【技术实现步骤摘要】
A型通用流感病毒的数字PCR检测试剂盒及检测方法
本专利技术涉及一种A型通用流感病毒的数字PCR检测试剂盒机检测方法，可应用于 A型通用流感病毒引起的实验室应急检测。
技术介绍
目前，原有的定量PCR对原有的样本核酸只能进行相对定量，需要依靠标准曲线 或参照基因来测定核酸量，是对起始样品的绝对定量。依靠 Ct值常不能很好分辨：拷贝数 变异、突变检测、基因相对表达研究（如等位基因不平衡表达）、二代测序结果验证、miRNA 表达分析、单细胞基因表达分析等。而目前的荧光检测方法周期长，且对病毒是否为阳性的 检测存在不确定结果，导致多次检测，或检测结果不准确。
技术实现思路
本专利技术要解决上述现有技术存在的问题，提供一种能够直接数出DNA分子的个数 的方法，大大提高了检测灵敏度、精确性，适合重大传染病的早期筛查。 本专利技术解决其技术问题采用的技术方案：这种A型通用流感病毒的数字PCR检测 试剂盒，包括逆转录酶、数字PCR缓冲液PCRMasterMi X、A型流感病毒基因标准品，数字PCR 检测试剂盒还包括上游引物、下游引物和特异性探针，上游引物、下游引物和特异性探针序 列如下： 上游引物 A-FP: 5，-GACCRATCCTGTCACCTCTGAC-3，； 下游引物 A-RP: 5，-AGGGCATTYTGGACAAAKCGTCTA-3，； 特异性探针 A-P: 5 ' -FAM-TGCAGTCCTCGCTCACTGGGCACG-BHQ1-3 ' ； 其中FAM为荧光报告基团，BHQl为荧光淬灭基团；...
【技术保护点】
一种A型通用流感病毒的数字PCR检测试剂盒，包括逆转录酶、数字PCR缓冲液PCRMasterMix、A型流感病毒基因标准品，其特征是：所述数字PCR检测试剂盒还包括上游引物、下游引物和特异性探针，所述上游引物、下游引物和特异性探针序列如下：上游引物A‑FP:5’‑GACCRATCCTGTCACCTCTGAC‑3’；下游引物A‑RP:5’‑AGGGCATTYTGGACAAAKCGTCTA‑3’；特异性探针A‑P:5’‑FAM‑TGCAGTCCTCGCTCACTGGGCACG‑BHQ1‑3’，其中FAM为荧光报告基团，BHQ1为荧光淬灭基团；所述A型流感病毒基因标准品序列如下：GACCAATCCTGTCACCTCTGACTAGGGGGATTTTGGGATTTGTATTCACGCTCACCGTGCCCAGTGAGCGAGGACTGCAGCGTAGACGCTTTGTCCAAAATGCCCT。
【技术特征摘要】
1. 一种A型通用流感病毒的数字PCR检测试剂盒，包括逆转录酶、数字PCR缓冲液 PCRMasterMix、A型流感病毒基因标准品，其特征是：所述数字PCR检测试剂盒还包括上游 引物、下游引物和特异性探针，所述上游引物、下游引物和特异性探针序列如下： 上游引物 A-FP: 5 ' -GACCRATCCTGTCACCTCTGAC-3 ' ； 下游引物 A-RP: 5 ' -AGGGCATTYTGGACAAAKCGTCTA-3 ' ； 特异性探针 A-P: 5' -FAM-TGCAGTCCTCGCTCACTGGGCACG-BHQ1-3'， 其中FAM为荧光报告基团，BHQl为荧光淬灭基团； 所述A型流感病毒基因标准品序列如下： GACCAATCCTGTCACCTCTGACTAGGGGGATTTTGGGATTTGTATTCACGCTCACCGTGCCCAGTGAGCGAGG ACTGCAGCGTAGACGCTTTGTCCAAAATGCCCT。2. 根据权利要求1所述的A型通用流感病毒的数字PCR检测试剂盒，其特征是：所述 数字PCR检测试剂盒中组分含有：3. -种A型通用流感病毒的数字PCR检测方...
【专利技术属性】
技术研发人员：雷永良，刘敏，陈秀英，王晓光，叶灵，叶碧峰，梅建华，
申请(专利权)人：雷永良，
类型：发明
国别省市：浙江;33
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。