一种利用米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株沤麻制备黄麻纤维的方法技术

本发明专利技术涉及一种利用米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株沤麻制备黄麻纤维的方法，包括：(1)将保存的米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株于牛肉膏蛋白胨培养基中培养，添加冻存缓冲液；(2)在黄麻麸皮培养基中接入步骤(1)所得的菌一环，摇瓶培养；(3)将步骤(2)所得的培养基接种入黄麻麸皮发酵培养基，摇瓶培养得到发酵菌液；(4)制作沤麻池；(5)将步骤(3)中制备的发酵菌液使用喷淋法送入沤麻池做沤麻处理，沤麻后制得黄麻纤维。本发明专利技术工艺简单、生产流程短、适合大规模工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于沤麻领域，特别涉及一种利用米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株沤麻制备黄麻纤维的方法。 
技术介绍
麻是纺织原料之一，其品种主要有亚麻、苎麻、大麻、红麻、黄麻、罗布麻、剑麻、蕉麻、荨麻和苘麻等。麻纤维是从各种麻植物取得的纤维的统称，具有吸湿、透气、散热和抗菌等其他天然纤维无法比拟的优点。我国作为世界上麻类资源最丰富的国家之一，每年生产的麻纤维及其制品除满足国内市场的需求，还作为大宗商品出口美国、西欧及东南亚国家，年均创汇近百亿美元。在国家节能减排政策和消费者回归自然、追求绿色的消费观念推动下，麻类纤维绿色加工技术已经成为纺织领域的研究热点。 沤麻利用细菌和水分对植物的作用，溶解或腐蚀包围在韧皮纤维束外面的大部分蜂窝状结缔组织和胶质，从而促使纤维与麻茎分离的加工过程。在广泛应用的水沤法中，麻茎浸没在水中，水渗透到麻茎的中央部分，使内部细胞膨胀，胀破最外层，从而增加对水分和细菌的吸收。沤麻法是生产优质纤维的加工工艺，沤麻过程的菌种选择是沤麻的关键。 
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种利用米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株沤麻制备黄麻纤维的方法，该方法简单、生产流程短、适合大规模工业化生产。 本专利技术的一种利用米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株沤麻制备黄麻纤维的方法，包括： (1)将保存的米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株于牛肉膏蛋白胨培养基中培养，添加冻存缓冲液； (2)在黄麻麸皮培养基中接入步骤(1)所得的菌一环，摇瓶培养；菌一环的加入量为每1000ml菌液加入200mg； r>(3)将步骤(2)所得的培养基接种入黄麻麸皮发酵培养基，摇瓶培养得到发酵菌液； (4)制作沤麻池； (5)将步骤(3)中制备的发酵菌液使用喷淋法送入沤麻池做沤麻处理，沤麻后制得黄麻纤维。 所述步骤(1)中的米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株的16Sr DNA序列如SEQ ID NO:1所示。 所述步骤(1)中的牛肉膏蛋白胨培养基的组成为：每1000ml培养基包括牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g和水1000ml。 所述步骤(1)中的冻存缓冲液的组成为：每100ml冻存缓冲液包括甘油50ml和水50ml；加入量为每1000ml菌液加入1ml。 所述步骤(1)中的菌株保存条件为-80℃，pH自然；培养条件为37℃，pH自然，培养时间12小时。 所述步骤(2)中的黄麻麸皮培养基的组成为：每1000ml培养基包括黄麻皮200g，麸皮50g，麦芽汁50ml和水950ml；步骤(3)中的黄麻麸皮发酵培养基的组成为：每1000ml培养基包括黄麻皮100g，麸皮100g，麦芽汁200ml和水800ml，接种量为每1000ml菌液接种入30L黄麻麸皮发酵培养基。 所述步骤(2)和(3)中的培养条件为37℃，pH自然，培养时间24小时。 所述步骤(4)中的沤麻池的麻趟间距为15-20厘米，麻层厚度为2-2.5厘米。 所述步骤(5)中的沤麻条件为自然温度(约20-30摄氏度)，pH自然，沤麻时间10-20天；喷淋法的工艺具体为每48小时向沤麻区域喷洒菌液6～10ml。 所述步骤(5)中的制得的黄麻纤维应用于制作麻袋、麻布、造纸、绳索、织地毯或窗帘。 本专利技术所采用的米氏硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillus migulanus)DY3菌株的保藏号为CGMCC No.9121，保藏日为2014年5月4日，建议分类命名为：米氏硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillus migulanus),保藏单位名称：CGMCC中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。 根据16sR DNA测序Blast及聚类分析结果，该菌与米氏硫胺素芽孢杆菌相似性为99％，结合镜检分析，命名此菌株为米氏硫胺素芽孢杆菌(Aneurinibacillus migulanus)DY3菌株。16S rDNA测序中，所采用的正向引物27F，反向引物1492R，均为国际通用引物，由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。 该菌株培养条件粗放，耐热性好，生长繁殖快，可以有效去除黄麻纤维中的非纤维素胶质，且酶活稳定，菌、酶均无毒性。