一种测定血浆中游离化合物浓度、logD和化合物蛋白结合率的方法技术

本发明专利技术公开了一种测定血浆中游离化合物浓度、log D和化合物蛋白结合率的方法，测定血浆中游离化合物浓度和log D的方法，步骤：(1)用磷酸缓冲溶液配制含化合物和血浆的给体相，孵育；(2)将正辛醇注入到中空纤维膜内；向透析袋内加入磷酸缓冲溶液，将中空纤维膜和透析袋放入步骤(1)获得的溶液中，萃取使平衡；(3)取出透析袋内液体，用HPLC分析缓冲溶液中化合物的浓度[D]d，该浓度相当于平衡时血浆中游离化合物浓度；取出中空纤维膜内液体，用HPLC分析平衡时正辛醇中化合物浓度[D]a，计算血浆中化合物的log D；本发明专利技术分析速度快、需要的生物样品量少，灵敏、操作简便、成本低、不需要昂贵的仪器，环保。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种测定血浆中游离化合物浓度和log D的方法，其特征是包括如下步骤：(1)用浓度为0.02‑0.3 M、pH为7.4的磷酸缓冲溶液配制溶质为化合物和血浆的溶液5 mL为给体相，所述给体相中化合物的浓度为0.2‑100μg/mL、血浆体积浓度为10‑50％，将给体相放入容器中，于37℃水浴锅中孵育0.5‑2小时；(2)将50‑100μL正辛醇注入到一端已密封的中空纤维膜内腔中，加热将中空纤维膜的开口端密封；向透析袋内加入0.5 mL pH＝7.4的浓度为0.02‑0.3 M的磷酸缓冲溶液，将两端封闭的中空纤维膜和透析袋放入步骤(1)获得的溶液中，萃取75‑300分钟使平衡；(3)取出透析袋内液体，用HPLC分析缓冲溶液中化合物的浓度[D]d，该浓度相当于平衡时血浆中游离化合物浓度；取出中空纤维膜内液体，用HPLC分析平衡时正辛醇中化合物浓度[D]a，计算血浆中化合物的log D；log D的计算方法为式I：logD=log[D]a[D]d]]>式I。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李优鑫，包建民，宝贵荣，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：天津;12