【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于检测辅酶Q10的方法和试剂盒 相关申请 本申请要求2012年3月2日提交的61/606019号美国临时申请的优先权，其全部 内容在此通过引用并入本文。 专利技术背景 辅酶Q10,本文也称为CoQlO、泛醌或泛癸利酮，是一种常用的营养补充物，并可以 作为维生素类补充剂在营养品商店、健康食品商店、药店等处找到其胶囊的形式，以通过泛 醇（CoQlO的还原形式）的抗氧化性能帮助保护免疫系统。CoQlO在人体的大部分组织和其 他哺乳动物的组织中普遍发现。CoQlO是高度亲脂性的，并且在大部分不溶于水。不溶性与 烃性质的50个碳原子的类异戊二烯侧链有关，如CoQlO的如下结构中所示。
【技术保护点】
一种用于测定样品中辅酶Q10(CoQ10)的量的方法，所述方法包括：向所述样品中加入第一提取缓冲液和第二提取缓冲液，其导致所述样品的相分离；和光谱学地分析所述第二提取层来测定CoQ10的量。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.03.02 US 61/606,0191. 一种用于测定样品中辅酶QlO(CoQlO)的量的方法，所述方法包括： 向所述样品中加入第一提取缓冲液和第二提取缓冲液，其导致所述样品的相分离；和 光谱学地分析所述第二提取层来测定CoQlO的量。2. -种用于测定样品中CoQlO的量的方法，所述方法包括： 向所述样品中加入第一提取缓冲液和第二提取缓冲液； 混合所述样品；和 分析所述第二提取层以测定CoQlO的量，其中所述第一提取缓冲液和第二提取缓冲液 的单次提取导致比使用单独甲醇的提取检测到至少2倍的CoQlO量。3. -种用于测定样品中CoQlO的量的方法，所述方法包括： 向所述样品中加入第一提取缓冲液； 加热并混合所述样品； 向所述样品中加入第二提取缓冲液，其导致所述样品的相分离； 加热并混合所述样品； 冷却所述样品至环境温度；及 分析所述第二提取缓冲液层以测定样品中CoQlO的量。4. 一种用于测定样品中CoQlO的量的方法，所述方法包括： 向所述样品中加入第一提取缓冲液； 加热并混合所述样品； 向所述样品中加入第二提取缓冲液，其导致所述样品的相分离； 加热并混合所述样品； 冷却所述样品至环境温度；及 通过光谱分析对第二提取缓冲液层进行光谱学分析，以测定样品中CoQlO的量，其中 用提取缓冲液的单次提取导致比使用单独甲醇提取随后是液相色谱/质谱/质谱（LC/MS/ MS)提取到至少2倍的CoQlO量。5. 如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中在样品中检测到的CoQlO的量是通过 光谱分析法光谱学地测定的。6. 如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中CoQlO的量用LC/MS/MS检测。7. 如权利要求2或4中任一项所述的方法，其中所述使用第一提取缓冲液和第二提取 缓冲液提取的CoQlO的量光谱学地测定，和用单独甲醇提取检测的CoQlO的量使用LC/MS/ MS测定。8. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述方法是高通量筛选分析方法的部 分。9. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中整个方法通过自动化完成。 1 〇.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中整个方法在短的时间段中完成。11. 如权利要求1、3-4和7-10中任一项所述的方法，其中与使用单独甲醇提取随后 LC/MS/MS的CoQlO检测而检测到的CoQlO的总量相比，所述样品使用第一提取缓冲液和第 二提取缓冲液提取并且CoQlO的量光谱学地测定，在样品中检测到的CoQlO的总量至少为 2倍。12. 如权利要求11所述的方法，其中与使用单独甲醇提取随后LC/MS/MS的CoQlO检测 而检测到的量相比，所述样品使用第一提取缓冲液和第二提取缓冲液提取并且CoQlO的量 光谱学地测定，在样品中检测到的CoQlO的总量为至少5倍。13. 如权利要求11所述的方法，其中与使用单独甲醇提取随后LC/MS/MS的CoQlO检测 而检测到的量相比，所述样品使用第一提取缓冲液和第二提取缓冲液提取并且CoQlO的量 光谱学地测定，在样品中检测到的CoQlO的总量为至少10倍。14. 如权利要求11所述的方法，其中与使用单独甲醇提取随后LC/MS/MS的CoQlO检测 而检测到的量相比，所述样品使用第一提取缓冲液和第二提取缓冲液提取并且CoQlO的量 光谱学地测定，在样品中检测到的CoQlO的总量为至少15倍。15. 如权利要求11所述的方法，其中与使用单独甲醇提取随后LC/MS/MS的CoQlO检测 而检测到的量相比，所述样品使用第一提取缓冲液和第二提取缓冲液提取并且CoQlO的量 光谱学地测定，在样品中检测到的CoQlO的总量为至少25倍。16. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述第二提取缓冲液包含非极性溶 剂。17. