一种棘孢木霉SFC-3发酵产孢子的培养基及其应用制造技术

本发明专利技术涉及棘孢木霉SFC

【技术实现步骤摘要】
一种棘孢木霉SFC
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3发酵产孢子的培养基及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物领域，特别是一种棘孢木霉SFC
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3发酵产孢子的培养基及其应用。

技术介绍

[0002]棘孢木霉（Trichodermaasperellum）属于木霉属半知菌亚门，丝孢纲，丛梗孢目，丛梗孢科，粘孢菌类，是广泛存在于土壤及其它植物中的一类重要真菌。试验表明，棘孢木霉不仅对植物生长促进作用显著，在植物病害方面也有较好防治效果且防治效果要优于化学防治。如今，棘孢木霉制剂被广泛应用于农林生产中来防治病原微生物，既能较好抑制多种病原菌，降低植物病害，同时也能减少对化学药剂的使用，减少土壤中的农药残留。
[0003]双黄连是常见的中成药，有清热解毒的功效。双黄连是由金银花、黄芩和连翘制成，所述的双黄连药渣是生产双黄连的过程中经过溶媒或其他方式提取后产生的残渣部分。随着中药的发展，每年产生的药渣量巨大。现阶段的技术中药中有效成分的提取率为30%～70%，药渣中不仅存留许多的粗蛋白、粗多糖、淀粉等营养成分，而且还含有多种其他的药物有效成分。传统的药渣处理方法是通过焚烧或者掩埋处理,这样不仅造成了资源的浪费，还对环境造成了一定的污染。研究发现药渣中残留的成分可作为培养基来固体发酵真菌，进而制成生物制剂。本专利技术以双黄连药渣为底物（基质），运用响应面法对棘孢木霉SFC
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3进行不同条件下的固体发酵，测定棘孢木霉SFC
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3的产孢子情况，进而优化棘孢木霉SFC
‑r/>3产孢子的固体发酵条件。既可以减少资源的浪费，也能为利用双黄连药渣发酵真菌提供理论参考和技术支持。
[0004]现虽有利用双黄连药渣发酵培养基对有益菌进行培养，但由于组分和用量上存在的问题，其使用并不尽人意，特别是如何应用于棘孢木霉SFC
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3发酵产孢子的含有双黄连药渣的培养基，并高产棘孢木霉SFC
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3孢子，至今未见有公开报导。

