一种猪用液态菌酶协同饲料添加剂的制备方法及其应用技术

本发明专利技术涉及猪用液态菌酶协同饲料添加剂的制备方法及其应用，可有效解决制备液态菌酶协同饲料添加剂，实现在猪饲料中的应用问题，该添加剂的制备方法是，以无菌水为载体，加入添加剂质量20～50%的菌保护剂，再加入添加剂质量0.1～0.3%的酶保护剂，加入添加剂质量0.05～0.25%的稳定剂，制成添加剂基础液；然后加入有益菌，使有益菌浓度≥4

【技术实现步骤摘要】
一种猪用液态菌酶协同饲料添加剂的制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及饲料添加剂
，特别是一种猪用液态菌酶协同饲料添加剂的制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]目前我国养猪产业正处于转型升级的关键阶段，面临诸多问题，其亟待解决的问题一是禁抗“后时代”带来的猪生长性能下降、死亡率升高等一系列问题；二是面对全球粮食危机凸显，“人畜争粮”矛盾加剧，饲料成本越来越高等问题。特别是面对无抗、环保、饲料原料紧缺、食品安全等多重压力，为寻求绿色安全的“替抗”产品，对猪饲料行业提出了严峻的挑战，亟需新的技术、产品和模式来带动行业的可持续发展。以发酵饲料为代表的生物饲料具有提高动物饲料利用率和适口性、降低或消除饲料原料中的抗营养因子和真菌毒素；改善猪的肠道屏障功能，维持其肠道菌群微生态平衡、增强机体免疫功能、提高动物抗病力，减少排泄物中有害物质和臭味物质的含量，消除常规饲料在喂养过程中产生的粉尘，避免常规饲料因粉尘不断刺激动物呼吸系统造成免疫力下降，调控猪的脂质代谢，提高肉色红度、肌内脂肪含量和肌肉嫩度，改善猪肉脂肪酸(油酸、亚油酸、亚麻酸等)、风味氨基酸(谷氨酸、天冬氨酸等)、挥发性风味物质(醇、醛、酮)，提高猪肉品质等诸多优点；凸显了其在猪养殖过程中饲料替代、减少抗生素使用、提高宿主免疫力和抵抗疾病发生等方面的潜在作用，在众多的挑战和选择中应运而生。菌酶协同发酵饲料由于兼顾了菌、酶以及发酵的元素，对饲料和饲料原料的作用效果优于单独的菌或酶处理效果，且前者在改善饲料营养价值和饲喂效果方面表现出明显的优势。
[0003]虽然菌酶协同发酵已成为目前应用最为广泛的发酵饲料生产方式，但目前仍然停留在理论研究阶段，在复杂原料的处理方面，缺乏稳定的效果和完善的应用方案，亦未见利用液态菌酶协同发酵饲料添加剂在猪饲料中应用的公开报导。

