基于亚硝酸盐还原酶的工程菌及其实现方法技术

本发明专利技术涉及基因工程技术领域的亚硝酸盐还原酶的工程菌及其实现方法，以灰略红链霉菌基因组DNA为模板，与含有酶切位点的引物进行PCR扩增依次得到编码亚硝酸盐还原酶大亚基及亚硝酸盐还原酶小亚基的核苷酸序列；然后将扩增得到的基因序列依次连接到共表达载体pETDuet‐1，最终获得重组共表达载体pETDuet‐NC‐ND；之后将该亚硝酸盐还原酶表达载体转化到大肠杆菌表达菌株。本发明专利技术针对现有技术存在的由于亚硝酸盐还原酶在生物体内多为胞内酶且表达量较低导致的应用范围和效果严重受限等不足，能够应用基因工程手段实现亚硝酸盐还原酶体外的大量表达合成，对于次生盐渍化土壤的快速修复乃至实现精准农业具有重大意义。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种亚硝酸盐还原酶的工程菌，其特征在于，该工程菌为外源表达亚硝酸盐还原酶的大肠杆菌；所述的胞内亚硝酸盐还原酶具体为灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)JSD‐1亚硝酸盐还原酶编码基因，由亚硝酸盐还原酶大亚基SG‐NC和亚硝酸盐还原酶小亚基SG‐ND构成，其核苷酸序列分别为2601bp和354bp，分别编码866和117个氨基酸，其中：亚硝酸盐还原酶大亚基SG‐NC的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，氨基酸序列如SEQ ID No.3所示；亚硝酸盐还原酶小亚基SG‐ND的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周培，冯海玮，支月娥，唐冬，孙玉静，毛亮，罗艳青，卫星，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：上海;31