基于半纤维素酶的工程菌及其实现方法技术

技术编号:10652771 阅读:172 留言:0更新日期:2014-11-19 15:10
本发明专利技术涉及基因工程技术领域的半纤维素酶的工程菌及其实现方法,以灰略红链霉菌基因组DNA经过全基因合成构建得到的pUC57‐XL载体为模板,与含有酶切位点的引物进行PCR扩增并对应分别得到编码木聚糖酶的核苷酸序列XL和编码木糖苷酶的核苷酸序列XO;然后将扩增得到的基因序列依次连接到共表达载体pETDuet‐1,最终重组共表达载体pETDuet‐XL‐XO;之后将该重组共表达载体转化到大肠杆菌表达菌株内,获得转基因共表达菌株。本发明专利技术能够应用基因工程手段实现木聚糖酶和木糖苷酶体外的大量表达合成,最终实现半纤维素的原位快速降解。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种半纤维素酶的工程菌,其特征在于,该工程菌为通过全基因合成获得的木聚糖酶和木糖苷酶的重组过表达菌株;所述的木聚糖酶和木聚糖酶分别为灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)JSD‐1内切‐β‐1,4‐木聚糖酶及β‐1,4‐木糖苷酶;所述的内切‐β‐1,4‐木聚糖酶的核苷酸序列XL,如SEQ ID No.1所示,β‐1,4‐木糖苷酶的核苷酸序列XO,如SEQ ID No.2所示;分别对应1140bp,编码379个氨基酸以及1140bp,编码505个氨基酸。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:周培冯海玮支月娥孙玉静罗艳青
申请(专利权)人:上海交通大学
类型:发明
国别省市:上海;31

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