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述第二提取缓冲液包含有机溶剂。18. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述第二提取缓冲液包含选自于苯、 甲苯、二甲苯、己烷、庚烷、辛烷、环己烷、1，4-二氧六烷、氯仿、二乙醚、二异丙醚和二异丁基 醚、四氯化碳、二甲基甲酰胺（DMF)、氯甲烷和二氯甲烷的溶剂。19. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述第二提取缓冲液包含烷烃。20. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述第二提取缓冲液包含己烷。21. 根据权利要求1-15和17中任一项所述的方法，其中所述第二提取缓冲液包含乙 腈。22. 根据权利要求1-15和17中任一项所述的方法，其中所述第二提取缓冲液包含异丙 醇。23. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述第一提取缓冲液包含极性质子 溶剂。24. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述第一提取缓冲液包含有机溶剂。25. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述第一提取缓冲液包含选自于甲 酸、正丁醇、异丙醇、正丙醇，乙醇、甲醇、乙酸、三氯乙酸（TCA)和水的溶剂。26. 如权利要求25所述的方法，其中所述溶剂包含醇。27. 如权利要求26所述的方法，其中所述醇是甲醇。28. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述第一提取缓冲液包含表面活性 剂。29. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述第一提取缓冲液包含去垢剂。30. 如权利要求29所述的方法，其中所述去垢剂是温和的去垢剂。31. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述第一提取缓冲液是水性溶液。32. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述第一提取缓冲液包含类固醇酸。33. 如权利要求32所述的方法，其中所述类固醇酸是胆汁酸。34. 如权利要求33所述的方法，其中所述胆汁酸包含选自于牛黄胆酸、甘氨胆酸、胆 酸、鹅脱氧胆酸、脱氧胆酸和石胆酸的酸。35. 如权利要求33所述的方法，其中所述胆汁酸包含脱氧胆酸。36. 如权利要求35所述的方法，其中脱氧胆酸是盐。37. 如权利要求36所述的方法，其中所述脱氧胆酸盐包含的无机离子是I族金属。38. 如权利要求37所述的方法，其中所述脱氧胆酸盐的无机离子包含作为选自于Li+、 Na+和K+的盐的无机离子。39. 如权利要求34所述的方法，其中所述脱氧胆酸盐的无机离子包含作为钠离子的无 机离子。40. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述样品包含生物样品。41. 如权利要求40所述的方法，其中所述生物样品是基于细胞的样品。42. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述样品包含哺乳动物样品或两栖 动物样品。43. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述样品包含选自于人类样品、非人 灵长类动物样品和啮齿动物样品的样品。44. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述样品是来自于选自小鼠、大鼠、 豚鼠、兔和人的受试者的样品。45. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述光谱分析通过使用选自于吸收 光谱法、荧光X射线光谱法、火焰光谱法、可见光谱法、紫外光谱法、红外光谱法、近红外光 谱法、拉曼光谱法、相干反斯托克斯拉曼光谱法（CARS)、核磁共振光谱法、光子发射光谱法 和穆斯堡尔光谱法的光谱技术进行。46. 如权利要求45所述的方法，其中所述光谱技术是紫外光谱法。47. 如权利要求45或46所述的方法，其中所述紫外光谱法在270nm至280nm的一个或 多个波长处进行。48. 如权利要求45或46所述的方法，其中所述紫外光谱法在273nm至277nm的一个或 多个波长处进行。49. 如权利要求45或46所述的方法，其中所述紫外光谱在275nm的波长处进行。50. 根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述第一提取缓冲液的体积与所述 第二提取缓冲液的体积之比是5:1至1:1。51....
【专利技术属性】
技术研发人员：N·N·坦纳，R·萨兰加拉简，N·R·纳莱恩，S·栾，
申请(专利权)人：博格有限责任公司，
类型：发明
国别省市：美国;US
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