本发明专利技术公开了一种生产具有纤溶和抗氧化功能的蛹虫草菌丝粉的蛹虫草及其应用，所述蛹虫草为蛹虫草(Cordyceps militaris)YCC-RY-02，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏号：CGMCC NO.9350，保藏日期：2014年7月15日。本发明专利技术筛选出的蛹虫草YCC-RY-02，能够生产具有纤溶和抗氧化功能的蛹虫草菌丝粉。实验结果表明，本发明专利技术菌株生产的蛹虫草菌丝粉，其纤溶活性可达200IU/g，DPPH自由基清除率可达83.4％，Fe3+还原能力是豆粕粉的4.42倍。同时，本发明专利技术的方法具有操作简单，成本低，周期短、易于实现，原料来源丰富易取，成本低，无环境污染，所用设备、试剂价格便宜等优点，便于规模化生产。
【技术实现步骤摘要】
一种生产具有纤溶和抗氧化功能的蛹虫草菌丝粉的蛹虫草及其应用
本专利技术涉及一种生产具有纤溶和抗氧化功能的蛹虫草菌丝粉的蛹虫草，同时还涉及该蛹虫草的应用，属于微生物
技术介绍
随着人们生活节奏的加快和饮食习惯的调整，血栓性疾病显著增加，严重威胁着人类的健康与生命安全，每年死于脑梗塞、心肌梗死的病人多达几百万，居各种疾病之首。溶解血栓是治疗这类疾病的首选方法，因此，具有高纤溶活性的溶栓药物的研发日益受到人们的关注，有着广阔的发展前景。目前，溶栓剂研究的焦点之一，是通过枯草芽孢杆菌发酵生产具有高纤溶活性、口服有效的溶栓功能性食品和保健食品。另一方面，活性氧和自由基是人体新陈代谢过程的次生代谢产物，正常情况下总是处于不断产生和消除的动态平衡中，但如果其含量过高，动态平衡被打破，就会引发癌症、冠心病、动脉粥样硬化、糖尿病、神经系统失灵、免疫力降低、关节炎等疾病，其中动脉粥样硬化又可引起心脑血管疾病，产生血栓，因此，活性氧和自由基是心脑血管疾病的病因之一。目前有研究表明，食用功能性抗氧化食品补充抗氧化物质，是预防包括心脑血管疾病在内的多种疾病的有效措施之一。综上所述，活性氧和自由基是包括心脑血管疾病在内的多种疾病的病因，有抗氧化功能的食品和保健食品可以清除活性氧和自由基，因此也具有预防心脑血管疾病的作用；而高纤溶活性的保健食品可有效溶解已经形成的血栓，从而治疗心脑血管疾病，如能研发一种具有纤溶活性和抗氧化功能的功能性食品，则既具有从根源上预防心血管疾病发生的功能，又能够在血栓产生后具有治疗效果，从而达到预防和治疗相结合的目的，但目前还没有相关研究的报道。蛹虫草(Cordycepsmilitaris)又名北冬虫夏草，含有多种活性物质，具有抗肿瘤、抗病毒、抗菌、降血压、降血糖等多种生物活性，是国家新近批准的新资源食品，具有良好的安全可靠性。目前有一些关于蛹虫草纤溶酶功能方面的报道；也有研究指出，蛹虫草具有一定的抗氧化作用，但还未见既有纤溶活性又有抗氧化作用的蛹虫草的相关报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种生产具有纤溶和抗氧化功能的蛹虫草菌丝粉的蛹虫草及其应用，采用本专利技术的蛹虫草生产得到的蛹虫草菌丝粉，既有较高纤溶活性又有显著的抗氧化作用，且生产方法具有操作简单，成本低，周期短和易于实现的优点。本专利技术为防治心脑血管疾病药物的研发提供了实验基础，为蛹虫草菌丝体的生产提供了一种新的途径，并为蛹虫草作为功能性食品和保健食品的开发应用研究提供了新的思路。为了实现以上目的，本专利技术所采用的技术方案是提供一种生产具有纤溶和抗氧化功能的蛹虫草菌丝粉的蛹虫草，所述蛹虫草为蛹虫草(Cordycepsmilitaris)YCC-RY-02，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏号：CGMCCNO.9350，保藏日期：2014年7月15日。本专利技术筛选出的蛹虫草菌株YCC-RY-02，能够生产具有纤溶和抗氧化功能的蛹虫草菌丝粉。实验结果表明，本专利技术菌株生产的蛹虫草菌丝粉，其纤溶活性可达200IU/g，DPPH自由基清除率可达83.4％，Fe3+还原能力是豆粕粉的4.42倍。本专利技术所采用的技术方案还在于提供一种蛹虫草在生产具有纤溶和抗氧化功能的蛹虫草菌丝粉方面的应用。本专利技术蛹虫草生产具有纤溶和抗氧化功能的蛹虫草菌丝粉的方法，包括以下步骤：(1)挑取蛹虫草接种于PDA液体种子培养基，在22-25℃条件下，120-180rpm摇床恒温培养4-8d，得到蛹虫草种子液；(2)在豆粕中加入水，高压灭菌，冷却至室温后，按照1-8％的接种量接种蛹虫草种子液，在22-28℃条件下发酵培养4-8d；(3)将步骤(2)的蛹虫草豆粕培养物低温真空冷冻干燥，粉碎，过80-120目筛即得。步骤(1)中PDA液体种子培养基制备方法为：马铃薯去皮，秤取200g，加1000mL水煮沸30min，冷却后四层纱布过滤，滤液中加入10g葡萄糖、5g蛋白胨、1gKH2PO4·7H2O、0.5gMgSO4·7H2O，调pH6.0，定容至1000mL，121℃灭菌20min，用前加入0.02g过滤除菌的VB1。