双特异性抗体分子制造技术

本发明专利技术涉及一种双特异性抗体分子以及其制备方法、其用途和编码双特异性抗体分子的核酸分子。本发明专利技术尤其是提供一种能够介导免疫细胞靶细胞限制性激活的抗体分子。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利摘要】本专利技术涉及一种双特异性抗体分子以及其制备方法、其用途和编码双特异性抗体分子的核酸分子。本专利技术尤其是提供一种能够介导免疫细胞靶细胞限制性激活的抗体分子。【专利说明】双特异性抗体分子 相关申请的夺叉引用 本专利申请要求2011年12月19日向美国专利商标局提交的美国临时申请 61/577,327的优先权权益，所述申请的全部内容并入本文用于全部目的。 专利
本专利技术涉及一种双特异性抗体分子以及其制备方法、其用途和编码双特异性抗体 分子的核酸分子。本专利技术尤其是提供一种能够介导免疫细胞靶细胞限制性激活的抗体分 子。 专利技术背景 针对抗原特异性T细胞受体（TCR)/CD3复合物的单克隆抗体能够有效激活T细 胞。然而，这种激活需要抗体-经由其Fc部分-在Fc受体表达细胞表面上多聚化，通常 也提供 T 细胞激活辅助信号（Davis，L.，Vida，R.和 Lipsky，P.E·，Regulation of human T lymphocyte mitogenesis by antibodies to CD3,J. Immunol. 137:3758-3767)〇 识别靶细胞上的抗原（例如，白血病细胞上的FLT3或⑶19,黑色素瘤细胞上的 CSPG4-抗原或胶质瘤细胞上的EGFR)和抗原特异性T细胞受体（TCR)/CD3复合物的双 特异性抗体，同样能够激活 T 细胞（Jung，G·，Ledbetter，J.A·，和 Muller-Eberhard，H. J., Induction of cytotoxicity in resting human T lymphocytes bound to tumor cells by antibody heteroconjugates, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A84:4611-4615 ； Jung, G. , &Eberhard, H. J. , An in-vitro model for tumor immunotherapy with antibody heteroconjugates,Immunol. Today9:257-260 ；Jung, G. , Brandi, M. , Eisner, W. , Fra unberger, P. , Reifenberger, G. , Schlegel, U. , Wiestler, 0. D. , Reulen, H. J. , Wilmanns, W. Local immunotherapy of glioma patients with a combination of 2 bispecific antibody fragments and resting autologous lymphocytes: evidence for in situ T-cell activation and therapeutic efficacy, Int J Cancer. 91:225-30)，此 外还能在祀细胞上集中活化细胞（Staerz，U. D.，Kanagawa，0·，和Bevan，M. J.，Hybrid antibodies can target sites for attack by T cells，Nature314:628-631 ; Perez, P. , Hoffman, R. W. , Shaw, S. , Bluestone, J. A.,和 Segal，D. M. Specific targeting of cytotoxic T cells by anti_T3 linked to anti-target cell antibody, Nature 316 : 354-356 ; Jung，G.，Honsik，C. J.，Reisfeld，R. A. 和Muller-Eberhard，H· J. Activation of human peripheral blood mononuclear cells by anti_T3:killing of tumor target cells coated with anti-target-anti_T3 conjugates, Proc. Natl. Acad. Sci.U. S.A，83:4479-4483, 1986)。因此，T细胞介导的肿瘤细胞溶解发生。T细胞共刺激 分子比如CD28的激动性抗体提高了抗-CD3介导的T细胞激活。如果这些共刺激抗体也 能以双特异性形式提供，它们会特别有效（Grosse-Hovest, L.，Hartlapp, I.，Marwan, W.，Br em, G. , Rammensee, H. G.,和 Jung, G.，A recombinant bispecific single-chain antibody induces targeted，supra-agonistic CD28_stimulation and tumor cell killing, Eur. J. Immunol. 33:1334-1340)。总之，对于含有CD3特异性的双特异性抗体的治疗应 用，我们认为与Fc受体结合能够被排除是绝对必要的（Jung，G.，和Eberiiard，H.J.，A n in-vitro model for tumor immunotherapy with antibody heteroconjugates, Immunol. Today 9: 257-260 ; Jung，G.，Freimann，U.，Von Marshall，Z.，Reisfeld，R. A.，和 Wilmanns, W. , Target cell-induced T cell activation with bi-and trispecific antibody fragments，Eur. J. Immunol. 21:2431-2435)。这种与 Fc 受体结合可能导 致T细胞体内激活，无论是否与靶抗原结合，所述T细胞体内激活会在其中可发现Fc受体 表达细胞的任何位置处出现，例如在全部造血、淋巴和网状内皮系统内。根据经验，这种 T细胞激活导致T细胞全身性激活，伴随细胞因子释放综合征，这是一种在T细胞激活细 胞因子或抗体的治疗应用过程中的严重不良反应（Rosenberg，S. A.，Lotze，Μ. T.，Yang，J. C. , Aebersold, P. M. , Linehan, W. M. , Seipp, C. A.,和 White，D. E.，Experience with the use of high-dose interleukin-2 in the treatment of 652 cancer patients, Ann. Surg. 210 : 474-484 ;Tibben，J. G.，Boerman，0· C.，Massuger，L. F.，Schi jf，C. P. , Claessens,R. A.,和 Corstens，F. H.，Phar本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种重组双特异性抗体分子，其由含有用于第一抗原的第一结合位点的Fab片段、含有用于第二抗原的第二结合位点的单链Fv片段和免疫球蛋白CH2结构域组成，其中所述Fab片段和所述单链Fv片段经由所述CH2结构域连接。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：G·荣格，M·都本，L·格罗塞霍维斯特，
申请(专利权)人：合成免疫股份有限公司，
类型：发明
国别省市：德国;DE