还原力的分析方法以及还原力的分析试剂技术

技术编号:12150222 阅读:75 留言:0更新日期:2015-10-03 11:01
本发明专利技术涉及还原力的分析方法以及还原力的分析试剂。本发明专利技术提供能够抑制试样中的峰值波长的偏移的还原力的分析方法。为了解决本发明专利技术的问题,本发明专利技术的还原力的分析方法的特征在于,包括还原步骤,在试样的存在下,在pH2.4以下的条件下,对含有三价铁化合物和氰化物的色素试剂进行还原;以及光学测定步骤,对所述还原步骤中得到的还原体的峰值波长进行光学测定。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及还原力的分析方法以及还原力的分析试剂
技术介绍
在氧化应激状态下,通过生物体内发生的过氧化物以及自由基,蛋白质、脂质、DNA等受损伤。并且,已知通过积累这样的损伤,能够引起例如心血管疾病、神经系统疾病等。另一方面,已知这样的过氧化物以及自由基通过生物体内的具有还原力的抗氧化物质而被无害化。因此,通过分析作为针对氧化应激的抵抗性的指标之一的还原力,尝试预防所述疾病以及把握所述疾病的病理状态。由三价铁离子和氰化物的反应产生的血红色的色素试剂通过还原反应而褪色。由此,作为试样的还原力的分析方法,使用通过使所述色素试剂和所述试样接触,来由所述试样还原所述色素试剂,并光学测定所述色素试剂的褪色的程度的方法(专利文献I)。现有技术文献专利文献专利文献专利文献1:日本专利特开2009-257909号公报
技术实现思路
专利技术要解决的问题在利用所述三价铁离子和所述氰化物的色素试剂的还原力的分析方法中,本专利技术者等发现了在分析试样的还原力的情况下,在含有所述色素试剂和所述试样的反应体系中发生光学信号的峰值波长偏移的问题。所述光学信号的峰值波长的偏移是指试样所示的本来的光学信号和通过测定而得到的表面上的光学信号之间的误差的产生。因此,基于光学信号计算出的还原力中也会产生误差,定量结果的可靠性变得不充分。由此,本专利技术的目的在于,提供在分析了试样的还原力的情况下,能够抑制所述光学信号的峰值波长的偏移的还原力的分析方法。用于解决问题的手段为了解决本专利技术的问题,本专利技术的还原力的分析方法的特征在于,包括:还原步骤,在试样的存在下,在PH2.4以下的条件下,对含有三价铁化合物和氰化物的色素试剂进行还原;以及光学测定步骤,对所述还原步骤中得到的还原体的峰值波长进行光学测定。本专利技术的还原力的分析试剂的特征在于,所述分析试剂包括含有三价铁化合物和氰化物的色素试剂以及PH调节剂,所述pH调节剂是强酸性试剂,所述分析试剂用于所述本专利技术的分析方法中。专利技术效果通过本专利技术者等的锐意研宄,已知在所述试样的还原力的分析中,含有所述色素试剂和所述试样的反应体系中的光学信号的峰值波长的偏移的起因是所述试样中含有的白蛋白以及蛋氨酸。并且,虽然原理不明确,但发现通过在PH2.4以下的条件进行所述还原步骤,来能够抑制所述反应体系中的光学信号的峰值波长的偏移,并完成了本专利技术。其结果为,根据本专利技术,在所述试样的还原力的分析中,不受到所述试样中的成分的影响,能够抑制所述反应体系中的光学信号的峰值波长的偏移。因此,根据本专利技术,基于所述光学信号,能够降低分析了还原力时的误差,能够以更优异的可靠性进行试样的还原力的分析。因此,本专利技术例如在针对源自生物体等的各种试样的临床检查等中极其有用。【附图说明】图1是示出实施例1中的吸光度的结果的曲线图;图2是示出实施例1中的吸光度的结果的曲线图;图3的(A)-(C)是示出实施例2中的吸光度的结果的曲线图;图4是示出实施例2中的不同的pH中的峰值波长的波长的曲线图;图5是示出实施例3中的还原力的结果的曲线图。【具体实施方式】 <还原力的分析方法>如前述,本专利技术的还原力的分析方法的的特征在于,包括:还原步骤,在试样的存在下,在pH2.4以下的条件下,对含有三价铁化合物和氰化物的色素试剂进行还原;以及光学测定步骤,对所述还原步骤中得到的还原体的峰值波长进行光学测定。本专利技术的分析方法的特征在于,在PH2.4以下的条件下进行所述还原步骤,对于其他步骤以及条件,没有特别的限制。如前述,本专利技术的分析方法能够抑制所述反应体系中的光学信号的峰值波长的偏移。