步骤(1)中摇床恒温培养时间为5-7d。步骤(2)中加水的重量为豆粕重量的0.8-1.2倍。步骤(3)中低温真空冷冻干燥的条件为：预冷温度﹣50℃，真空度20-100Pa，冻干温度≤﹣45℃，冻干时间24-48h。本专利技术中冷冻干燥选择低温真空冷冻干燥，而不采用喷雾干燥，目的是为了更好地保持所得发酵产物的纤溶活性和抗氧化活性。本专利技术利用筛选得到的蛹虫草发酵生产具有纤溶和抗氧化功能的蛹虫草菌丝粉，该方法具有操作简单，成本低，周期短和易于实现的优点。同时，本专利技术原料来源丰富易取，成本低，无环境污染，所用设备、试剂价格便宜，便于规模化生产。附图说明以下结合附图对本专利技术的具体实施方式作进一步详细说明。图1为本专利技术蛹虫草菌丝粉浸提液纤溶酶活性测定结果；图2为本专利技术蛹虫草菌丝粉浸提液DPPH自由基清除率测定结果；其中，a为GSH，b、c、d、e、f分别为蛹虫草菌株YCC-RY-02发酵4d、5d、6d、7d、8d的样品浸提物，g为豆粕粉浸提物；图3为本专利技术蛹虫草菌丝粉浸提液Fe3+还原能力测定结果；其中，a为GSH，b、c、d、e、f分别为蛹虫草菌株YCC-RY-02发酵4d、5d、6d、7d、8d的样品浸提物，g为豆粕粉浸提物。具体实施方式以下结合实施例对本专利技术的具体实施方式作进一步详细说明。实施例11、菌株的分离筛选将2011年8月在河南省汝阳县王坪乡采集的野生新鲜蛹虫草菌株，用清水洗去表面浮土，于75％乙醇中表面消毒2min，在无菌水中反复冲洗，置于无菌滤纸上晾干。用无菌解剖刀将消毒后的蛹虫草子座切成长度约0.5-1.0cm的小段，接种于PDA培养基平板上，于25℃的培养箱中倒置培养。菌丝萌发生长后，选择无污染的菌丝，转接到新的PDA培养基平板上进一步培养，最终得到纯化的蛹虫草菌株。将分离得到的蛹虫草菌株，接入液体PDA培养基，25℃，160prm摇床发酵培养7d，取发酵液，在纤维蛋白平板上测定其纳豆激酶活性，重复3次，最后选择纳豆激酶活性较高的菌株，命名为YCC-RY-02。菌株YCC-RY-02的特征如下：形态特征：于25℃PDA平板上培养5-7d后，YCC-RY-02菌株生长成直径15-30mm的白色菌落，菌丝洁白、粗壮、致密、有光泽，显微镜下可以看到，菌丝细胞多核、纤细；子囊孢子为线形、多细胞，169.78-364.57×1.72-2.04μm，在大米培养基上25℃培养2-3个月，菌丝体发育进入一个新的阶段，形成橘黄色顶部略膨大、呈棒状、少分枝、可见纵沟、高1-4cm、直径5-7mm的子座(子实体)。ITS序列测定：提取菌株YCC-RY-02的基因组DNA，后用ITS序列通用引物PCR扩增，得到的PCR产物用1％凝胶电泳检测后，送北京华大基因公司测序，其测定结果如下：经ITS序列分析表明，YCC-RY-02为蛹虫草(Cordycepsmilitaris)菌株。实施例2本实施例用蛹虫草生产具有纤溶和抗氧化功能的蛹虫草菌丝粉的方法，包括以下步骤：(1)挑取蛹虫草接种于PDA液体种子培养基，在25℃条件下本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种生产具有纤溶和抗氧化功能的蛹虫草菌丝粉的蛹虫草，其特征在于，所述蛹虫草为蛹虫草(Cordyceps militaris)YCC‑RY‑02，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏号：CGMCC NO.9350，保藏日期：2014年7月15日。
【技术特征摘要】
1.一种生产具有纤溶和抗氧化功能的蛹虫草菌丝粉的蛹虫草，其特征在于，所述蛹虫草为蛹虫草(Cordycepsmilitaris)YCC-RY-02，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏号：CGMCCNO.9350，保藏日期：2014年7月15日；所述的蛹虫草生产具有纤溶和抗氧化功能的蛹虫草菌丝粉的方法，包括以下步骤：(1)挑取蛹虫草接种于PDA液体种子培养基，在22-25℃条件下，120-180rpm摇床恒温培养4-8d，得到蛹虫草种子液；(2)在豆粕中加入水，高压灭菌，冷却至室温后，按照1-8％的接种量接种蛹虫草种子液，在22-28℃条件下发酵培养4-8d；(3)将步骤(2)的蛹虫草豆粕培养物低温真空冷冻干燥，粉碎，过80-120目筛即得。2.一种如权利要求1所述的蛹虫草在生产具有纤溶和抗氧化功能的蛹虫草菌丝粉方面的应用。3.根据权利要求1所述的生产具有...
【专利技术属性】
技术研发人员：周伏忠，陈晓飞，孙玉飞，慕琦，陈国参，王雪妍，冯菲，
申请(专利权)人：河南省科学院生物研究所有限责任公司，
类型：发明
国别省市：河南;41
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。