抗ALS抑制剂类除草剂播娘蒿的PCR检测方法及试剂盒技术

本发明专利技术提供用于检测抗ALS抑制剂类除草剂播娘蒿的特异性PCR引物对，包括用于特异性扩增播娘蒿B-ALS-1基因的引物对（Seq ID No.1-2）以及用于特异性扩增播娘蒿B-ALS-2基因的引物对（Seq ID No.3-4）。采用该引物的PCR检测方法具有极好的特异性和灵敏性，经特异性试验证明（图1、2）能够将播娘蒿的两个ALS基因扩增出来。由于PCR方法操作简便快捷，基于对核苷酸的检测，当季就可以取样检测，从取样到出结果仅需2～4天。其灵敏度和特异性能够实现对田间疑似抗ALS抑制剂播娘蒿的快速鉴定和突变位点的确认，从而指导生产实践中抗性杂草的科学治理。

【技术实现步骤摘要】
抗ALS抑制剂类除草剂播娘蒿的PCR检测方法及试剂盒
本专利技术涉及抗除草剂杂草检测技术，具体地说，涉及一种抗ALS抑制剂类除草剂播娘蒿的PCR检测方法及试剂盒。
技术介绍
乙酰乳酸合酶(acetolactate synthase,简称ALS),也称乙酰轻酸合酶(acetohydroxyacid synthase,简称AHAS),是诱导植物和微生物体内纟颜氨酸、亮氨酸、异亮氨酸的生物合成过程中关键性酶，也是一种重要的除草剂靶标。ALS抑制剂类除草剂的开发及使用始于上世纪80年代初，由于此类除草剂有超高活性、对人及动物低毒、环境友好等明显的优势，受到广泛关注，目前已有50多个品种被开发和使用。上世纪80年代开始，我国陆续在冬小麦田推广使用苯磺隆、甲磺隆、氯磺隆、噻吩磺隆、二甲碘磺隆、氟唑磺隆、啶磺草胺等，2009年仅苯磺隆在我国的产量就达230多吨(有效成分)，相当于麦田化除面积2亿多亩。苯磺隆作为小麦田最经济、有效的优秀除草剂，对控制播娘蒿、荠菜等阔叶杂草起到了非常重要的作用。但由于该类除草剂分子靶标单一，长期使用易引起杂草抗药性，近些年来，以常规剂量喷施苯磺隆无法有效防除播本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于检测抗ALS抑制剂类除草剂播娘蒿的特异性PCR引物对，其特征在于，包括用于特异性扩增播娘蒿B‑ALS‑1基因的引物对以及用于特异性扩增播娘蒿B‑ALS‑2基因的引物对，引物序列如下：1）用于特异性扩增播娘蒿B‑ALS‑1基因的引物对：正向引物B‑ALS‑1F：5’‑TCTATCTCTCGCTCCTCTCC‑3’反向引物B‑ALS‑1R：5’‑CAAACAAACAGCAGTAGCG‑3’2）用于特异性扩增播娘蒿B‑ALS‑2基因的引物对：正向引物B‑ALS‑2F：5’‑CTTCTTCTCCTCCAACGA‑3’反向引物B‑ALS‑2R：5’‑GCCATCTCCTTCCGTTATGA‑3’。

【技术特征摘要】
1.用于检测抗ALS抑制剂类除草剂播娘蒿的特异性PCR引物对，其特征在于，包括用于特异性扩增播娘蒿B-ALS-1基因的引物对以及用于特异性扩增播娘蒿B-ALS-2基因的引物对，引物序列如下: 1)用于特异性扩增播娘蒿B-ALS-1基因的引物对: 正向引物 B-ALS-1F:5’ -TCTATCTCTCGCTCCTCTCC-3’ 反向引物 B-ALS-1R:5’ -CAAACAAACAGCAGTAGCG-3’ 2)用于特异性扩增播娘蒿B-ALS-2基因的引物对: 正向引物 B-ALS-2F:5’ -CTTCTTCTCCTCCAACGA-3’ 反向引物 B-ALS-2R:5’ -GCCATCTCCTTCCGTTATGA-3’。2.含有权利要求1所述引物对的用于检测抗ALS抑制剂类除草剂播娘蒿的试剂盒。3.根据权利要求2所述的试...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔海兰，李香菊，王藏月，
申请(专利权)人：中国农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11