波长为334nm。理论板数按麦角留苷峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷真空干燥至恒重的麦角留苷对照品 4mg，置I OOml棕色量瓶中，加甲醇制成每1ml含40μ g的溶液，即得。供试品溶液的制备取本专利技术蜜桶花片10片，精密称定，研细，取〇 . 20g，精密称 定，加水IOml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次10ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣 加甲醇使溶解，并转移至5ml量瓶中，稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。对照产品供试品溶液的制备取对照的蜜桶花颗粒20g，研细，取I g，精密称定，加 水IOml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次IOml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲 醇使溶解，并转移至5ml量瓶中，稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液、对照产品供试品溶液各5μ1，注 入液相色谱仪，测定，即得。 3、结果 结果表明，本专利技术蜜桶花片中麦角留苷的含量为1.51-2.61mg/片;而原蜜桶花颗粒中 麦角留苷的含量为1.02mg/袋(每袋含颗粒剂5g)，每次服用量2片的麦角留苷含量为原颗粒 剂5g含量的3-5倍，在服用量减少的情况下，麦角留苷含量有很大提高。 上述研究表明，采用本专利技术制备方法制备的蜜桶花片，有效成分含量远远高于WS-11440(ZD-1440)-2002标准记载的方法制备的蜜桶花颗粒。【具体实施方式】 下面结合具体实施例对本专利技术作更进一步的说明，以便本领域的技术人员更了解 本专利技术，但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本专利技术上述 内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。 实施例1 取蜜桶花1700g，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的 体积百分比为5%，萃取压力25MPa，温度40°C，CO2流量2ml/g生药· min，萃取时间850min，得 超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成400片，每片重 0·50g〇 经检测，成品中麦角甾苷的含量为2.61mg /片。 实施例2 取蜜桶花1700g，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的 体积百分比为4%，萃取压力15MPa，温度30°C，C02流量lml/g生药· min，萃取时间900min，得 超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成400片，每片重 0·50g〇经检测，成品中麦角甾苷的含量为1.58 mg/片。 实施例3 取蜜桶花1700g，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的 体积百分比为6%，萃取压力30MPa，温度60°C，C02流量3ml/g生药· min，萃取时间800min，得 超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成400片，每片重 0·50g〇 经检测，成品中麦角留苷的含量为2.04mg /片。 实施例4:蜜桶花片抑制人绒癌细胞JEG-3细胞增殖的实验研究资料 1.实验材料 1.1实验用细胞株 人绒癌细胞JEG-3细胞，山东大学实验室细胞库，DMEM+10%FBS常规培养。 1.2实验药物 研究药物:本专利技术蜜桶花片:按实施例1方法制备。 药液储液:称取IOOmg蜜桶花片，溶于5ml无水乙醇中，0.2μπι滤器过滤，500μ1(1 〇?Τ 管分装，-20°C存储，同时0.2μπι滤器过滤无水乙醇以备对照组之用。 1.3实验试剂 DMEM( GIBCO公司Cat · No · 12100-061 Lot · No · 758137);胎牛血清(浙江天杭生物科技 有限公司Lot. No. 100419); NaHCO3 (上海久亿化学试剂有限公司Cat. No. 11810-033 Lot.No. 1088387) ;Trypsin(AMRESC0公司）；EDTA(AMRESC0公司）！Penicillin G Sodium Salt(AMRESC0公司I) ; Streptomycin Sulfate(AMRESCO);无水乙醇（溜博亚杜兰经贸有限 公司）；MTT (Biosharp批号：0793) :PBS(实验室自配）； 1.4实验器材 本文档来自技高网...

【技术保护点】
蜜桶花片在制备抑制绒癌细胞JEG‑3细胞增殖药物中的应用，所述蜜桶花片由蜜桶花1700g作为原料药制成，其特征在于，所述蜜桶花片的制备方法由下列步骤组成：取蜜桶花，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4‑6%，萃取压力15‑30MPa，温度30‑50℃，CO2流量l‑3ml/g生药·min，萃取时间800‑900min，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成400片，每片重0.50g。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王静，
申请(专利权)人：济南新时代医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37