技术实现思路

[0004]针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本专利技术之目的就是提供一种猪用液态菌酶协同饲料添加剂的制备方法及其应用，可有效解决制备液态菌酶协同饲料添加剂，实现在猪饲料中的应用问题。
[0005]本专利技术解决的技术方案是，一种猪用液态菌酶协同饲料添加剂的制备方法，该添加剂是由有益菌、活性酶、酶保护剂、菌保护剂、稳定剂和无菌水混合均匀制成，包括以下步骤：
[0006](1)、制备种子液：
[0007]将有益菌接种到种子液培养基中，34～37℃培养18～24h复壮，制备成有效活菌数≥1
×
108CFU/mL的种子液；
[0008]所述的有益菌为植物乳杆菌、乳酸片球菌、粪肠球菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、丁酸梭状芽孢杆菌、酿酒酵母中的一种或其任意比的混合物；
[0009]所述的种子液培养基为MRS培养基，是由10g蛋白陈、5g牛肉粉、4g酵母粉、2g葡萄糖、1mL吐温80、2g磷酸氢二钾、5g乙酸钠、2g柠檬酸三铵、0.2g硫酸镁、0.05g硫酸锰和15g琼脂粉加入1000mL蒸馏水中，加热溶解，调节pH6，121℃高压灭菌15～20分钟制成；
[0010](2)、制备发酵液：
[0011]将种子液接种于优化的发酵培养基中，接种量均为发酵培养基体积的2～5％，34～37℃培养16～24h，发酵液中的残糖为0～3g/L，有益菌的活菌数≥2.4
×
109/mL；
[0012]所述的优化后的发酵培养基是由重量百分比的：红糖或糖蜜2～5％、酵母浸粉1～1.8％、磷酸氢二钾0.18～0.25％、硫酸镁0.001～0.003％和吐温
‑
80 0.08～0.1％，加无菌水至100％制成；
[0013](3)、制备活性酶：
[0014]所述的活性酶为纤维素酶、木聚糖酶、β
‑
葡聚糖酶、植酸酶、果胶酶、β
‑
甘露聚糖酶、α
‑
半乳糖苷酶中的一种或两种以上的混合物，分别加无菌水制成800～1000U/L的纤维素酶、1500～1800U/L的木聚糖酶、500～800U/L的β
‑
葡聚糖酶、500～800U/L的植酸酶、800～1500U/L的果胶酶、400～1000U/L的β
‑
甘露聚糖酶、80～200U/L的α
‑
半乳糖苷酶；
[0015](4)、酶保护剂的选择：
[0016]所述的酶保护剂为EDTA(乙二胺四乙酸)；
[0017](5)、菌保护剂的选择：
[0018]经研究和实验发现，甘油无色、无臭、味甜，外观呈澄明黏稠液态，是一种有机物，能从空气中吸收潮气，也能吸收硫化氢、氰化氢和二氧化硫，保护生物分子结构不被破坏，有效应用于食品甜味剂；海藻糖是一种典型应激代谢物，能够在高温、高寒、高渗透压及干燥失水等恶劣环境条件下在细胞表面形成独特的保护膜，有效地保护生物分子结构不被破坏，从而维持生命体的生命过程和生物特征；壳聚糖具有生物降解性、细胞亲和性和生物效应等许多独特的性质，是天然多糖，对细胞有很好的亲和性，不会产生排斥反应；低聚果糖拥有保健功能确切和食品配料优良的双重品格，促进细菌增殖，促进乳酸杆菌、双歧杆菌和链球菌等有益菌在消化道中的定植，抑制有害细菌生长，改善肠道菌群，间接达到对动物体的营养及促生长效应；低聚异麦芽糖可促使体内的有益菌显著增殖，具水溶性膳食纤维功能，改善食品口感，不妨碍正常乳酸菌发酵，甜度低、热量低，基本上不增加血糖血脂。因此，本专利技术中选择甘油、海藻糖、壳聚糖、低聚果糖或低聚异麦芽糖作为菌保护剂；
[0019](6)、稳定剂的选择：
[0020]经研究和实验发现，海藻酸钠或黄原胶具有很好的物理和化学性能，有效用于在食品生产中作为稳定剂，是天然微生物多糖；瓜尔胶是豆科植物瓜尔豆的提取物，在冷水和热水中有出众的分散能力，不会产生结团现象，无生物毒性；卡拉胶是从麒麟菜、石花菜、鹿角菜等红藻类海草中提炼出来的亲水性胶体，提高稳定性，因此，本专利技术选择海藻酸钠、黄原胶、瓜尔胶或卡拉胶作为稳定剂；
[0021](7)、混配制成猪用液态菌酶协同饲料添加剂：
[0022]将上述有益菌、活性酶、酶保护剂、菌保护剂和稳定剂加入无菌水，混配均匀，制成猪用液态菌酶协同饲料添加剂，方法是：
[0023]首先以无菌水为载体，加入饲料添加剂质量20～50％的菌保护剂，再加入饲料添加剂质量0.1～0.3％的酶保护剂，加入饲料添加剂质量0.05～0.25％的稳定剂，制成饲料
添加剂基础液；然后加入有益菌，使有益菌浓度≥4
×
108CFU/mL，最后加入活性酶，使饲料添加剂中活性酶的活力为80～1800U/L，用磷酸盐缓冲液调pH5
‑
6，即成猪用液态菌酶协同饲料添加剂；
[0024]所述的磷酸盐缓冲液为公知市售PBS缓冲液，pH7.0～8.0。
