一种银杏叶总黄酮及其制备方法技术

本发明专利技术提供一种银杏叶总黄酮及其制备方法，具体涉及一种来自银杏叶提取物的高含量总黄酮及分离纯化方法，通过除去非黄酮类杂质增加黄酮含量。与目前其他高含量黄酮制备方法相比较，本发明专利技术所得黄酮含量≥42％、优于标准银杏提取物的总黄酮≥24％的现有标准；产率≥73％；且黄酮种类丰富。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，具体涉及一种银杏叶提取物中制备 总黄酮的方法，涉及从银杏叶提取物中分离纯化银杏总黄酮的生产工艺。
技术介绍
银杏叶提取物（GinkoBilobaExtract，GBE)是以银杏GinkgobilobaL?的叶 为原料，采用适当的溶剂，提取的有效成分富集的一类产品，为浅黄棕色可流动性粉末，有 本品固有的香气，味苦，具有活血、化瘀、通络的功效。目前国际通用的银杏叶提取物质量标 准，即标准银杏提取物（银杏总黄酮多24 %，萜内酯多6 %，银杏酸<lOppm)，由上世纪七十 年代德国率先制定。 银杏叶提取物除具有显著的拮抗PAF受体外，还可以在抗炎、抗过敏、扩张血管、 保护心脑血管、改善外周血液循环、降低血清胆固醇及辅助抗癌等方面发挥药效，广泛应用 于心脑血管、神经等系统疾病的防治和保健。银杏叶中黄酮类成分，具较好的抗心肌缺血、 抗凝、抗缺氧和增强短期记忆力、清除自由基、延缓衰老等药理作用。 研宄表明，高纯度的银杏黄酮较之普通的标准银杏提取物在治疗心脑血管疾病方 面具有更好的疗效。然而，目前高纯度黄酮的提取分离方法报道中，多是从银杏叶中直接提 取分离，其黄酮含量较少，只收集某一浓度梯度的流分，其产率较低，含黄酮种类少，且多为 活性较差的芦丁等，与标准银杏叶提取物相比，差异较大。CN102138945A中涉及一种黄酮 活性物质的分离方法，其操作步骤繁琐、过程复杂，且在保证得率25%的情况下，其黄酮含 量仅达22%。CN102078341A中提到一种高纯度银杏黄酮的制备方法，其过大孔树脂柱分 离时，为了得到高纯度黄酮，只收集50% -70%乙醇高黄酮含量部位的洗脱液，所得到的黄 酮类成分有两方面不足：第一，一味的追求纯度，致使其得率大大下降，不足20%，造成了 极大的资源浪费；第二，该工艺分离后只得到了弱极性和中等极性银杏黄酮，其所含的黄酮 成分，与标准银杏叶提取物相比，种类差异较大，难以和银杏叶提取物相比较。目前银杏叶提取物的制备工艺尚趋完善，但高纯度银杏黄酮的提取关键技术更是 有待进一步发展，具备重要的医疗及科研意义。 技术方案 1.本专利技术涉及一种银杏叶总黄酮，黄酮含量彡42%。 2.本专利技术的一种银杏叶总黄酮的来源包括而不限制于银杏叶提取物；本专利技术涉 及一种自银杏叶提取物中制备总黄酮的方法。 3.本专利技术将银杏叶提取物用乙醇溶解，D101型大孔树脂拌样上样，过大孔树脂柱 分离，不同梯度的乙醇水溶液洗脱，收集10% -70%之间的流分，浓缩、干燥。溶剂溶解，静 置、抽滤，弃渣，取滤液，真空干燥，研细、即得。 4.本专利技术将银含叶提取物40°C水浴条件下乙醇溶解，D101型大孔树脂拌样上样， 过大孔树脂柱分离，不同梯度的乙醇水溶液洗脱，收集10% -70%之间的流分，浓缩、干燥。 溶剂溶解，静置、抽滤，弃渣，取滤液，真空干燥，研细、即得。 5.乙醇水溶液的梯度分别是：水、10%乙醇、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇、乙 醇。 6.本专利技术涉及一种银杏叶总黄酮的制备方法。