该菌株及培养系统能够直接用于黄麻沤麻。 有益效果(1)本专利技术所采用的菌株及培养系统，经检测能够直接用于黄麻沤麻，具有沤麻周期短，沤麻效果良好等特点，菌种不易被污染，处理成本低，纤维质量好，沤麻条件温和，抗污染能力强，耐热性能好，无环境污染等优点； (2)本专利技术的制备方法具有工艺简单、适合大规模工业化生产等特点；利用该体系进行亚麻脱胶具有沤麻时间短视天气情况，一般可缩短2-3天(正常收获季节)等特点。 附图说明图1为本专利技术所用菌株显微镜染色照片(油镜)； 图2a-j为本专利技术采用引物27F产生的细菌DNA图谱； 图3a-k为本专利技术采用引物1492R产生的细菌DNA图谱。 具体实施方式下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。此外应理解，在阅读了本专利技术讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本专利技术作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。 实施例1 沤麻时间据黄麻收获时间定，一般为9月中下旬至10月中下旬。 沤麻方法： (1)将保存的米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株于牛肉膏蛋白胨培养基(每1000ml培养基包括牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g和水1000ml)中培养，添加冻存缓冲液(每100ml冻存缓冲液包括甘油50ml和水50ml)，培养条件为37℃，pH自然，培养时间12小时； (2)在黄麻麸皮培养基(每1000ml培养基包括黄麻皮200g，麸皮50g，麦芽汁50ml和水950ml)1000ml中接入菌一环，摇瓶培养，培养条件为37℃，pH自然，培养时间24小时； (3)将培养基接种入黄麻麸皮发酵培养基(每1000ml培养基包括黄麻皮100g，麸皮100g，麦芽汁200ml和水800ml)，摇瓶培养得到发酵菌液，培养条件为37℃，pH自然，培养时间24小时； (4)沤麻池的准备：用4HB-800型黄麻剥皮机将鲜皮从黄麻全杆中分离出来(韧皮部因机械挤压、打板击打已造成许多伤口，利于脱胶菌入侵，但不破坏纤维)；尾部端齐(以洗麻时能甩得动为度，20根左右为一把)，稍部拢齐、直，顺折成三至四层(沤麻池深度相仿，浸水时正好淹没麻把)或对折，每把麻中部靠尾处用鲜皮扎把，把与把之间用扎把的鲜皮连接，按顺序排列、排紧；一般每个沤麻池均分批投放，便于分批洗麻；投放好麻把后然后将麻把全部压入水中，基本上不露出水面为宜。最后用厚型塑料薄膜(透明)将全部麻把盖住，再压紧塑料薄膜，以防麻皮离水。麻趟间距15-20厘米。麻层厚度一般在2-2.5厘米为宜。 (5)将制备的发酵菌液使用喷淋法入沤麻池做沤麻处理，沤麻后制得可供纺织制本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株沤麻制备黄麻纤维的方法，包括：(1)将保存的米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株于牛肉膏蛋白胨培养基中培养，添加冻存缓冲液；(2)在黄麻麸皮培养基中接入步骤(1)所得的菌一环，摇瓶培养；(3)将步骤(2)所得的培养基接种入黄麻麸皮发酵培养基，摇瓶培养得到发酵菌液；(4)制作沤麻池；(5)将步骤(3)中制备的发酵菌液使用喷淋法送入沤麻池做沤麻处理，沤麻后制得黄麻纤维。

【技术特征摘要】
1.一种利用米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株沤麻制备黄麻纤维的方法，包括：
(1)将保存的米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株于牛肉膏蛋白胨培养基中培养，添加冻存缓冲
液；
(2)在黄麻麸皮培养基中接入步骤(1)所得的菌一环，摇瓶培养；
(3)将步骤(2)所得的培养基接种入黄麻麸皮发酵培养基，摇瓶培养得到发酵菌液；
(4)制作沤麻池；
(5)将步骤(3)中制备的发酵菌液使用喷淋法送入沤麻池做沤麻处理，沤麻后制得黄麻纤
维。
2.根据权利要求1所述的一种利用米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株沤麻制备黄麻纤维的方法，
其特征在于：所述步骤(1)中的米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株的16Sr DNA序列如SEQ ID 
NO:1所示。
3.根据权利要求1所述的一种利用米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株沤麻制备黄麻纤维的方法，
其特征在于：所述步骤(1)中的牛肉膏蛋白胨培养基的组成为：每1000ml培养基包括牛肉
膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g和水1000ml。
4.根据权利要求1所述的一种利用米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株沤麻制备黄麻纤维的方法，
其特征在于：所述步骤(1)中的冻存缓冲液的组成为：每100ml冻存缓冲液包括甘油50ml
和水50ml；加入量为每1000ml菌液加入1ml。
5.根据权利要求1所述的一种利用米氏硫胺素芽孢杆菌DY3菌株沤麻制备黄麻纤维的方法，
其特征在于：所述步骤(1)中的菌株保存条件为-80℃，pH自然；培养条件...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁若垚，郭营，郁崇文，张兴群，
申请(专利权)人：东华大学，
类型：发明
国别省市：上海;31