[0025]本专利技术方法制备的猪用液态菌酶协同饲料添加剂添加在猪饲料中的应用，添加量为每一吨基础日粮中加入500mL饲本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种猪用液态菌酶协同饲料添加剂的制备方法，其特征在于，该添加剂是由有益菌、活性酶、酶保护剂、菌保护剂、稳定剂和无菌水混合均匀制成，包括以下步骤：（1）、制备种子液：将有益菌接种到种子液培养基中，34～37℃培养18～24h复壮，制备成有效活菌数≥1
×
108CFU/mL的种子液；所述的有益菌为植物乳杆菌、乳酸片球菌、粪肠球菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、丁酸梭状芽孢杆菌、酿酒酵母中的一种或其任意比的混合物；所述的种子液培养基为MRS培养基，是由10g蛋白陈、5g牛肉粉、4g酵母粉、2g葡萄糖、1mL吐温80、2g磷酸氢二钾、5g乙酸钠、2g柠檬酸三铵、0.2g硫酸镁、0.05g硫酸锰和15g琼脂粉加入1000mL蒸馏水中，加热溶解，调节pH6，121℃高压灭菌15～20分钟制成；（2）、制备发酵液：将种子液接种于优化的发酵培养基中，接种量均为发酵培养基体积的2～5%，34～37℃培养16～24h，发酵液中的残糖为0～3g/L，有益菌的活菌数≥2.4
×
109/mL；所述的优化后的发酵培养基是由重量百分比的：红糖或糖蜜2～5%、酵母浸粉1～1.8%、磷酸氢二钾0.18～0.25%、硫酸镁0.001～0.003%和吐温
‑
80 0.08～0.1%，加无菌水至100%制成；（3）、制备活性酶：所述的活性酶为纤维素酶、木聚糖酶、β
‑
葡聚糖酶、植酸酶、果胶酶、β
‑
甘露聚糖酶、α
‑
半乳糖苷酶中的一种或两种以上的混合物，分别加无菌水制成800～1000U/L的纤维素酶、1500～1800U/L的木聚糖酶、500～800U/L的β
‑
葡聚糖酶、500～800U/L的植酸酶、800～1500U/L的果胶酶、400～1000U/L的β
‑
甘露聚糖酶、80～200U/L的α
‑
半乳糖苷酶；（4）、混配制成猪用液态菌酶协同饲料添加剂：将有益菌、活性酶、酶保护剂、菌保护剂和稳定剂加入无菌水，混配均匀，制成猪用液态菌酶协同饲料添加剂，方法是：首先以无菌水为载体，加入饲料添加剂质量20～50%的菌保护剂，再加入饲料添加剂质量0.1～0.3%的酶保护剂，加入饲料添加剂质量0.05～0.25%的稳定剂，制成饲料添加剂基础液；再加入有益菌，使有益菌浓度≥4
×
108CFU/mL，然后加入活性酶，使饲料添加剂中活性酶的活力为80～1800U/L，用磷酸盐缓冲液调pH5
‑
6，即成猪用液态菌酶协同饲料添加剂；所述的酶保护剂为EDTA；所述的菌保护剂为甘油、海藻糖、壳聚糖、低聚果糖、低聚异麦芽糖或其任意比的混合物；所述的稳定剂为海藻酸钠、黄原胶、瓜尔胶、卡拉胶或其任意比的混合物。2.根据权利要求1所述的猪用液态菌酶协同饲料添加剂的制备方法，其特征在于，该添加剂是由无菌水作载体，加入添加剂总重量：20%甘油、0.2%海藻酸钠、0.05%黄原胶、0.2% EDTA混合在一起，加入有效活菌数≥1
×
108CFU/mL的植物乳杆菌、乳酸片球菌和粪肠球菌种子液，使活菌数达到4
×
108CFU/mL，再加入纤维素酶900U/L、植酸酶650U/L、β
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葡聚糖酶700U/L、木聚糖酶1600U/L，添加无菌水至100%，混匀，用磷酸盐缓冲液调pH5.5，即成猪用液态菌酶协同饲料添加剂。3.根据权利要求1所述的猪用液态菌酶协同饲料添加剂的制备方法，其特征在于，该添
加剂是由无菌水作载体，加入添加剂总重量：20%甘油、30%海藻糖、0.1%海藻酸钠、0.05%黄原胶、0.1% EDTA混合在一起，加入有效活菌数≥1
×
108CFU/mL的植物乳杆菌、乳酸片球菌和粪肠球菌种子液，使活菌数达到4
×
108CFU/mL，再加入β
‑
甘露聚糖酶700U/L、果胶酶1100U/L、α
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半乳糖苷酶140U/L，添加无菌水至100%，混匀，用磷酸盐缓冲液调pH6.0，制成猪用液态菌酶协同饲料添加剂。4.根据权利要求1所述的猪用液态菌酶协同饲料添加剂的制备方法，其特征在于，该添加剂是由无菌水...

【专利技术属性】
技术研发人员：张宗源，张英涛，岳丹丹，陈盈方，周留柱，李冠杰，徐宏光，郭文阳，亓兰达，潘梦诗，王雪妍，
申请(专利权)人：河南省科学院生物研究所有限责任公司，
类型：发明
国别省市：