其特征在于：以银杏叶提取物为原 料，其工艺步骤包括： (1)对银杏叶提取物样品预处理：乙醇溶解后，加入大孔树脂拌样； (2)大孔树脂柱洗脱：将步骤⑴处理好的拌样大孔上样，分别不同梯度的乙醇对 大孔树脂柱进行洗脱；乙醇水溶液的梯度分别是：水、10%乙醇、30%乙醇、50%乙醇、70% 乙醇、乙醇； (3)收集洗脱液：收集步骤（2)中自大孔树脂柱中流出的10% -70%乙醇部位的 洗脱液； (4)减压浓缩：将步骤（3)中的洗脱液按梯度进行减压浓缩，合并浓缩液、蒸干；温 度控制45-60°C;真空度控制0.IMPa; (5)溶解：步骤⑷蒸干得到的沉淀，加有机溶剂溶解； (6)静置； (7)过滤，弃渣，取滤液； (8)真空干燥、研细粉，即得。或； (9)含量测定：照《中国药典》银杏叶中总黄酮醇苷含量测定方法测定 总黄酮醇苷含量=(槲皮素含量+山奈素含量+异鼠李素含量）*2. 51 本专利技术涉及一种银杏叶提取物中制备总黄酮的方法，其特征在于： (1)_(6)同上(7)过滤，弃渣，取滤液；用有机溶剂洗涤残渣，取洗液；合并滤液和洗液；有机溶 剂优选是乙醇；(8)真空干燥、研细粉，即得； 本专利技术所得的活性物质中，黄酮含量多42%;产率多73%; 步骤（5)中沉淀溶解所选溶剂为乙醇、甲醇、乙酸乙酯、丙酮中的任意组合；有机 溶剂优选是乙醇； 本专利技术提供一种银杏叶总黄酮，所含主要黄酮类成分：槲皮素-3-0-2"，6"-二 鼠李糖葡萄糖苷、山奈酚-3-0-2"，6"-二鼠李糖葡萄糖苷、异鼠李素-3-0-2"，6"-二 鼠李糖匍萄糖苷、杨梅素 _3_0_芸香糖苷、杨梅素-3_〇-匍萄糖苷、懈皮素-3_〇-芸香糖苷、 懈皮素_3_0_匍萄糖苷、懈皮素-2"-匍萄糖鼠李糖苷、异鼠李素-3_〇-新授皮苷、异鼠 李素 _3-〇_2"-匍萄糖鼠李糖苷、山奈酷-3_〇-芸香糖苷、异鼠李素-3_〇-芸香糖苷、山奈 酚-3-0-葡萄糖鼠李糖苷、槲皮素-3-0-2" -(6〃 -对香豆酰基）-葡萄糖鼠李糖苷、山奈 酚-3-0-2" _(6"-对香豆酰基）-葡萄糖鼠李糖苷、山奈酚-3-0-2" _(6"-对香豆酰 基）_葡萄糖葡萄糖苷等。 含量测定： 照《中国药典》银杏叶中总黄酮醇苷含量测定方法测定，高效液相检测方法为： 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.4%磷酸（50 : 50)为流动相；检测波长为 360nm;色谱柱温：25°C;进样量：10yL。理论塔板数以槲皮素峰计算应不低于2500。 对照品溶液的制备：分别取槲皮素对照品、山奈素对照品、异鼠李素对照品适量， 精密称定，加甲醇制成每lml分别含30yg、30yg、20yg的混合溶液，作为对照品溶液。 供试品溶液的制备：取实施例1所得银杏叶提取物的总黄酮样品约lg，精密称定， 置索氏提取器中，加三氯甲烷回流2小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥干；加甲醇回流提取4小 时，提取液挥干，残渣加甲醇-25%盐酸溶液（4 : 1)混合溶液25毫升，加热回流30分钟， 放冷，转移至50ml量瓶中，并加甲醇至刻度，摇匀，即得。当前第1页1 2 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种银杏叶总黄酮的制备方法，其特征在于：将银杏叶提取物用溶剂溶解，大孔树脂拌样上样，过大孔树脂柱分离，不同梯度的乙醇水溶液洗脱，收集10％‑70％之间的流分，浓缩、干燥；乙醇溶解，静置、抽滤，弃渣，取滤液，真空干燥，研细、即得。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨华，李萍，梁金秀，曲玮，郭汝洲，刘新光，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32