因此,本专利技术的分析方法也可以称为抑制峰值波长的偏移的方法。在本专利技术中,所述还原步骤的所述色素试剂的还原是通过所述试样的还原力的还原。在所述光学测定步骤中,“所述还原步骤中得到的还原体”是指所述色素试剂被进行还原。本专利技术的分析方法例如可以是对于所述试样的还原力的有无进行分析的定性分析,也可以是对所述试样的还原力的程度进行分析的定量分析。在本专利技术中,所述还原步骤在pH2.4以下的条件下进行。因此,本专利技术的分析方法例如在所述还原步骤中,含有所述试样和所述色素试剂的反应体系的PH可以为pH2.4以下。所述反应体系的PH例如在所述色素试剂和所述试样的接触时或者接触之后调节为PH2.4以下。所述反应体系例如优选液体体系,也可以是含有所述试样和所述色素试剂的反应液或者还原液。在本专利技术的分析方法中,对于所述试样,没有特别的限制。如前述,根据白蛋白以及蛋氨酸对峰值波长的偏移带来影响,本专利技术例如能够应用在含有白蛋白以及蛋氨酸中的至少一者的试样中。所述试样例如为生物体试样,作为具体例,可以举出血液、唾液、尿、目艮泪、汗等。所述血液例如为红血球、全血、血清、血浆等。在这些之中,优选血液。所述试样例如从操作容易出发优选液状的试样(液体试样)。所述试样例如可以将所述试样的未稀释液直接作为液体试样使用,也可以将溶剂中悬浮、分散或者溶解所述试样的稀释液作为液体试样使用。在所述试样是固体的情况下,例如可以将所述溶剂中悬浮、分散或者溶解了所述试样的稀释液作为液体试样使用。对于所述溶剂,没有特别的限制,例如为水、缓冲液等。对于所述缓冲液,没有特别的限制,例如为Tris缓冲液、醋酸缓冲液、硼酸缓冲液、柠檬酸缓冲液、巴比妥缓冲液、各种Good缓冲液等。对于所述缓冲液的浓度,没有特别的限制,例如为10?lOOmmol/L。在本专利技术的分析方法中,对于所述色素试剂,没有特别的限制,例如可以举出混合了所述三价铁化合物和所述氰化物的氰化铁络合物。对于所述氰化铁络合物,没有特别的限制,例如可以举出硫氰酸铁(2+)铁络合物、铁氰化合物([Fe(CN)6D铁络合物等。在本专利技术的分析方法中,对于所述三价铁化合物,没有特别的限制,例如可以举出氯化铁(III)、硫酸铁(III)等。在本专利技术的分析方法中,所述三价铁化合物例如可以使用一种,也可以并用两种以上。在本专利技术的分析方法中,对于所述氰化物,没有特别的限制,例如可以举出硫氰酸化合物、铁氰化合物等。对于所述硫氰酸化合物,没有特别的限制,例如可以举出硫氰酸钾、硫氰酸钠、硫氰酸铵等。在本专利技术的分析方法中,所述氰化物例如可以使用一种,也可以并用两种以上。在所述还原步骤中,例如对于所述色素试剂和所述试样的添加顺序,没有特别的限制。对于所述添加顺序,例如可以预先将含有所述三价铁化合物和所述氰化物的氰化铁络合物(以下,也称为“混合色素试剂”)作为所述色素试剂而与所述试样进行混合,也可以通过混合所述三价铁化合物、所述氰化物以及所述试样,来混合所述三价铁化合物和所述氰化物的混合色素试剂与所述试样。在所述还原步骤中,例如还可以添加如前述的溶剂。在前者的情况下,对于所述混合色素试剂,例如可以使用将所述三价铁化合物和所述氰化物分别添加到溶剂中,并以溶液的状态进行混合的混合液,也可以使用将所述三价铁化合物和所述氰化物添加到溶剂中,并以溶液的状态使用。所述溶剂例如能够引用前述的例示。在后者的情况下,可以将所述三价铁化合物、所述氰化物以及所述试样添加到所述溶剂中,并进行混合。在所述还原步骤中,对于含有所述试样和所述色素试剂的所述反应体系的组成比,没有特别的限制。对于所述反应体系中的所述试样的比率(v本文档来自技高网...
还原力的分析方法以及还原力的分析试剂

【技术保护点】
一种还原力的分析方法,其特征在于,包括:还原步骤,在试样的存在下,在pH2.4以下的条件下,对含有三价铁化合物和氰化物的色素试剂进行还原;以及光学测定步骤,对所述还原步骤中得到的还原体的峰值波长进行光学测定。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员:大宫一纮
申请(专利权)人:爱科来株式会社
类型:发明
国别省市:日本;JP

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