技术实现思路

[0005]针对上述情况，为克服现有技术之不足，本专利技术之目的就是提供一种棘孢木霉SFC
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3发酵产孢子的培养基及其应用，可有效解决利用发酵培养基培养高产棘孢木霉SFC
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3孢子，既可满足农林生产中对棘孢木霉的需要，又可防止资源浪费和对环境的污染问题。
[0006]本专利技术解决的技术方案是，利用响应面法对棘孢木霉SFC
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3固体发酵的培养基进行优化，设计Plackett－Burman试验对影响棘孢木霉SFC
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3固体发酵产孢子的关键因子进行筛选；通过最陡爬坡试验确定重要因子的最适浓度范围；设计响应面实验，选取最陡爬坡实验中的响应因子取值范围建立响应面模型，通过Design Exper8.0软件进行分析并根据实际值拟合出响应因子与实验因子的二次回归方程，确定优化条件，进而给出本专利技术的一种棘孢木霉SFC
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3发酵产孢子的培养基及其应用，据此，本专利技术一种棘孢木霉SFC
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3发酵产孢子的培养基，是由以下重量比计的双黄连药渣︰玉米粉︰硫酸镁︰硫酸铵︰豆饼︰磷酸二氢钾︰氯化锰︰碳酸钙＝100︰1.7
‑
2.0︰0.55
‑
0.65︰1.2
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1.25︰1.45
‑
1.55︰0.3
‑
0.5︰0.5
‑
0.8︰
0.3
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0.5作固体物，加水使含水量至50
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60％制成；所述的棘孢木霉SFC
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3，分类命名棘孢木霉(Trichoderma asperellum)，2018年8月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号码：CGMCC No.16097，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
[0007]该培养基在发酵培养棘孢木霉SFC
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3孢子中的应用，方法是：在培养基中，以培养基重量10%～20%的接种量接入棘孢木霉SFC
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3种子液，种子液浓度105～106CFu/mL，25℃～30℃发酵培养7～10天，产孢子量为3.25
×
109CFu/mL～3.54
×
10
10
CFu/mL。
[0008]本专利技术原料丰富，制备方法简单，可以充分利用双黄连药渣作基质制备棘孢木霉SFC
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3培养基，废物利用，节约资源，有效用于发酵培养棘孢木霉孢子，产孢量高，既满足农林生产中对棘孢木霉的需要，又防止资源浪费和对环境的污染，是棘孢木霉SFC
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3培养上的一大创造，有巨大的经济和社会效益。
附图说明
[0009]图1为本专利技术的玉米粉
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硫酸镁等高线图（A）和响应面图（B）。
[0010]图2为本专利技术的玉米粉
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硫酸铵等高线图（A）和响应面图（B）。
[0011]图3为本专利技术硫酸镁
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硫酸铵等高线图（A）和响应面图（B）。
[0012]图4为本专利技术最优培养基条件下产孢值示意图。
具体实施方式
[0013]以下结合具体情况和实施例对本专利技术的具体实施方式作详细说明。
[0014]本专利技术在具体实施中可由以下实施例给出。
[0015]实施例1本专利技术一种棘孢木霉SFC
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3发酵产孢子的培养基，是由以下重量比计的双黄连药渣︰玉米粉︰硫酸镁︰硫酸铵︰豆饼︰磷酸二氢钾︰氯化锰︰碳酸钙＝100︰1.74︰0.6︰1.21︰1.5︰0.4︰0.75︰0.4作固体物，加水使含水量至60%制成。
[0016]实施例2本专利技术一种棘孢木霉SFC
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3发酵产孢子的培养基，是由以下重量比计的双黄连药渣︰玉米粉︰硫酸镁︰硫酸铵︰豆饼︰磷酸二氢钾︰氯化锰︰碳酸钙＝100︰1.96︰0.58︰1.24︰1.48︰0.45︰0.55︰0.48作固体物，加水使含水量至52%制成。
[0017]实施例3本专利技术一种棘孢木霉SFC
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3发酵产孢子的培养基，是由以下重量比计的双黄连药渣︰玉米粉︰硫酸镁︰硫酸铵︰豆饼︰磷酸二氢钾︰氯化锰︰碳酸钙＝100︰1.85︰0.62︰1.21︰1.53︰0.35︰0.75︰0.32作固体物，加水使含水量至58%制成。
[0018]实施例4本专利技术一种棘孢木霉SFC
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3发酵产孢子的培养基，是由以下组分制成：双黄连药渣20g、玉米粉0.35g、硫酸镁0.12g、硫酸铵0.24g、豆饼0.30g、磷酸二氢钾0.08g、氯化锰0.15g和碳酸钙0.08g混匀，加水使含水量至55%。
[0019]实施例1
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4培养基在发酵培养产棘孢木霉SFC
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3孢子中的应用。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种棘孢木霉SFC
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3发酵产孢子的培养基，其特征在于，由以下重量比计的双黄连药渣︰玉米粉︰硫酸镁︰硫酸铵︰豆饼︰磷酸二氢钾︰氯化锰︰碳酸钙＝100︰1.7
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2.0︰0.55
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0.65︰1.2
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1.25︰1.45
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1.55︰0.3
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0.5︰0.5
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0.8︰0.3
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0.5作固体物，加水使含水量至50
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60%制成；所述的棘孢木霉SFC
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3，2018年8月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号码：CGMCC No.16097，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。2.根据权利要求1所述的棘孢木霉SFC
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3发酵产孢子的培养基，其特征在于，由以下重量比计的双黄连药渣︰玉米粉︰硫酸镁︰硫酸铵︰豆饼︰磷酸二氢钾︰氯化锰︰碳酸钙＝100︰1.74︰0.6︰1.21︰1.5︰0.4︰0.75︰0.4作固体物，加水使含水量至60%制成。3.根据权利要求1所述的棘孢木霉SFC
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3发酵产孢子的培养基，其特征在于，由以下重量比计的双黄连药渣︰玉米粉︰硫酸镁︰硫酸铵︰豆饼︰磷酸二氢钾︰氯化...

【专利技术属性】
技术研发人员：李磊，王继雯，关建丽，李亮亮，甄静，周留柱，陈国参，陈登辉，
申请(专利权)人：河南省科学院生物研究所有限责任公司，
类型：发明
国别省市：